血红素加氧酶系统对ox-LDL介导的血管平滑肌细胞增殖的影响及其分子机制

目的探讨血红素加氧酶(HO)特异性抑制剂 -锌原卟啉-9(ZnPP -9)对ox -LDL介导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其可能的分子机制 ,为HO在动脉粥样硬化发病中的作用及其防治提供一定的理论依据。方法(1)分组 :无血清培养的生长停止的VSMCs为A组 ;A组 +10 %FBS(胎牛血清)为B组 ;A组 +ox-LDL为C组 ;C组 +ZnPP -9为D组 ;C组 +去铁胺(Fe +++螯合剂)为E组 ;C组 +霍乱毒素(G蛋白循环阻滞剂)为F组 ;C组 +放线菌素D(基因转录抑制剂)为G组。(2)监测指标 :采用倒置显微镜和MTT法观察VSMC生长状况 ;检测cAMP/cGMP的水平、c_fos和c_mycmRNA及其蛋白质和HO蛋白质的表达。结果(1)ox -LDL诱导生长停止的VSMCs明显增殖 ,ZnPP -9组在监测6h、12h和24h其生长曲线高于ox -LDL(C组) ,在其峰值72h与C组重合 ,在观察终点(96h)略低于C组 ;A组和G组相同 ,均处于生长停止状态 ,而B组、F组和E组VSMCs生长曲线均明显高于C组和D组 ;尽管E组(去铁胺组)VSMCs生长曲线高于C组和D组 ,但其VSMCc体积明显增大 ,其数量减少。(2)凡cAMP水平明显高于A、G两组的其余各组 ,其生长曲线均高于A组和G组 ,但cAMP水平和cAMP/cGMP比值与VSMC生长状况间无相关性 ;c_fos和c_myc细胞原位杂交结果显示在各时相点的表达相似 ,A组与G组均未见明显的表达 。

血红素加氧酶系统对ox-LDL介导的血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制

目的探讨血红素加氧酶 (HO)系统对ox-LDL介导的血管平滑肌细胞 (VSMCs)增殖的影响及其机制。方法采用倒置显微镜和MTT法观察VSMC生长状况 ;检测VSMC中cAMP/cGMP的水平、c -fos和c -mycmRNA及其蛋白质和HO -1蛋白质的表达。结果HO特异性抑制剂锌原卟啉 -9(ZnPP -9)组在6、12h的VSMCs生长曲线与ox-LDL组(C组)间无明显差异(P>0.05) ;然而 ,48h明显高于C组 (P<0.01) ;24、72h与ox-LDL组重合 ,在终点 (96h)略高于ox-LDL组 (P>0.05) ;ZnPP -9组与ox-LDL组c -myc、c-fosmRNA及其蛋白和HO -1蛋白的表达均较强。尽管HO分解的代谢产物三价铁 (Fe +++)螯合剂 (去铁胺 )组生长曲线高于ZnPP -9组 (48h时与ZnPP -9组重合 )和ox -LDL组 (P<0.01) ,但VSMCs体积明显增大 ,数量减少。结论锌原卟啉 -9抑制血红素加氧酶活性而促进ox-LDL介导的血管平滑肌细胞增殖效应 ,去铁胺螯合Fe +++能抑制VSMCs数量增加。其机制可能与HO -1活性和c -myc、c-fosmRNA及其蛋白表达有关 ,而与HO -1蛋白表达和cAMP/cGMP水平无明显关系。

肾性高血压大鼠动脉收缩、舒张功能改变的研究

目的探讨肾性高血压大鼠(RHR)动脉收缩、舒张功能的改变及其对钾离子通道阻断剂反应的相应变化。方法20只SD大鼠随机均分为对照组及RHR组(n=10),RHR组用内径为0.2mm的银夹夹住大鼠左肾肾动脉起始部制作两肾一夹RHR模型,而对照组只分离左肾动脉不套银夹。以无创性套尾法于术前及术后5周每周测量一次血压、心率。RHR模型制成5周后经水合氯醛腹腔注射处死大鼠,分别取两组大鼠股动脉、腹主动脉行离体动脉环实验,观察两组大鼠股动脉、腹主动脉对血管活性物质KCl、去甲肾上腺素(NE)、硝酸甘油(NTG)以及钾离子通道阻断剂四乙铵(TEA)、4-氨基吡啶(4-AP)的反应变化。结果1周后,对照组、RHR组血压开始升高(P<0.05),3周时达平台期(P<0.01),但心率无明显变化。5周后与对照组比较,RHR组股动脉及腹主动脉对KCl、不同浓度NE的收缩反应明显增强(P<0.05),对TEA及4-AP的相对收缩反应明显减弱(P<0.05),对NTG(浓度为10-2mmol/L)的舒张反应明显减弱(P<0.05)。结论RHR动脉血管收缩反应增强,舒张反应减弱,对钾通道阻断剂TEA、4-AP收缩反应减弱,考虑RHR动脉功能变化可能与钾通道功能的变化相关。

反复正加速度暴露致兔缺血心肌动作电位变化的研究

目的对比研究正常和缺血心肌在正加速度(+Gz)暴露下动作电位的变化,探讨心肌在冠脉病变所致缺血基础上发生心律失常的可能机制。方法新西兰大白兔60只,随机分为对照组(A组)、加速度组(B组)、缺血组(C组)、缺血+加速度组(D组),每组15只。采用单向动作电位法,记录并对比分析各组动物心肌缺血、+Gz暴露后单相动作电位振幅(MAPA)、0相最大上升速率(Vmax)、复极达50%振幅的单相动作电位时程(MAPD50)、复极达90%振幅的单相动作电位时程(MAPD90)的变化;记录完动作电位后再行S1S1程序刺激,观察心律失常诱发率。结果各组间MAPA和Vmax均无明显变化(P>0.05);与A组比较,B、C、D组MAPD50和MAPD90均明显缩短(P<0.05),其中D组较B、C组缩短程度大(P<0.05)。B、C、D组心律失常诱发率均明显高于A组(P<0.05),且D组明显高于B、C组(P<0.05)。结论 +Gz或缺血暴露后心肌细胞动作电位时程缩短,心律失常诱发率增加,且两因素之间有叠加效应,提示复极过程中存在相关离子通道功能异常。

