谷氨酸调节耳蜗内毛细胞游离钙的实验观察

目的 探索谷氨酸 (glutamate,Glu)对离体耳蜗内毛细胞 (innerhaircells ,IHC)内钙信号的调控作用及其生理病理意义。方法 在激光共聚焦显微镜下用钙敏荧光探针Fluo 3作为指示剂 ,观察外源性谷氨酸对分离的 10个豚鼠耳蜗IHC胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。结果 分离好的正常IHC呈烧瓶形状 ,有明显的颈部 ,皮板上可观察到静纤毛 ,大球形的细胞体中间可见圆形的细胞核。形态完好的IHC大约存活 2h ,Fluo 3钙敏荧光探针染色后IHC胞体、胞核及表皮板有明显的染色梯度 ,表明游离Ca2 + 浓度从细胞核向细胞质逐渐减少。终浓度为 3.85 μmol L的Glu对游离IHC内 [Ca2 + ]i 有增高趋势 ,而对游离外毛细胞 (outerhaircells ,OHC)内 [Ca2 + ]i 浓度无影响。观察 10个IHC ,发现 9个 [Ca2 + ]i浓度增加 ,1个无变化 ;观察 10个OHC ,发现 7个 [Ca2 + ]i无变化 ,3个略有下降。当Glu浓度增高后 ,IHC内 [Ca2 + ]i 先是迅速升高 ,继而逐渐下降。IHC外形由烧瓶状逐渐变成球形 ,提示IHC水肿变性。结论 Glu可选择性调控IHC内 [Ca2 + ]i,而对OHC内 [Ca2 + ]i 无影响 ,而过量的Glu刺激 ,可造成IHC [Ca2 + ]i 的堆积 ,从而IHC水肿变性。

豚鼠耳蜗外毛细胞的共聚焦图像

建立了用激光扫描共聚焦显微镜观察豚鼠耳蜗外毛细胞生理变化及细胞形态的方法。以荧光染料Ｆｌｕｏ－３作胞内Ｃａ￣（２＋）指示剂，用共聚焦显微镜观察了乙酰胆碱（ＡＣｈ）、ＡＴＰ、高钾引起的外毛细胞（ＯＨＣ）胞内Ｃａ￣（２＋）浓度的变化。三种物质均引起Ｃａ￣（２＋）升高，但升高的幅度、时相及所在细胞部位不同。高钾还引起ＯＨＣ短缩、偏折。利用共聚焦显微镜“光学切片”的特性，对Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ荧光素染色的活的ＯＨＣ形态及碘化吡啶（ＰＩ）染色的细胞核形态进行了三维重建。讨论了共聚焦显微镜在ＯＨＣ生理及形态学研究中的应用前景。

豚鼠与鸡内耳膜迷路蛋白电泳图像分析

豚鼠与鸡内耳膜迷路蛋白电泳图像分析胡宁姜泗长顾瑞胡吟燕本文旨在通过对不同种属的内耳膜迷路蛋白（ＭＰＬ）的电泳分布特点的分析，为以异种ＭＬＰ为抗原检测人血清抗内耳抗体提供依据。一、材料与方法ＭＬＰ的提取：取听力正常的杂色豚鼠４只和１日龄雏鸡２０只的双侧...

碱性成纤维细胞生长因子肌肉注射防治爆震性聋的实验观察

目的为验证碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对爆震性耳聋的防治作用。方法选用豚鼠35只，分为4组：bFCF肌注治疗组（10只），震后即刻给予bFGF肌注（50IU／100g）连用4周，生理盐水肌注治疗组（10只），疗程同前；bFGF肌注预防组（10只），生理盐水肌注预防组（5只），剂量同治疗组连用2周。动物爆震100发，每秒1发，脉宽0．5ms，压力峰值172．0dBSPL，爆震前后测定ABR阈值。最后处死动物做耳蜗SDH染色铺片，观察耳蜗损伤情况。结果震前肌注bFGF预防组动物阈移比生理盐水组要轻，但统计学差异不明显。耳蜗病损区域集中于一回上至二回下，细胞界线不清，SDH染色变浅。震后bFGF肌注治疗组动物震后阈移恢复较其它组快，铺片见耳蜗病变为外毛细胞节段性缺失，散在性内毛细胞缺失，病变范围从基底膜钩端至第三回下半。结论震前肌注bFGF对预防耳蜗病变从形态学上观察有一定作用；动物震后即刻bFGF肌注治疗对阈移恢复有明显作用。

水杨酸钠对噪声性听力损失影响的实验观察

目的 观察水杨酸钠能否减轻噪声引起的听力损失。方法 将 3 6只健康且耳廓反射正常的花色豚鼠随机分为水杨酸钠实验组、生理盐水对照组、水杨酸钠对照组和噪声暴露组。噪声暴露采用 10 5dBSPL的 4kHz窄带噪声下暴露 2h ,连续 5d。水杨酸钠给药为每天 0 5g/kg体重连续10d。由短声诱发听性脑干反应 (auditorybrainstemresponse ,ABR) ,连续测试其阈值 ;而后取动物双侧耳蜗荧光染色后光镜下行毛细胞计数和形态学观察。结果 ABR阈值测试显示 ,实验组动物在噪声暴露结束后 2 4h的听力略好于对照组 ;形态学观察表明 ,实验组细胞核异常数据低于对照组。

双侧三叉神经痛的诊断及治疗(附6例分析)

本文报告６例双侧原发性三叉神经痛患者的临床资料分析。男２例，女４例，年龄４１－７０岁，病程６个月～１８年，１例为双侧同时发病，５例为两侧先后发病，其间隔时间为１－１７．５年，两侧受累支别呈不完全对称性。经双侧微血管减压术治疗１例；单侧微血管减压术并感觉纤维部分切断术治疗１例；单侧感觉纤维部分切断术治疗３例；双侧周围支无水酒精封闭术１例，单侧无水酒精封闭和单侧周围支撕脱加热凝术治疗各２例，均获治愈，随访８－２４月无复发。总结双侧三叉神经痛的临床特点和诊断注意点，指出应根据患者的多种自身情况选择不同的手术治疗方法。

中耳三维有限元模型的建立与中耳实体模型质量属性分析

目的根据中国健康人体颞骨组织切片数据建立中耳三维有限元模型,分析中耳腔鼓室各组件的几何尺寸,并通过附带软件计算出各听骨的质量属性。方法根据解放军总医院耳鼻咽喉研究所提供的中国正常人颞骨组织切片数据,采用 AutoCAD2005、UG 软件建立了中耳三维实体模型,在 ADINA 有限元软件中使用手动和自动法对中耳三维实体模型进行网格划分。依据中耳解剖学、声学及生物力学等研究的文献数据对模型进行生理加载和边界约束,建立了包含鼓膜、听骨、韧带、肌肉的中耳三维有限元模型。最后,利用软件附带功能测量出中耳实体模型大小以及质量属性两方面内容,并与已发表的正常中国人中耳解剖结构的测量数据比较验证其结果的几何相似性和可靠性。结果重建了包含鼓膜、听骨、韧带、肌肉的中耳三维有限元模型。从测量中耳实体模型大小以及质量属性两方面的数据证实了此中耳三维有限元模型能良好的模拟正常人体中耳鼓室形态结构,具有良好的几何相似性。结论应用本方法建立的正常人中耳腔三维有限元模型形态逼真,几何相似性好,为进一步的从声学、生物动力学方面测试此模型在不同频率特定声压作用下鼓膜及镫骨的振动反应、中耳传音结构的几何形态及负荷改变奠定了形态学基础。