血液病致ABO抗原减弱的血型基因定型研究

目的探讨血清学定型出现ABO血型抗原减弱的血液病患者的基因分型,为临床输血提供血型依据。方法 2012年7月至2013年6月对320例血液病患者,采用血型血清学方法进行ABO血型鉴定,并对ABO血型抗原减弱的标本采用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)进行基因分型。结果 53例试管法正反定型相符,可确定ABO血型;210例反定型抗体减弱或异常;57例抗原减弱。57例抗原减弱患者中,急性髓细胞白血病(AML)35例,骨髓增生异常综合征(MDS)12例,再生障碍性贫血(AA)3例,慢性粒细胞白血病(CML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)各2例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)、淋巴瘤、特发性血小板减少性紫癜(ITP)各1例。经基因分型,57例患者中A抗原减弱23例,确定A型血,B抗原减弱26例,确定B型血,A、B抗原均减弱8例,确定AB型血。结论 ABO血型抗原减弱最多见于AML和MDS患者,进行血型基因检测可明确ABO血型。ABO抗原减弱时经基因分型确定血型后,输血时可同型输血。

北京市稀有血型患者输血途径探讨

目的了解北京市稀有血型患者不同情况下输血途径,为相关政策制定提供依据。方法回顾性分析2000-2011年北京市稀有血型患者血液标本抗体筛查、疑难配血情况,对稀有血型患者血型血清学结果、临床诊断、不同输血方法进行分析。结果近11年来共发现7例罕见的稀有血型患者,检出率为9/10000;其中3例为Fy(a-b+)存在抗-Fya抗体,2例为D--存在抗-Hr0抗体,1例为Jk(a-b-)存在抗-Jk3抗体,1例为OhB-分泌型存在抗-HI抗体。其中2例患者通过中国稀有血型库提供相合血液(1例同时自体备血),3例通过亲属互助献血(1例同时自身输血),2例自身输血。结论稀有血型在输血人群中出现频率极低,此类患者相合性血液输注极为困难,制定稀有血型输血有关策略及建立和完善稀有血型库十分必要。

2021年北京地区孕妇产前不规则抗体分布情况及临床意义分析

目的 探讨2021年北京地区孕妇产前不规则抗体特异性分布情况及其对新生儿溶血病(hemolytic disease of newborn, HDN)的诊断、治疗及孕妇产前备血的临床意义。方法 选取2021年北京市红十字血液中心血型室抗体筛选阳性的孕妇血样243例,用0.01M二硫苏糖醇处理血浆进行抗体性质鉴定。结果 243例抗体筛选阳性的孕妇,年龄21~46岁,中位年龄29岁。Rh血型系统抗体最常见,共检出87例(35.80%),分别为抗-E及抗-c、E共62例,抗-D 15例,抗-C、e 4例,其他Rh系统抗体6例,分别为抗-C、D 2例,抗-c 2例,抗-Ce复合抗原抗体1例,抗-Hr0 1例;其次为MNS血型系统,共检出82例(33.74%),分别为抗-M 74例,抗-N 1例,抗-S 3例,抗-Mia 4例;Lewis血型系统35例(14.40%),分别为抗-Lea 30例,抗-Leb 2例,抗-Lea+抗-Leb 3例;Kidd血型系统5例(2.06%),分别为抗-Jka 3例,抗-Jkb2例;Duffy血型系统抗-Fyb 8例(3.29%);P系统抗-P1 3例(1.23%);多系统抗体4例(1.65%),分别为抗-c、E+抗-Jka1例,抗-E+抗-Lea 2例,抗-C、e+抗-S 1例;自身抗体4例(1.65%);试剂保存剂抗体3例(1.23%);未检出抗体特异性12例(4.94%)。结论 2021年北京地区孕妇产前抗体鉴定中,Rh血型系统抗体检出率最高,其次是MNS血型系统。孕妇产前不规则抗体筛查、抗体特异性和抗体性质鉴定,对预防、监测和治疗HDN及对孕妇产前备血、保障孕产妇的生命安全意义重大。