多入路联合介入治疗复杂主-髂动脉硬化性闭塞症

目的：探讨多入路联合介入治疗技术在复杂主-髂动脉硬化性闭塞症的应用。方法选取2011年6月至2013年6月在空军总医院住院的复杂主-髂动脉硬化性闭塞症15例，男性12例，女性3例，年龄55-85岁，平均年龄（68.6±10.2）岁。回顾性分析所有患者的病变位置、入路、操作手法、介入技术及治疗结果等相关资料。结果15例患者共20处闭塞病变行介入血管成型术，双侧股动脉联合入路8例，单侧肱动脉＋单侧股动脉2例，单侧肱动脉＋双侧股动脉5例。19处闭塞病变完全开通，1例闭塞病变内径恢复80%（因扩张疼痛，支架未能完全扩张），开通成功率100%。并且无严重并发症发生。结论多入路联合介入治疗复杂主-髂动脉硬化性闭塞症是安全、有效的，可以增加介入治疗成功率；合理的入路选择、多种操作技术的综合应用可以扩展主-髂动脉硬化性闭塞症的介入治疗范围。

吡格列酮对自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的研究

目的观察胰岛素增敏剂吡格列酮(PIO)对培养的自发性高血压大鼠(SHR)和WKY大鼠的心脏成纤维细胞(CFs)胶原合成以及一氧化氮合酶-一氧化氮(NOS-NO)的影响。方法采用胶原酶消化法培养SHR和WKY的CFs,羟脯氨酸比色法测定CFs培养上清胶原含量,硝酸还原酶法测定CFs培养上清NO浓度,分光光度计法测定CFs培养上清NOS活性。结果(1)在不同浓度及不同时间点的PIO干预下,SHR和WKY的CFs上清羟脯氨酸含量均较对照组明显降低,差异具有显著性(P<0.01)。(2)5×10-6mol/L的PIO干预48h,SHR和WKY的CFs培养上清NO浓度、NOS活性均较各自对照组明显上升,差异非常显著(P<0.001)。结论PIO呈浓度和时间依赖性的方式抑制SHR的CFs的胶原合成,上调NOS-NO水平。

吡格列酮对自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞周期的影响

目的研究盐酸吡格列酮对培养的自发性高血压大鼠(SHR)和血压正常大鼠(WKY)心脏成纤维细胞(CFs)细胞周期的影响,并进一步探讨其与NO-NOS系统的关系。方法采用胶原酶消化法培养SHR和WKY的CFs,流式细胞仪(FCM)分析技术检测细胞周期,硝酸还原酶法测定CFs培养上清NO浓度,分光光度法测定CFs培养上清NOS活性。结果0.1、1、5和10μmol/L的吡格列酮作用48h后,SHR、WKY CFs的G0/G1期细胞百分率较对照组显著增高(均P<0.01),S期细胞百分率、G2/M期细胞百分率和增殖指数则显著低于对照组(P<0.01,P<0.05),且随着作用浓度的增加,吡格列酮对细胞周期的影响逐渐增强。5μmol/L的吡格列酮干预48 h后,SHR和WKY的CFs培养上清NO浓度分别为(111.2±12.4)μmol/L和(221.7±35.3)μmol/L,与各自对照组(76.8±2.4)μmol/L、(112.1±8.9)μmol/L相比,差异非常显著(P<0.01);SHR和WKY大鼠CFs培养上清NOS活性分别为(208±18)μkat/L、(257±30)μkat/L,和各自对照组(148±10)μkat/L、(187±8)μkat/L相比,亦有非常显著性差异(P<0.01)。NO浓度和NOS活性呈显著正相关(r=0.964,P<0.01)。结论吡格列酮能够抑制SHR CFs的细胞周期增殖,其效应可能与上调NO-NOS系统活性有关。

吡格列酮对鼠心脏成纤维细胞周期的影响

【目的】研究盐酸吡格列酮对Wistar大鼠心脏成纤维细胞(CFs)细胞周期的影响及其与一氧化氮-一氧化氮合酶(NO-NOS)系统的关系。【方法】采用胶原酶消化法培养Wistar大鼠的CFs,流式细胞仪(FCM)分析技术检测细胞周期,硝酸还原酶法测定CFs培养上清NO浓度,分光光度法测定CFs培养上清NOS活性。【结果】0.1、1、5和10μmol/L的吡格列酮作用48 h后,CFs的G0/G1期细胞百分率较对照组显著增高(均P<0.01),S期细胞百分率、G2/M期细胞百分率和增殖指数则显著低于对照组(均P<0.01),且随着作用浓度的增加,吡格列酮对细胞周期的影响逐渐增强。5μmol/L的吡格列酮干预48 h后,CFs培养上清NO浓度为221.7±35.3μmol/L,与对照组(112.1±8.9μmol/L)相比,差异非常显著(P<0.01);NOS活性为256.7±30.1 nkat/mL,和对照组(186.7±8.3 nkat/mL)相比,差异亦有非常显著性(P<0.01)。NO浓度和NOS活性呈显著正相关(r=0.964,P<0.01)【结论】吡格列酮能够抑制CFs的细胞周期增殖,其效应可能与上调NO-NOS系统活性有关。