不同活性的胶原酶对大鼠心肌细胞分离的影响

目的研究不同活性的胶原酶对大鼠心肌细胞存活率的影响。方法用4种不同活性的胶原酶以常规酶解法分离成年大鼠心肌细胞，观察分离即刻（D时点）、复钙60min后（E时点）和电刺激]Orrdn后（F时点）心肌细胞的存活率，采用IonOptix单细胞动缘检测系统同步检测心肌细胞收缩幅度（ph）、ph占单个心肌细胞长度（b1）的百分比（以ph／bl表示）、心肌细胞收缩速率（＋dL／dt）和心肌细胞舒张速率（-dL／dt）等指标。结果观察D、E、F时点心肌细胞存活率，结果表明299U／mg胶原酶的分离效果286U／mg、203u／mg和403U／mg的胶原酶（P〈0．05）。D时点4组心肌细胞的存活率没有差别，E、F时点时存活率降低。在心肌细胞收缩／舒张功能的检测中，299U／mg的胶原酶分离效果最佳，203、286、299U／mg和403U／mg组的ph分别是0．13±0．05、0．14±0．06、0．14±0．06μm和0.11±0．05μm；分别是8．8％±．4％、8．％±2．3％、9．2％±3.5％和7．5％±2．2％；＋dL／dt分别是1．8±0．6、1．9±0．6、2．0±0．7μm／s和1．7±0．5μm／s，-dL／dt分别是1．9±0．6、2．0±0．7、2．1±0．6μm／S和1．7±0．6μm／s。结论采用一定范同（203-299U／mg）的胶原酶对心肌细胞进行分离，酶活性越大，消化时间越短，心肌细胞存活率高、收缩／舒张功能好，其中以299U／mg活性的胶原酶效果最好。活性偏高或偏低的胶原酶分离心肌细胞的存活率和收缩／舒张功能均明显降低。