Epidot-酶联免疫斑点检测方法应用于结核诊断的初步评价

目的:初步评价自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点(Epidot-ELISPOT)检测方法应用于结核病诊断的价值。方法:应用自行研发的Epidot-ELISPOT检测方法及进口T-SPOT.TB试剂盒,检测60份结核病例和75份健康人群的外周血结核特异性γ-干扰素释放水平[斑点形成细胞(spot forming cells,SFCs)]。结果:ELISPOT方法与T-SPOT.TB检测方法对结核感染人群中的敏感性分别为81.67%、90.00%,特异度分别为94.67%、94.67%,Epidot-ELISPOT的敏感度与T-SPOT.TB比较(χ2=1.313,P=0.252),特异性比较(χ2=0.000,P=1.000),差异均无统计学意义。分别用上述两种方法检测肺结核痰阳组和痰阴组形成的SFCs,组间差异均无统计学意义。结论:自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点技术的灵敏度和特异性与T-SPOT.TB检测方法类似,可用于结核感染的辅助诊断。

酶联免疫斑点实验与蛋白芯片检测结核分枝杆菌免疫应答的研究

目的:同时检测结核病人的细胞和体液免疫应答,初步探讨结核病人的免疫应答特点。方法:应用自行研制的酶联免疫斑点方法,联合结核分支杆菌蛋白芯片(阿拉伯甘露糖LAM、16 KD蛋白、38 KD蛋白、14 KD蛋白、9.7 KD蛋白和19 KD蛋白六种抗原)检测我市78例结核病患者的标本,进行相关统计学分析。结果:61例芯片阳性反应中,四种抗体阳性者比例最高,占34.43%(21/61),其中又以抗LAM+16KD+38KD+14KD+反应模式的比例较高。Epidot-ELISPOT在结核芯片各阳性组和结核芯片阴性组形成的SF-Cs中位数无显著性差异。78例结核病患者的Epidot-ELISPOT方法阳性率为62.82%(49/78),蛋白芯片法阳性率为78.21%(61/78),一致阳性率为44.87%(35/78)。结论:分泌γ-干扰素的T细胞反应程度与针对6种抗原的不同结核抗体反应模式间并无明显相关性。联合体液和细胞免疫检测可以进一步提高检测灵敏度。