外周血循环肿瘤细胞在晚期肺癌患者的预测及预后价值研究

目的应用免疫磁珠阴性富集技术结合荧光细胞化学染色方法,检测肺癌患者外周静脉血中循环肿瘤细胞(CTC)的敏感性及特异性;分析肺癌患者CTC水平与临床疗效的相关性。方法 2007年7月～2008年4月在北京协和医院呼吸内科肺癌中心诊断的144例肺癌患者作为研究对象,并设健康对照组35例、良性肺疾病组28例。采集上述各组静脉血标本,应用免疫磁珠阴性富集分离及免疫荧光细胞化学染色方法检测静脉血中CK18^+/CD45^-/CTC计数,凡≥1判定为阳性。随访上述52例入院化疗患者治疗后CTC,与其临床疗效、生存进行相关性分析。结果健康和良性肺疾病组CTC检测阳性分别为2例(5.71%)及1例(3.57%),肺癌组未接受抗肿瘤治疗前CTC的阳性率64.5%(93/144)。其中Ⅲ_A、Ⅲ_B及Ⅳ期分别为32.0%、56.8%及78.0%。腺癌、鳞癌、小细胞癌CTC阳性率分别为66.7%、70%及62%。52例肺癌患者进行每周期化疗后CTC检测,疗前CTC阳性率69.2%(36/52),3个周期化疗后下降至6.5%(3/46),显示CTC与疗效相关。结论本检测方法简便,敏感性为93.1%,特异性为72.8%;CTC阳性率与疾病分期、吸烟、疗效及转移相关,CTC水平越高可能提示预后不良。

胃癌中循环肿瘤细胞及其核型特征与临床分期的相关性

目的分析循环肿瘤细胞(CTC)在胃癌辅助诊断中的作用及其与胃癌临床病理特征的相关性,探讨其临床意义。方法纳入98例胃癌患者和38例胃部良性疾病患者,采用阴性富集联合免疫荧光原位杂交(imFISH)检测平台检测患者CTC,分析CTC及其核型特征与临床病理特征的关系。结果胃癌患者中CTC检出率(CTC≥1)为94.9%,而胃部良性疾病患者中CTC检出率为28.9%,两者差异显著(P<0.001)。ROC曲线显示,当cut-off值定为2个细胞/3.2ml血时,CTC在胃癌诊断中的灵敏度为89.8%,特异性为89.5%(AUC=0.945,95%CI, 0.908-0.982,P<0.001)。CTC在Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者中的检出率(CTC≥1)分别为84.6%和98%,在T1～T2和T3～T4期患者中CTC检出率分别为81.3%和96.7%,在N0、N1～N3患者中CTC检出率分别为81.3%和96.5%,在上述分组中检出率有显著差异(p<0.05)。在性别、年龄、肿瘤分化程度、Her2表达、Ki-67表达及M分期等分组中,CTC阳性率差异不显著。8号染色体多体CTC在Ⅲ～Ⅳ期患者中的阳性率为69.6%,显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(44%,P<0.05)。结论阴性富集联合imFISH技术在胃癌CTC检测中具有较高的灵敏度和特异性,对于胃癌的辅助诊断和早期检测具有重要意义。同时,CTC总数及8号染色体多体CTC与胃癌TNM分期密切相关,或可用于胃癌分期的辅助判断和预后评估。

结直肠癌循环肿瘤细胞的研究进展

肿瘤复发转移是导致死亡的主要原因。在外周血中检测循环肿瘤细胞(CTC)对解决复发转移监测、肿瘤分子特征等临床问题有重要的应用价值。随着新的检测技术和方法的出现,使得CTC检测的特异性和灵敏度有了很大提高。本文从CTC的形成机制、检测方法以及CTC检测与结肠癌患者的治疗疗效、预后及手术的相关性几个方面,全面阐述了CTC检测在结直肠癌的研究进展。

免疫磁珠阴性法用于肺癌淋巴结微转移的研究

目的利用免疫磁珠阴性富集法建立一种肺癌淋巴结标本中肿瘤细胞的分选和富集方法，探讨该方法对提高淋巴结微转移诊断率的可行性。方法选取原发灶为非小细胞肺癌且淋巴结病理阴性的患者，取新鲜淋巴结组织，制备淋巴结悬液，采用阴性法富集肿瘤细胞，联合应用免疫荧光和免疫荧光原位杂交技术鉴定肿瘤细胞，其中免疫荧光技术判断p53＋／DAPI＋／CD45-细胞为阳性细胞，免疫荧光原位杂交技术判断CEP8＋／DAPI＋／CIM5-细胞为阳性细胞。结果本研究入组30例肺癌患者，共收集病理阴性淋巴结60枚。7枚淋巴结免疫荧光法检测阳性，7枚淋巴结免疫荧光原位杂交技术检测阳性，其中有3枚淋巴结两种检测均阳性，18．3％（11／60）的淋巴结免疫磁珠阴性法检测阳性，来自10例患者，即33．3％（10／30）早期非小细胞肺癌患者存在淋巴结微转移。结论免疫磁珠阴性法可用于淋巴结微转移的研究，与常规病理检测相比，可提高肺癌淋巴结微转移诊断率。