国产血清人附睾蛋白4检测化学发光法的建立及初步性能评价

目的 建立一种基于化学发光免疫分析法（CLIA）原理检测血清人附睾蛋白4（HE4）的方法 ,并进行方法性能验证.方法 利用一对HE4单克隆抗体分别偶联异硫氰酸荧光素（FITC）和碱性磷酸酶（ALP）,建立一个测定血清HE4的双抗体夹心的化学发光法.通过磁珠结合抗FITC抗体进行分离,加入ALP底物后光信号值与HE4浓度成正比.然后对方法的精密度、准确度、线性范围、特异性和稳定性等进行初步评价;并与市场上已有的国外进口HE4测定试剂盒比较.结果 方法的重复性精密度和日间精密度分别小于4.0%和5.0%;回收实验在90.0%~110.0%范围内;最低检出限和功能灵敏度分别为5.0 pmol/L和为15.0 pmol/L;线性范围是15.0~1500.0 pmol/L;试剂可以稳定12个月;与市场上已有进口试剂盒比对,其相关系数均大于0.99;本研究方法曲线下面积为0.896其他两种方法分别为为0.895和0.900.结论 本研究建立了一种敏感、重复性好和线性范围宽的血清HE4化学发光法.