Lewis血型系统抗体的研究

目的探讨Lewis血型系统抗体对于输血前检查的影响。方法对医院送检的抗体筛选阳性、交叉配血不合的血标本做抗体鉴定。ABO定型采用试管法;试管法盐水介质和Liss/Coombs卡做抗体鉴定和交叉配血;同时鉴定Lewis血型。结果确认84例标本均为Lewis血型抗体,Lewis血型均为Le(a-b-);其中抗-Lea阳性标本74例,抗-Leb阳性标本8例,抗-Lea+Leb阳性标本2例。抗体筛选和鉴定试验,仅在盐水介质中抗体阳性24例,仅在Liss/Coombs卡抗体阳性14例,试管法和Liss/Coombs卡抗体均阳性46例。10例标本试管法ABO血型鉴定中干扰血型反定型。结论产生Lewis血型抗体的个体血型均为Le(a-b-);Lewis血型抗体可与ABO反定型试剂红细胞发生反应干扰ABO血型定型;盐水介质和抗人球蛋白介质抗体筛选并举可避免Lewis血型系统抗体的漏检。

B(A)血型的血清学和分子生物学定型及患者临床输血策略研究

目的对B(A)血型进行血清学和分子生物学定型,并对B(A)血型患者的血样进行分析,研究此类血型患者的输血策略。方法对58例正反定型不符的医院送检样本和本中心的献血员血样采用试管法鉴定ABO血型,同时采用PCR-SSP方法进行ABO基因分型;采用盐水介质和Liss-coombs卡交叉配血,分析论证38例该血型患者输注B型红细胞的可行性。结果 58例血样经血清学和分子生物学定型为B(A),其中39例为B(A)04,19例为B(A)02。38例临床医院送检的B(A)病例,与随机选择的100位B型献血员交叉配血,除1例有高效价抗-A的献血员与2例患者次侧盐水介质W+外,其余均相合。结论 B(A)血型有明确的血清学特异性,分子生物学定型B(A)02和B(A)04较常见,B(A)患者优先考虑输注O型洗涤红细胞和AB型血浆、AB型血小板,亦可输注配血相合的B型红细胞,抗-A效价低于128的B型血浆和B型血小板也可考虑输注。

北京地区疑难交叉配血意外抗体特异性分析

意外抗体是指ABO血型系统以外的抗体,即非抗-A、抗-B血型抗体,包括同种抗体和自身抗体,是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病（HDN）重要的因素。由于人种、民族和地域不同,意外抗体的特异性和分布也不同,在发达国家已基本实现主要血型系统的同型输注,产生意外抗体的病例相对较少。目前国内仅要求ABO血型和Rh D血型的同型输注,因此产生意外抗体的病例相对较多[1]。

Rh血型系统抗CE复合抗原抗体的研究

目的鉴定Rh血型系统抗CE复合抗原的抗体,推测患者Rh血型基因型,制订患者的输血策略。方法对4例抗体筛选阳性且Rh表型均为DCcEe的患者的血清采用LISS/Coombs卡做抗体鉴定,根据阴性排除法的原则确定抗体的特异性。结果 4例患者血清中均存在Rh血型系统抗CE复合抗原抗体,分别为抗-RH6(f或ce)1例、抗-RH7(Ce)1例、抗-RH27(cE)2例。结论 RH表型一致的人由于基因型的不同,其红细胞上会存在或缺失某些CE复合抗原,缺失抗原的人经过输血或妊娠免疫,可能产生针对该复合抗原的抗体,而这种复合抗原抗体与单纯的C、c、E、e抗原均无反应性。

