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毛白杨TIR-NBS-LRR基因转化烟草的研究
被引量:
10
1
作者
李海霞
张志毅
+3 位作者
张谦
安新民
李琰
刘婷婷
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期73-78,共6页
该文采用农杆菌介导法将从毛白杨中克隆得到的TIR-NBS-LRR抗病基因(PtDRG01)导入烟草中,经抗生素筛选和PCR分子检测,获得了一批阳性转化植株。进而对这些阳性转化植株进行烟草花叶病毒接种实验,从表型观察结果发现,在接种病毒1周和6周后...
该文采用农杆菌介导法将从毛白杨中克隆得到的TIR-NBS-LRR抗病基因(PtDRG01)导入烟草中,经抗生素筛选和PCR分子检测,获得了一批阳性转化植株。进而对这些阳性转化植株进行烟草花叶病毒接种实验,从表型观察结果发现,在接种病毒1周和6周后,转基因烟草株系TG-11的发病程度明显低于非转基因烟草。荧光定量分析结果显示,转基因烟草株系TG-11叶片中的烟草花叶病毒(TMV)数量显著低于非转基因植株,且该转基因株系中的PtDRG01基因转录水平显著高于非转基因植株。这些结果表明,毛白杨PtDRG01基因具有明显的抗病功能,其高效表达能够显著提高烟草的抗TMV能力。该文通过对烟草的遗传转化与病毒接种实验,鉴定了PtDRG01基因的功能,可为其他TIR-NBS-LRR基因的功能鉴定提供参考。
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关键词
毛白杨
TIR-NBS-LRR基因
转基因烟草
烟草花叶病毒
抗病性
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职称材料
毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建
被引量:
1
2
作者
刘军梅
李昊
+3 位作者
崔东清
叶梅霞
张志毅
安新民
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期55-62,共8页
利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-li...
利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。
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关键词
毛白杨
labA—like
克隆
表达
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职称材料
题名
毛白杨TIR-NBS-LRR基因转化烟草的研究
被引量:
10
1
作者
李海霞
张志毅
张谦
安新民
李琰
刘婷婷
机构
北京林业大学林木育种国家工程实验室、林木花卉遗传育种教育部重点实验室
出处
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期73-78,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30872043)
高等学校博士学科点专项科研基金项目(20070022003)
文摘
该文采用农杆菌介导法将从毛白杨中克隆得到的TIR-NBS-LRR抗病基因(PtDRG01)导入烟草中,经抗生素筛选和PCR分子检测,获得了一批阳性转化植株。进而对这些阳性转化植株进行烟草花叶病毒接种实验,从表型观察结果发现,在接种病毒1周和6周后,转基因烟草株系TG-11的发病程度明显低于非转基因烟草。荧光定量分析结果显示,转基因烟草株系TG-11叶片中的烟草花叶病毒(TMV)数量显著低于非转基因植株,且该转基因株系中的PtDRG01基因转录水平显著高于非转基因植株。这些结果表明,毛白杨PtDRG01基因具有明显的抗病功能,其高效表达能够显著提高烟草的抗TMV能力。该文通过对烟草的遗传转化与病毒接种实验,鉴定了PtDRG01基因的功能,可为其他TIR-NBS-LRR基因的功能鉴定提供参考。
关键词
毛白杨
TIR-NBS-LRR基因
转基因烟草
烟草花叶病毒
抗病性
Keywords
Populus tomentosa Carr.
TIR-NBS-LRR type of gene
transgenic tobacco
tobacco mosaic virus
disease resistance
分类号
S792.117 [农业科学—林木遗传育种]
S718.46 [农业科学—林学]
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职称材料
题名
毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建
被引量:
1
2
作者
刘军梅
李昊
崔东清
叶梅霞
张志毅
安新民
机构
北京林业大学林木育种国家工程实验室、林木花卉遗传育种教育部重点实验室
、
国家
林业
局树木
花卉
育种
与生物
工程
重点
开放
实验室
出处
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期55-62,共8页
基金
林业公益性行业科研专项(201004009)
国家自然科学基金项目(30571511)
“863”国家高技术研究发展计划项目(2009AA10Z107)
文摘
利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。
关键词
毛白杨
labA—like
克隆
表达
Keywords
Populus tomentosa
labA-like gene
cloning
expression
分类号
S718.46 [农业科学—林学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
毛白杨TIR-NBS-LRR基因转化烟草的研究
李海霞
张志毅
张谦
安新民
李琰
刘婷婷
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
10
下载PDF
职称材料
2
毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建
刘军梅
李昊
崔东清
叶梅霞
张志毅
安新民
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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职称材料
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