视神经半损伤后复合神经营养因子辅助再生的动态PVEP研究

目的 :探讨视神经 (opticnerve ,ON)损伤后的自然修复再生和用脑源性神经营养因子 (BDNF)及睫状神经营养因子 (CNTF)互补辅助再生的图形翻转视觉诱发电位 (PVEP)变化特征 ,寻找ON有效再生的新途径。方法 :将 4 0只猫作为实验对象 ,术前随机平均分为 4组 :正常对照组、球后ON半径切断组 (ON1/2I)、ON半径切断并定时向玻璃体内注射生理盐水对照组 (ON1/2I +PS)和ON半径切断并定时向玻璃体内注射BDNF和CNTF复合因子辅助再生组 (ON1/2I +BF)。经眶外侧入路行手术开眶 ,在球后 5mm处测量ON直径数值 ,并用宝石卡尺刀行ON半径切断术。ON1/2I+BF组在术后即日注射BDNF和CNTF复合液 (10ng) ,并在以后注射等量BDNF和CNTF复合液 ,2次 /w。在ON损伤后 1个月、4个月和 8个月 ,3次行PVEP动态检测。结果 :在ON1/2损伤后 1个月时 ,与N组相比 ,ON1/2损伤各组PVEP的N1 P1振幅显著降低和P1潜时延迟 ;ON1/2I组和ON1/2I+PS组与ON1/2I+BF组比较 ,也出现了PVEP的N1 P1振幅降低和P1潜时的延迟。在ON1/2损伤后第 4个月时 ,ON1/2I组和ON1/2I+PS组与N组比较 ,其PVEP的P1潜时显著延迟 (P<0 .0 0 1,P <0 .0 0 1)和N1 P1幅度显著降低 (P <0 .0 0 1,P <0 .0 0 1)。而ON1/2I +BF组与N组比较 ,两者PVEP的P1潜时和N1

人神经生长因子对大鼠中枢胆碱能神经元损伤后作用的实验研究

目的 研究人神经生长因子（ Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 对大鼠中枢胆碱能神经元轴突切断后的保护作用。方法 向双侧海马伞切断所致的痴呆大鼠脑室内注入 Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ， 采用穿梭箱训练， 检测大鼠学习记忆功能恢复状况， 对脑内隔斜带复合体（ Ｓ Ｄ Ｂ） 中隔区（ Ｍ Ｓ） 胆碱能神经元采用胆碱乙酰基转移酶（ Ｃ Ｈ Ａ Ｔ） 免疫组化法观察其存活状态。结果 Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ 组大鼠术后两周内穿梭箱回避次数高于对照组（ Ｐ＜ ００１） ， 回避潜伏期短于对照组（ Ｐ＜ ００１） 。免疫组化及图像分析显示， 其胆碱能神经元存活状态优于对照组。结论 Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ 对大鼠中枢胆碱能神经元损伤具有短期保护作用； 减缓轴突切断引起的退行性变， 对痴呆大鼠学习记忆功能恢复有促进作用。

单个CD_（34）~＋CD_（38）~＋和CD_（34）~＋CD_（38）~－

为深入探讨细胞亚群的不均一性及单个细胞的增殖分化特性，利用ＦＡＣＳＶａｎｔａｇｅ自动细胞分选系统（ＡＣＤＵ）分选出单个亚群细胞：和，在９６孔扳无血清培养体系中，经ＳＣＦ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｇ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ．刺激，１４～１８天后扩增形成原代集落。单个细胞形成原代集落的比例为３８．Ｏ％±９．０％，集落组成细胞趋于分化成熟，再接种培养，仅８．５％±２．５％可形成次级集落，且绝大部分为粉巨噬系细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）。５４．０％±１２．Ｏ％的单个细胞可形成原代集落，组成细胞形态均一，大多为原始幼稚细胞，７５．０％±１１．０％的原代集落再接种可形成次级集落，且产率高达２８０．Ｏ±２１．５／原代集落，并可向红、粒、巨噬、巨核等系分化。表明细胞群的不均一性，其亚群显示造血祖细胞性能，而细胞的性能则接近于造血干细胞。