北京地区孕妇产前抗体筛选

目的总结北京地区孕妇不规则抗体的特异性及分布。方法对2016年1~12月送检至北京市红十字血液中心血型室的1007例孕妇标本进行抗体筛选,其中RhD阴性孕妇770例,RhD阳性孕妇237例,并对251例抗体筛选阳性者做抗体鉴定,鉴定其抗体特异性及抗体类型。结果 770例RhD阴性标本中,抗体筛选阳性46例(5.97%),分别为抗-D 39例,抗-D、C 5例,抗-E 1例、抗-D、E1例。237例RhD阳性标本中,抗体筛选阳性205例;Rh系统抗体最常见,共检出84例,分别为抗-E 50例,抗-C 2例,抗-c、E 27例,抗-C、e 5例;MNS系统抗体62例,分别为抗-M 57例,抗-S 5例;Lewis系统抗体29例,分别为抗-Le^a26例,抗-Le^b1例,抗-Le^a+抗-Le^b2例;kidd系统抗体3例,分别为抗-JK^a2例,抗-JK^b1例;Duffy系统抗-Fy^b7例;P系统抗-P1 2例;Kell系统抗-K 1例;多系统抗体,抗-c、E+抗-JK^b1例;温自身抗体4例;另有12例患者因抗体水平较弱,未检出抗体特异性。结论 RhD阴性孕妇最常见抗体为抗-D;RhD阳性孕妇常见抗体分别为Rh、MNS和Lewis系统抗体。孕妇体内不规则抗体可引起新生儿溶血病(HDN),并造成交叉配血困难,故孕期对所有孕妇常规行抗体筛选检查非常必要,如阳性应进一步鉴定抗体特异性、抗体类型及抗体效价,这样有助于保障孕产妇输血安全,并能早期预防和治疗新生儿溶血病,以减少严重并发症的发生。

一例B(A)血型患者及其家系的血型血清学和分子生物学研究

目的通过1例B(A)血型的先证者及其家系成员血型血清学和分子生物学检测,研究B(A)血型的特点和家系遗传规律。方法应用试管法对北京市红十字血液中心的1例先证者及其家系成员进行ABO血型正反定型,确认其ABO表型;采用实时荧光定量PCR技术对家系成员进行ABO血型基因分型,通过基因测序方法对所有成员进行ABO第6、7外显子测序,确认其基因型。结果家系成员ABO表型分别为:先证者B(A)、父亲AB亚型、母亲O型、妻子O型、女儿B(A)、儿子O型;家系成员初步基因分型结果为:先证者BO2、父亲A1B、母亲O1O2、妻子O1O1、女儿BO1、儿子O1O2;家系成员基因型分别为:先证者B(A)02O02、父亲A102B(A)02、母亲O01O02型、妻子O01O01型、女儿B(A)02O01、儿子O01O02。结论B(A)血型属于B亚型一种,遗传呈现稳定的AB型顺式遗传方式,但若两条等位基因中,一条为B(A),另一条为A型等位基因时,由于竞争抑制关系,血型血清学将呈现AB亚型的特点。

血液病对输血前检查中抗体检测的影响

目的分析血液病对输血前检查中抗体检测的影响,选择合理的ABO血型鉴定、抗体筛选和交叉配血方法。方法对2012年7月至2014年2月422例临床确诊为血液病并送本室进行疑难定型和交叉配血的患者血液标本,进行ABO血型鉴定、抗体筛选和鉴定及交叉配血,采用血型血清学方法及PCR-SSP血型基因检测鉴定ABO血型。采用盐水法、LISS-IAT法(微柱凝集)、经典-IAT法进行抗体筛选和鉴定及交叉配血。结果 422例患者中,127例(30.09%)试管法正反定型相符,可确定ABO血型;74例(17.54%)抗原减弱;221例(52.37%)反定型抗体减弱或异常,其中自身免疫性溶血性贫血(AIHA)75例(33.94%),多发性骨髓瘤(MM)72例(32.58%),其余为骨髓增生异常综合征(MDS)、再生障碍性贫血(AA)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、淋巴瘤患者。这221例患者中,存在同种抗体37例,自身抗体65例,同种+自身抗体9例。结论血液病影响输血前检查中的抗体检测。ABO抗体减弱或异常最常见于AIHA和MM;血液病患者常因输血产生同种抗体,且很多患者体内存在自身抗体,应根据抗体检测的结果选择合适的交叉配血方法,保障输血安全。

