基于ITS条形码的滇鸡血藤及混伪品分子鉴定

目的:基于内转录间隔区(ITS)序列,运用DNA条形码技术对滇鸡血藤药材及其混伪品进行序列比对分析,根据单核苷酸多态性位点构建滇鸡血藤单倍型数据库,建立快速、准确鉴定滇鸡血藤的分子鉴定方法。方法:以滇鸡血藤及其混伪品为材料,利用DNA提取试剂盒,分别提取滇鸡血藤及其混伪品的总DNA,对ITS序列进行聚合酶链式反应扩增及测序分析,使用DNAMAN软件统计其片段长度及变异位点个数,使用MEGA软件对数据进行分析比对,计算Kimura2-parameter遗传距离,并利用邻接法建立系统发育树进行分析。结果:滇鸡血藤ITS序列片段长度为675 bp,共包括19种单倍型,与其主要混伪品的差异位点为212、223、224 bp,系统发育树显示,ITS序列能够区分滇鸡血藤及其混伪品。结论:ITS条形码可以作为区分鉴定滇鸡血藤及其混伪品的分子条形码,包含19个单倍型的单倍型数据库覆盖了滇鸡血藤全部的单倍型。

山萸肉炖制工艺优化

目的优化山萸肉炖制工艺。方法在单因素试验基础上,以酒蜜比、炖制时间、烘干温度、烘干时间为影响因素,莫诺苷、獐芽菜苷、马钱苷、山茱萸新苷Ⅰ、没食子酸含量的总评“归一值”(OD值)为评价指标,正交试验结合层次分析法优化炖制工艺。结果最佳条件为净山萸肉加适量辅料拌匀,密闭,隔水炖制6 h至辅料被吸尽,取出,在50℃下烘干5 h,每100 kg用辅料35 kg(酒蜜比30∶5),OD值为96.6。与酒萸肉比较,酒蜜萸肉炖制后莫诺苷、獐芽菜苷、马钱苷、山茱萸新苷Ⅰ含量升高。结论该方法准确可靠、重复性好,可用于炖制酒山萸肉。