苏丹红残留酶联免疫检测技术研究

通过对苏丹红分子结构进行改造,制备了半抗原及人工抗原,免疫动物,制备了苏丹红特异性抗体。该抗体灵敏度为0.5μg/L,对苏丹红I号交叉反应率为100%,对对位红交叉反应率为120%,对于苏丹红II、III、IV号均小于1%。基于该抗体建立了简介竞争性酶联免疫法检测辣椒酱最低检测限(LOD)为27.64μg/kg,定量限(LOQ)为30μg/kg,30μg/kg～90μg/kg添加水平回收率为96.7%～134.1%,变异系数小于15%,可初步用于苏丹红的实验室分析。

链霉素和双氢链霉素检测技术研究进展

本文介绍了"链霉素及其衍生物双氢链霉素药物特性及其在动植物疫防治上的应用,并对微生物法、免疫法和气相色谱法、液相色谱法、质谱法、毛细管电泳法以及液相色谱质谱联用方法等不同检测方法进行了分析,对链霉素和双氢链霉素检测方法进行展望。

β-激动剂类兽药残留检测技术研究进展

文中介绍了β-激动剂类兽药的特性、残留危害以及目前国内外主要的检测方法和技术,包括高效液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱质谱联用法、毛细管电泳技术、免疫分析技术以及生物传感分析法,并对此类药物残留分析前景进行了展望。

动物源性食品中群勃龙ELISA检测技术的研究与应用

采用琥珀酸酐法对群勃龙进行化学修饰,合成半抗原,免疫动物,制备了特异性强的群勃龙单克隆抗体。建立了群勃龙ELISA检测方法,其灵敏度为0.05μg/L,对群勃龙的交叉反应率为100%,对去氢表睾酮和睾酮交叉反应率小于1%,19-去甲睾酮交叉反应率小于4.5%。以2.5,5.0,10.0μg/kg添加水平的牛肉样本回收率范围为78.4%~105.6%,变异系数小于15%。该方法的建立为群勃龙残留检测提供了可靠的分析检测手段。

红霉素药物残留检测技术的研究进展

本文介绍了红霉素药物的特性、残留危害以及目前国内外主要的检测方法和技术,包括高效液相色谱法、薄层色谱法、气/质联用法、液/质联用法、微生物法、酶联免疫法,并对红霉素残留分析前景进行了展望。

畜禽产品中重要违禁兽药残留快检技术研究

随着社会经济的飞速发展和居民生活水平的逐步提高,人们对饮食安全的关注度也逐渐提高,其中畜禽产品的安全保障也越来越重要。该研究主要进行畜禽产品中激素类、硝基咪唑类及喹乙醇残留快速检测试剂盒及乳品中β-内酰胺类、β-内酰胺酶的胶体金试纸条技术研究及相关产品的开发。已开发己烯雌酚、氢化可的松、地塞米松、雌二醇、19-去甲睾酮质、硝基咪唑类、喹乙醇代谢物的检测试剂盒产品7种以及氢化可的松、群勃龙、地塞米松、β-内酰胺类抗生素、β-内酰胺酶的检测试纸条产品5种。酶联免疫试剂盒的研发是采用将抗原抗体特异性免疫反应与酶联放大反应相结合的原理,具有特异针对性检测样本中残留的各种药物分子的特点。通过酶联放大原理,大大提高产品的灵敏度可至0.05~0.5μg/kg（L）之间,达到高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用检测法等精密分析仪器的限量标准;可对样本中的残留物质进行定性及半定量检测;检测时间由以往的仪器检测1天至几天等缩短至不超过2 h,大大提高了检测效率;可同时对几十至几百个样本快速检测,符合食品安全广泛、全面的检测需求;检测成本低,单个样本的检测仅为仪器检测方法的1/5~1/2;不需要配备大型的检测仪器,在基层的政府职能监管部门、中小型食品企业等日常监控检测工作中均可广泛应用。胶体金试纸条的开发是应用胶体金标记技术,以胶体金作为示踪物,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫金标技术。主要优势包括：（1）操作简便,一步操作,检测一个样本只需一个试纸条,无需其他辅助材料,液质样本仅需稀释处理,不需配备大型检测仪器,可在基层现场进行;（2）样本一次性检测量大,在排查及大型食品工业企业上万个样本的日常检测中极为适用;（3）检测所需时间短,5~10 min之内即可显示检测结果;（4）结果直观,通过观察质控线和检测线的颜色对结果进行判断,即使非专业人员也能进行检测操作和残留定性结果的确定。鉴于其检测方便、快捷的技术性能,尤其适用于在我国基层检测实验室、政府部门的市场监控检测、临时抽检中广泛推广使用,实现了生物免疫检测技术在食品安全流通消费领域的方便、快速检测,对食品安全的监督监管创造了必备条件,保障人民群众身心健康,为我国出口食品提供安全保障,促进农产品出口。

酶联免疫技术在食品安全与药物残留中的应用

酶联免疫吸附法(ELISA)是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合发展建立的一种免疫分析技术。不仅具有操作简便、快速、灵敏等优点,而且准确性好、特异性强、检测成本低,还可用于大批量样品的检测。从药物残留、生物毒素、微生物以及转基因食品安全性等方面,对该技术在食品安全检测中的应用进行了综述,并提出了存在的问题及相应的解决办法。

食品安全理化检测技术概述

食品安全理化检测的主要外在表征是理化指标、农兽药、重金属等问题,应对这些问题的检测方法主要有理化检测法和免疫学检测法,二者各有优缺点及应用范围,下面分别做简要介绍。

