盐胁迫条件下杨树盐分与甜菜碱及糖类物质变化

以抗旱耐盐性强的胡杨 (Populuseuphratica)和非抗盐的群众杨 (P .popularis‘35 - 44’)为实验材料 ,研究了盐胁迫条件下盐分与甜菜碱、还原糖、蔗糖以及水溶性糖等细胞相容溶质的动态变化。两种杨树在盐处理期间表现出明显差异 :群众杨下部叶片首先表现出盐害症状 ,处理后两周苗木上部叶片也出现盐害并脱落。而胡杨在试验期间仅下部叶片发黄脱落 ,盐处理 1 5天后落叶量仅为 1 6%。群众杨盐害症状的出现主要是由叶片中盐离子的大量累积所致。与之比较 ,胡杨拒吸Na+的能力及控制Cl- 转运的能力均优于群众杨。另外 ,胡杨的耐盐性强于群众杨也与其有机溶质的变化有关。受到盐胁迫后胡杨根叶中甜菜碱浓度显著提高 ,在处理后 1 5天达到最高值 ,特别是叶片中甜菜碱的浓度提高了 2 4 3倍 ,达到 1 899.8μmol/L ,根中甜菜碱含量也增加了 9倍。此外 ,盐处理后胡杨叶和根中的还原糖、水溶性糖和蔗糖含量均呈明显上升趋势 ,分别在第 4天和第 1 5天达到峰值。与胡杨相反 ,耐盐性弱的群众杨在盐胁迫期间 ,叶中甜菜碱和糖含量并无显著提高 ,根中糖分水平还明显降低。由此可以得出结论 ,胡杨渗透调节能力高于群众杨 。

反相HPLC离子对色谱法测定植物组织中的甜菜碱

开发了一种用反相HPLC离子对色谱法测定植物组织中甜菜碱的方法。此法的特点是准确、灵敏、简便、费用低。实验分别以胡杨 (PopuluseuphraticaOliv .)悬浮细胞 ,胡杨和群众杨 (P .‘popularis 35 44’)苗木的叶、根组织为材料。样品提取液经浓缩后依次通过Dowex 1× 8阴离子交换树脂柱和Dowex 5 0W× 2阳离子交换树脂柱进行纯化。最后用NH4 OH洗脱阳离子交换树脂柱 ,洗脱液浓缩干后用流动相溶解。样品用C18反相色谱柱进行分离。流动相为 5 0mmol/LKH2 PO4 (pH 4.45 )和 0 .1%PICB_8(辛烷磺酸 ) ,流速 0 .7mL/min ,192nm波长测定。此色谱条件能使甜菜碱与其他组分很好地分离 ,甜菜碱的保留时间为 6 .3min。甜菜碱的加样回收率达到 85 %～ 96 %。经测定 ,杨树根、叶组织中甜菜碱含量为 0 .0 6～ 0 .75 μg/g鲜重 ,叶中甜菜碱浓度高于根。胡杨悬浮细胞经盐处理后甜菜碱浓度有所增加 ,从 0 .45提高到 0 .77μg/g鲜重。

一种省时高效的木本植物蛋白双向电泳分析方法

对蛋白提取方法进行改良并引用毛细管等电聚焦技术，不仅大大降低了木本植物体内次生代谢物质对双向电泳结果的干扰，明显改善了分析效果，而且又经济、快捷，获得了分析木本植物蛋白较好的双向电泳方法．在对毛白杨叶片和胡杨组织分析中获得较满意的结果．

低温诱导唐古特红景天细胞分泌抗冻蛋白

选择青海高原海拔 40 0 0m高山上生长的唐古特红景天为实验材料 ,以叶片为外植体 ,在MS +BA2 +NAA0 2 固体培养基上诱导出黄绿色、松脆愈伤组织 .愈伤组织细胞在同样成分的液体培养基中培养获得成功 .在悬浮培养液中可检测到分泌蛋白的存在 .经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明 ,低温锻炼或脱落酸 (ABA)诱导后 ,细胞分泌蛋白的多肽谱带数增加 .与此相对应的是 ,细胞的抗冻能力也明显提高 .PAS染色揭示多肽中均含有糖基 .通过测定热滞值 。

胡杨液泡膜微囊的纯化及其质子转运活性

为进一步研究液泡膜及 H+ - ATP酶在胡杨抵御盐胁迫中所起的作用 ,比较了研磨、捣碎和超声破碎三种细胞破碎方法 ,从悬浮培养的胡杨细胞中制备液泡膜微囊的效果 ;并用差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心纯化了胡杨液泡膜微囊 .通过测定 H+ - ATP酶对 NO-3 、VO3-4和 Na N3的敏感性 ,以及焦磷酸酶质子转运活性表明 ,液泡膜微囊主要分布在 0 %～ 2 5%的蔗糖界面上 .捣碎法破碎细胞结合差速离心和蔗糖密度梯度离心可获得正向微囊比例高。

胡杨液泡膜微囊H^+ -ATPase质子泵活性研究(英文)

将悬浮培养的胡杨 (PopuluseuphraticaOliv .)细胞捣碎后 ,通过差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心获得富集液泡膜的膜微囊。通过连续监测吖啶橙的荧光淬灭研究膜微囊上H+_ATPase的质子转运特性。结果表明 ,质子转运依赖于ATP ,其表观米氏常数Km 值为 0 .6 5mmol/L。质子泵活性受pH和温度的影响较大。测定液pH值为7.5时 ,质子泵的活性最高 (测定温度选定为 2 2℃ )。一些二价阳离子可启动H+_ATPase的质子转运 ,其中Mg2 +的作用远高于Fe2 +。在实验条件下 ,Ca2 +、Cu2 +和Zn2 +均不能启动H+_ATPase的质子转运。质子跨膜转运还可被一价阴离子激活 ,激活作用的顺序为 :Cl->Br->I->F-。质子泵活性受NEM(乙基马来酰亚胺 )、DCCD (二环己基碳二亚胺 )、NO-3 和BafilomycinA1的强烈抑制 ,但对Na3VO4 和NaN3 不敏感。这些性质说明胡杨液泡膜微囊上的H+_ATPase属于囊泡型的ATPase。