Rh血型系统抗-c、E引起的新生儿溶血病1例报告

患儿 男，2011年7月12日出生。出生1d后出现黄疸并进行性加重。患儿母，3l岁，孕3产2，无输血史。母子血样送本室进行新生儿溶血病检查，经检查患儿为Rh血型系统抗-c、E抗体引起的新生儿溶血病。 血型：患儿母A型，RhD阳性；患儿A型，RhD阳性。Rh分型：患儿母CCDee；患儿CcDEe。患儿直接抗人球蛋白试验（DAT）：4＋。

罕见Xg血型系统抗-Xg^a 1例

目的鉴定1例Xg血型系统抗-Xga并进行交叉配血。方法采用血清学方法鉴定ABO和RhD血型,采用盐水介质和LISS-IAT法做抗体鉴定,采用Liss/Coombs卡进行交叉配血。结果经鉴定抗体为抗-Xga,患者与10位献血员进行交叉配血相合2人,相合者均为男性。结论引起交叉配血不相合的抗体为Xg血型系统抗-Xga。

酶处理红细胞检测白血病致抗体减弱血型定型1例报告

患者男,35岁,临床诊断为T细胞性淋巴母细胞白血病,无输血史。因鉴定ABO血型时发现正反定型不符,送我室进行血型鉴定。正反定型：采用试管法做ABO血型正反定型,菠萝酶处理试剂红细胞[1]前后患者ABO正反定型结果见表1。吸收放散试验[1]：患者红细胞放散液与试剂红细胞室温15min反应均阴性,

北京地区RhD阴性献血者RHD基因分型及RhCE表型分布研究

目的探讨北京地区RhD阴性献血者的RHD基因分型及RhCE表型分布。方法收集2018年3月至2019年6月北京市红十字血液中心确认为RhD阴性的血样100份,应用Rh分型卡鉴定RhCE表型,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测RHD基因,对含有RHD基因的样本进行DNA测序分析。结果100例RhD阴性的献血者中,检出78例RHD基因全缺失型,ccee表型占84.6%(66/78);16例携带RHD1227A基因,均含有C抗原;4例携带RHD-CE(2-9)-D基因,RhCE表型均为Ccee;1例为28T基因,RhCE表型为Ccee;1例携带711delC基因,RhCE表型为CcEe。基因检测为RHD1227A基因的RhD阴性个体均有C抗原,RHD1227A与C抗原的表达显著相关(P<0.001)。结论北京地区RhD阴性献血者的RHD基因呈现多态性,主要为RHD基因全缺失型,RhCE表型主要为ccee。

分子生物学技术在白血病患者ABO血型鉴定中的应用

目的探讨分子生物学技术在区分ABO亚型与白血病致ABO血型抗原减弱中的应用。方法对1例表现为ABO血型抗原减弱的白血病患者,分别采用实时荧光定量PCR、序列特异性引物引导的PCR法(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)以及基因测序技术鉴定其ABO血型。结果实时荧光定量PCR以及PCR-SSP的检测结果均表明该患者ABO血型为A2B,测序结果确定其ABO基因型为A205/B101,该患者为ABO亚型且存在因白血病致血型抗原减弱。结论利用分子生物学技术能在基因水平上准确鉴定ABO血型,对保障临床安全输血具有重要意义。

Rh血型系统ce复合抗原抗体抗-ce的研究

目的鉴定Rh系统ce复合抗原抗体抗-ce(抗-RH6或抗-f),制订患者交叉配血的策略。方法对6例抗体筛选阳性且Rh表型分别为DCc Ee(4例)、Dcc EE(1例)、DCCee(1例)的患者血浆采用LISS/Coombs卡做抗体鉴定,根据阴性排除法的原则确定抗体的特异性;同时采用吸收和放散试验区分和鉴定同时存在的同种抗体。结果 6例患者血浆中均存在Rh血型系统ce复合抗原抗体抗-ce,其中2例分别同时存在抗-e或抗-c。结论红细胞上缺乏Rh复合抗原ce的患者经过输血或妊娠免疫,可能产生针对该复合抗原的抗体抗-ce,而抗-ce与单纯的c和e抗原均无反应性;抗-ce可能和Rh系统的抗-c或抗-e同时存在。