动物组织中磺胺二甲嘧啶残留检测ELISA试剂盒的研制

在建立竞争ELISA方法的基础上,首次研制出检测磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体快速检测试剂盒,并对其检测限、精密度、检测范围以及鸡肌肉组织中的添加回收实验做了详细研究。本试剂盒的检测限为1.0ng/ml,检测范围为1.0～81.0ng/ml,批内变异系数<8.9％,批间变异系数<9.5％,在10、60和200ng/ml水平鸡肌肉组织中添加,回收率为64.5％～85.5%,变异系数为6.0％～18.6%。与同类相关德国产试剂盒相比较,阳性符合率为100％。

猪传染性胃肠炎预防和治疗的研究进展

猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种以猪的严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病。现已成为一种世界性猪的疾病,随着分子生物学的发展,对TGEV的研究取得了较大的进展,就TGEV的预防和治疗的研究进展做一阐述,旨在为探索对该病的更为有效的预防和治疗方法奠定基础。

串联双柱固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量

建立了同时测定番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量的串联双柱净化-液相色谱-串联质谱方法。样品中的残留物用磷酸盐缓冲液(pH 4)提取,经分散固相萃取净化和串联双柱固相萃取净化后,用极性色谱柱在梯度洗脱条件下分离待测物,采用正离子电喷雾离子源(ESI+)在多反应监测(MRM)扫描模式下进行测定,外标法定量。链霉素和双氢链霉素在0.01～0.2 mg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)大于0.999。链霉素和双氢链霉素的定量限均为0.02 mg/kg,回收率为71%～101%,相对标准偏差为2.3%～15%。该方法操作简便,净化效果好,灵敏,准确,适用于检测和分析番茄酱及其制品中链霉素和双氢链霉素残留量。

酶联免疫法检测动物源性产品中阿维菌素残留

运用酶联免疫法(ELISA),建立定量检测动物源性产品中阿维菌素残留的方法。通过对6种不同种类动物源性产品中阿维菌素残留量的检测表明,该方法的最低检测限为1.0μg/kg,最低检测限附近的添加回收率在62.3%～94.3%之间。通过交叉反应试验表明,本方法还可用于测定动物源性产品中埃比菌素和依维菌素的残留量。

乳制品中牛IgG含量间接竞争性ELISA检测方法的研究

建立了牛初乳制品和添加了牛初乳成分的乳制品中牛IgG含量间接竞争性酶联免疫吸附测定方法,主要研究步骤包括:制备牛IgG保守区(Fc段),以Fc段为免疫原免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞进行细胞融合,制备特异性单克隆抗体及合成适合实际测定用途的ELISA试剂盒。应用本研究建立的方法对标准品和实际样品进行牛IgG含量检测的结果表明,该方法回收率在78.9%～117.5%,批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,检测结果稳定可靠,可满足目前国内牛初乳制品和添加了牛初乳成分的乳制品品质监控的需要。

猪血浆蛋白粉中IgG含量的酶联免疫检测方法研究

猪血浆蛋白粉已经成为断奶仔猪理想和必需的蛋白饲料来源。评价血浆蛋白粉质量的重要指标就是其中IgG的含量。研究通过制备猪IgG单克隆抗体,调试优化后建立了相应的酶联免疫检测方法。该方法最低检测浓度为10μg/g,阴性血浆蛋白粉添加10（1%）、100（10%）、200mg/g（20%）猪IgG标准品后用本方法测定回收率为73.1%～104.6%,批内、批间变异系数小于15%,可基本满足血浆蛋白粉质量监控需要。

牛免疫球蛋白G的应用及检测研究进展

牛免疫球蛋白G(IgG)是一类具有多种生物活性的免疫因子,主要来源于牛初乳中,已成为功能性食品的重要营养添加成分,牛IgG的含量直接决定了此类产品的质量。本文对牛免疫球蛋白的生物活性及功能进行了概述,并对牛IgG含量分析检测技术进行了阐述。

甘蔗宿根矮化病菌多克隆抗体制备及初步检测

以纯化培养的甘蔗宿根矮化病(RSD)病菌作为抗原,免疫健康家兔,制备了RSD多克隆抗体。采用间接酶联免疫吸附试验检测其效价,并通过斑点酶标免疫法(Dot blot enzyme immunoassays,DB-EIA)确定其工作浓度,同时与澳大利亚的抗体比较。结果表明,制备的RSD多克隆抗体效价大于1∶10000,在用DB-EIA法检测样本时的工作浓度以稀释10倍较好;与澳大利亚抗体的检测结果一致,但在印迹着色方面比澳大利亚的浅一些。试验结果表明,自制RSD抗体的效价略低于澳大利亚RSD抗体,但检测效果较好,可以满足今后在甘蔗生产上对RSD的检测要求。

酶联免疫吸附法测定番茄酱中链霉素和双氢链霉素的含量

应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定了番茄酱中链霉素(SMC)和双氢链霉素(DHSMC)的含量,并制备了检测试剂盒。通过戊二醛先后与SMC与牛血清蛋白(BSA)的交联反应制成SMC免疫原(BSA-SMC)。用相同方法,以鸡卵清蛋白(OVA)代替BSA,制得包被原(OVA-SMC)。用免疫原免疫8周龄的雌性BABL/c小鼠制备SMC单克隆抗体(SM-mAb),用OVA-SMC包被酶标板。以百分吸光度(A/A0)为纵坐标,SMC标准溶液的质量浓度为横坐标,得到SMC浓度在0.05～4.05μg.L-1之间呈线性关系。检出限(3s)为1.98μg.kg-1。试验测得回收率在79.4%～92.0%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)(批内及批间)均小于10%。DHSMC在此条件也同样反应,故方法测得结果为两者的总量。