PCMV_4-hTGFβ_1在大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合及瘢痕形成中的作用

目的观察与人类巨细胞病毒载体结合的转化生长因子β_1(PCMV_4-hTGFβ_1)重组质粒裸 DNA 直接注射于深Ⅱ度烫伤大鼠体内后的基因表达规律及对创面愈合的作用,探讨其作为核酸疫苗的可行性,为烧伤的基因治疗提供理论基础和实验依据。方法大鼠随机分为烫伤+核酸疫苗组;单纯核酸疫苗组;对照组。采用 ELISA 方法检测裸 DNA 注射后血清中中和抗体水平;Southern 杂交、原位杂交检测裸 DNA 注射后在肌肉中存留时间,组织特染法检测组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原的变化。结果裸 DNA 肌注7天后血清中可检测出抗 TGFβ_1中和抗体,21天达其峰值,28天有轻度下降。Southern 杂交显示裸 DNA 注射后,5min 即可检测出高浓度 TGFβ_1,1h 后浓度开始下降,3h 后仍可检测出。原位杂交在肌注5天后,肌肉中还有阳性反应。核酸疫苗组创面愈合速度在前9天较对照组快,差异有显著性意义(P<0.05),在后期与对照组间差异无显著性意义(P>0.05),但Ⅰ/Ⅲ型胶原比例明显下降(P<0.01)。结论 PCMV_4-hTGFβ_1即可加速创面愈合,又可控制Ⅰ型胶原合成,控制瘢痕增生。证实了其作为核酸疫苗治疗烧伤创面及控制瘢痕形成是可行的。

异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病加速期伴骨髓纤维化一例

异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病加速期伴骨髓纤维化一例江志生，罗庆良，王学之，许康雄，杨建凤，江孝香，毛秉智，郑素星，王维静，周虹乔异基因骨髓移植（ａｌｌｏ－ＢＭＴ）是治愈慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的唯一方法。我们对１例ＣＭＬ加速期伴骨髓纤维化患者...

邻苯二甲酸正丁酯诱导白血病细胞系HL－60、U937细胞程序性死亡

为探讨邻苯二甲酸正丁酯（ＤＢＰ）可选择性抑制白血病细胞的作用机制，作者用体外细胞培养的方法观察了ＤＢＰ对白血病细胞的影响。结果：经过ＤＢＰ处理后白血病细胞失去集落形成能力；ＤＮＡ电泳呈现梯形改变；电镜下可见典型的凋亡细胞。证明ＤＢＰ可诱发白血病细胞的程序性死亡。

人CD_（34）抗原基因在痘苗病毒系统中的表达

从ｐＵＣ１８－３４重组质粒双酶切分离得到编码人ＣＤ＿（３４）抗原的全长ｃＤＮＡ片段，将此基因插入痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了重组质粒ＮＳＡ１１７５－３４。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，将质粒ｐＪＳＡ１１７５－３４导入已被野生痘苗病毒感染的ＴＫ￣－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人ＣＤ＿（３４）抗原基因的重组痘苗病毒。经活细胞免疫荧光（ＩＦＡ）和碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）检测表明，重组痘苗病毒能够特异地表达人ＣＤ＿（３４）抗原。人ＣＤ＿（３４）抗原基因的表达，为探讨ＣＤ＿（３４）抗原结构和功能以及研制ＣＤ＿（３４）单克隆抗体奠定了基础。

乙型肝炎病毒基因聚合酶链反应分型方法的建立

根据乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的Ｓ区序列设计了３条引物：ＨＢＳ１（ｗ－／ｒ＋）、ＨＢＳ２（ｄ＋／ｙ－）和ＨＢＳ３，与ＨＢＳ１和ＨＢＳ２配对，经２次聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。即可在检测有无ＨＢＶ－ＤＮＡ存在的同时对其基因型分类，可检出１０ａｇ的ＨＢＶ－ＤＮＡ，比免疫学方法更灵敏和特异。２５份不同亚型的标准血清中的绝大多数用Ｓ－ＰＣＲ和ＡＧＩＤ／ＲＰＨＡ的分型结果一致，Ｓ－ＰＣＲ的另一突出优越性在于能够对ＨＢｓＡｇ低滴度和阴性标本分型。