罕见家系遗传CisAB01血型研究一例报告

目的对1例血清学检测结果疑似CisAB血型的先证者及其家系进行血清学检测和基因测序。方法血清学检测采用试管正反定型和基因测序的方法检测该家系7份疑似CisAB血型的标本。结果先证者父亲含CisAB01基因,同时含有1条正常的A基因,血清学表现为AB亚格局,基因测序为CisAB01/A102。先证者、哥哥、大侄子的血清学表现均为A亚B亚格局,基因测序均为CisAB01/O01。结论CisAB基因与不同基因结合呈现不同的亚型,基因测序是指导临床准确检测血型的可靠依据。

RhD变异型DⅥ Ⅲ型分子生物学研究

目的探讨RhD变异型DⅥⅢ型的分子生物学机制。方法选取2020年11月至2022年5月北京市红十字血液中心血型室接收的RhD血型弱阳性患者血样。使用3个厂家的单克隆抗-D(1个IgM、2个IgM/IgG抗-D)检测患者RhD血型,其中IgM抗-D采用盐水试管法(saline tube method,S)、IgG抗-D采用间接抗人球蛋白试验(indirect anti-human globulin test,IAT);采用直接抗人球蛋白分型卡和Rh分型卡检测患者直抗(direct anti-human globulin test,DAT)和RhCcEe抗原。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测RHD基因缺失情况、RHD基因10个外显子全序列及其相邻侧翼内含子测序分析样本RHD基因型。结果共纳入RhD血型弱阳性患者血样8份,盐水试管法均只与一个厂家的抗-D试剂(IgM/IgG抗-D)呈弱阳性反应,IgM抗-D和另一家IgM/IgG抗-D阴性;IAT与2个厂家的抗-D试剂(IgM/IgG抗-D)均4+;DAT均阴性;RhCcEe表型分别为Ccee(6/8)、ccee(1/8)、CcEe(1/8)。实时荧光定量PCR结果均为RHD基因外显子E3~E6缺失,RHD基因外显子全序列测序均为RHD^(*)06.03.01。结论通过分子生物学方法对RHD基因的检测能准确鉴定为DⅥⅢ型,为受血者和供血者在临床输血中提供不同的保障策略。

红细胞稀释液抗体引起的交叉配血不合一例报告

患者女,30岁,产妇,孕1产1,无输血史,医院产前备血抗筛阳性,产妇顺产未输血,2022年1月3日产后因抗筛阳性,将血样送至北京市红十字血液中心实验室做抗体鉴定。试剂与器材:抗-A、抗-B(批号:102198、204195);抗-D(批号:V213552);反定型试剂红细胞(批号:20215350);低离子强度盐溶液(low-ionicstrength saline,LISS)、LISS/Coombs卡、Rh分型卡、浓度0.8%筛选细胞、直抗卡(批号:E009259、50531.62.05、52030.55.01、800455189、505600303)。

1035例疑难交叉配血原因分析

目的了解1 035例疑难交叉配血产生的原因及意外抗体的分布特点。方法 2012年6月至2013年11月北京地区各医院抗体筛选阳性和(或)交叉配血不相合进行疑难配血的患者1 035例,所有患者进行输血前检查并进行回顾性分析。结果意外抗体(除抗-A、抗-B外的抗体)的存在是引起交叉配血不相合的主要原因,抗体筛选阳性972例,占93.91%(972/1 035),其中,同种抗体最常见,占52.56%(544/1 035);其次为自身温抗体,占27.54%(285/1 035)。抗体鉴定为同种抗体的患者以Rh血型单一或复合抗体(2种或多种抗体连锁在一起)最常见,分别为34.23%(203/593)、16.02%(95/593);其次为MNS血型系统,占16.53%(98/593)。血型不符或者亚型是引起抗体筛选阴性而交叉配血不相合的主要原因,占5.12%(53/1 035)。结论意外抗体的存在是导致临床疑难配血的主要原因,抗体筛选在输血前检查中非常必要。