逆转录环介导等温扩增技术检测南芥菜花叶病毒

根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了2组RT-LAMP引物,通过筛选试验,最终确定Ar4组引物为最佳引物,建立了南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测方法。同时,通过实时浊度仪和钙黄绿素分别对检测结果进行了判断。特异性和灵敏度试验结果显示,RT-LAMP方法快速、特异且灵敏,其灵敏度与普通RT-PCR法一致。

基于颜色判定的LAMP方法快速检测结核分枝杆菌

针对结核分枝杆菌保守靶基因IS6110,设计环介导等温扩增法(LAMP)特异性引物,实验结果表明,在65?C恒温条件下反应50分钟即可完成反应;在反应液中加入钙黄绿素后可通过颜色变化来判断反应结果,该LAMP方法的最低检出浓度为101pg/μl,与PCR方法的最低检出浓度1.01ng/μl相比提高了10倍,且具有良好的特异性。所以LAMP方法检测结核分枝杆菌具有简单、快速、价廉、特异性强、灵敏度高等特点,适用于疾控工作及临床筛查或快速检测结核杆菌。

LAMP技术在肺炎支原体快速检测中的应用

环介导等温扩增技术具有快速、特异、灵敏度高、操作简便等特点,本文介绍了LAMP?技术在肺炎支原体上的应用,结果表明,MP-LAMP方法具有较高特异性和灵敏度,是一种非常适用于临床检测的方法。

LAMP~技术在乳腺癌前哨淋巴结转移快速检测中的应用

乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤,前哨淋巴结(sentinellymph node,SLN)是肿瘤转移的第一站,通过前哨淋巴结的转移状态可以判断患者是否需要进行腋窝淋巴结清扫(axilary lymph nodesdissection,ALND)。本研究采用环介导等温扩增(LAMP?)技术在术中对前哨淋巴结进行快速检测,通过分析细胞角蛋白(CK19)基因、泌乳素诱导蛋白(PIP)基因和胆色素原脱氨酶(PBGD)基因的存在与否,来判断前哨淋巴结是否发生转移,与GeneSearch法判断的结果一致,LAMP?方法具有快速、简便、准确等优点,具有巨大的发展潜力。

基于LAMP^(■)技术的核酸快速诊断技术平台建立

本文介绍了LAMP技术核酸快速诊断技术平台建立的流程,解决了LAMP法易污染、非特异扩增、无法定量、无法高通量等问题,并将RT-LAMP技术应用于H7N9疫情的检测,灵敏度能达到10 copy/μl,比RT-PCR高100倍,整个反应时间更短,比RT-PCR节约45min。LAMP法具有快速、恒温、简易、高特异、高敏感性的优点,特别适用于现场、基层医疗单位的快速检测。

快速检测NDM-1基因的环介导恒温扩增技术的建立与评价

基于DNA环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),探索建立一种应用于NDM-1基因(New Metallo-β-Lactamase-1 Gene,NDM-1)的快速检测方法,以适应临床实验室等的检测需求。利用LAMP技术,以NDM-1基因为靶序列,设计4组LAMP引物,并筛选最优引物组,建立LAMP反应体系与条件,进行灵敏度和特异性实验。结果表明整个检测过程仅需1 h,即可通过肉眼直接目测实验结果。在灵敏度试验中,NDM-1基因的最低检测限为6拷贝/反应。在特异性实验中,以4株病原菌(肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌)以及肠道菌群元基因组DNA、土壤菌群元基因组DNA为模板对NDM-1基因进行检测,结果显示均没有发生非特异性扩增反应。文中建立的LAMP检测方法能够快速检测NDM-1基因,且可直接观察到实验结果,实现了检测结果的可视化。具有操作简单安全、检测灵敏度高、特异性高的特点,能够满足基层实验室、应急检测或现场监测等方面的使用需求,具有良好的应用价值。