重组人胸腺素β4生物学活性测定方法的建立

目的:建立适用于重组人胸腺素β4(rhTβ4)体外质量控制的生物学活性测定方法,用于该制品的生物学活性评价。方法:利用ECV304细胞迁移法,摸索细胞密度、玻连蛋白(Vn)浓度、rhTβ4浓度等影响因素,并对试验条件进行优化及方法验证。结果:细胞密度为0.5×104/孔、Vn浓度为12.5μg/mL、rhTβ4浓度为200nmol/L、孵育时间24h和细胞迁移时间4h时,细胞迁移率较高。结论:建立了rhTβ4生物学活性测定方法,该方法专属性强、重复性好、准确性高,可用于rhTβ4生物学活性测定。

我国CRO公司与国际CRO公司的管理对比分析

近年来,资金和技术的匮乏始终制约着中国药企的新药研发进程。随着社会经济和科技的蓬勃发展,承担医药研发外包服务的CRO公司,以其雄厚的资本基础和专业的研究技术,有效弥补了中国制药行业的研发缺陷。如何汲取国际CRO公司的管理模式和经验来改善自身现状,成为中国CRO公司面临的重要课题。

胸腺素β4促进创伤愈合过程中对多种生长因子及新生细胞迁移的作用

学术背景:近年来,胸腺素β4的促进创伤愈合作用受到关注。最近的研究发现,在心肌、角膜和皮肤的创伤愈合过程中,胸腺素β4主要是作为一种化学诱导因子,调节多种生长因子的表达以及趋化新生细胞的迁移。目的:阐述胸腺素β4的生物学性质及创伤愈合的机制,并重点就胸腺素β4促进皮肤创伤愈合的作用及机制进行分析。检索策略:文章作者应用计算机检索Medline1980-01/2007-08有关胸腺素β4促进创伤愈合机制的文章,检索词为"thymosinβ4,skin wound healing,myocardium wound healing,cornea wound healing",限定文章语言种类为English。同时检索中国期刊全文数据库2000-01/2007-08有关胸腺素β4促进创伤愈合机制的文章,检索词为"胸腺素,皮肤创伤愈合,心肌修复,角膜修复",并限定文章语言种类为中文。初检得到660篇文献,全部为机检。文献评价:阅读标题和摘要对660篇文献进行初筛,排除研究目的与本课题无关及内容重复性研究,保留218篇中英文文献进一步分析,其中55篇综述类文献,163篇研究论文。按纳入标准筛选,共126篇文章满足全部纳入标准,予以纳入。其中23篇文献研究了胸腺素β4的生物学特性,51篇研究了胸腺素β4与皮肤愈合的问题,33篇研究了胸腺素β4与心肌损伤修复的问题,19篇研究了胸腺素β4与角膜修复的问题。资料综合:由于机体自身修复愈合的能力极其有限,一旦发生损伤或者病变很难自愈,甚至导致溃疡或瘢痕形成,多需要外缘性修复或启动内源性修复,但目前尚未发现有效的促进创伤愈合的药物。近年来,胸腺素β4促进创伤愈合的作用受到关注,为创伤愈合药物的研究提供了一个新方向。结论:虽然有很多研究证实胸腺素β4在创伤愈合过程中有重要作用,但是具体作用机制尚未完全明了。目前,人工合成的胸腺素β4已用于大量实验,以探讨其在创伤愈合中的作用和机制,结果显示胸腺素β4很有可能成为促进创伤愈合,尤其是糖尿病溃疡、免疫功能低下慢性损伤的新的治疗药物。

重组胸腺素β4通过调节血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创伤愈合

背景:由于机体自身修复愈合的能力极其有限,一旦发生损伤或者病变很难自愈。近年来,胸腺素β4促进创伤愈合的作用受到关注,为创伤愈合药物的研究提供了一个新方向。目的:通过制作大鼠皮肤全层创伤模型,观察局部给予重组胸腺素β4对创面血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的调节作用,并分析其剂量效应。设计、时间及地点:细胞因子水平的随机对照动物实验,于2007-03/2008-01在南开大学医学院解剖教研室完成。材料:胸腺素β4由北京诺思兰德生物技术有限公司提供。方法:纳入雄性SD大鼠60只,采用直径8mm的自制打孔器在大鼠脊柱两侧脊肋角处各制备1个全层皮肤缺损模型。将大鼠随机分为胸腺素β440,120,360mg/L组及对照组,每组15只。分别于模型制备后即刻、每天早7:00、晚7:00给每个伤口表面滴加相应剂量的胸腺素β450μL及等量磷酸盐缓冲液。主要观察指标:于造模后2,4,7d,每组每时相点取5只大鼠背部全层皮肤标本行苏木精-伊红和三原染色观察组织形态学变化,采用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的表达。结果:创面组织形态观察结果示,与对照组相比,胸腺素β4各剂量组造模后毛细血管增多,成纤维细胞、胶原纤维、网状纤维增多,排列较规则,以胸腺素β4120mg/L组最明显。胸腺素β4处理后4d血管内皮生长因子表达最多,造模后7d表达减少,胸腺素β4120mg/L组血管内皮生长因子表达强度保持在较高水平,阳性血管面积大于40,360mg/L组(P<0.05～0.01)。胸腺素β4120mg/L组造模后2d碱性成纤维细胞生长因子表达较强,造模后4,7d表达逐渐减弱(P<0.01)。结论:实验中120mg/L胸腺素β4可使血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子持续稳定较高表达。在愈合早期促进血管再生,促进肉芽组织生长和成纤维细胞的增殖、分化,在愈合晚期,下调血管内皮生长因子的表达,同时抑制碱性成纤维细胞生长因子过度表达。

重组胸腺素β4调节创伤皮肤层粘连蛋白5表达的研究

目的探讨重组胸腺素β4(thymosinβ4,Tβ4)调节层粘连蛋白5(laminin5,LN-5)表达促进创伤愈合的机制。方法成年雄性SD大鼠60只,体重200～250g,采用直径8mm自制打孔器于脊柱两侧脊肋角处各制备1个全层皮肤缺损模型。根据伤口用药的不同,随机分为实验组(45只)和对照组(15只),实验组再根据用药剂量不同分为低、中、高剂量组,每组15只。实验组于模型制备后即刻、每天7:00、19:00分别予每个伤口表面滴加50μLTβ4,低、中、高剂量组Tβ4浓度分别为2、6、18μg/50μL,对照组同法滴加等量PBS液(pH7.2),共滴加7d。造模后观察大鼠大体情况,术后2、4、7d观察大鼠伤口愈合情况及取材行免疫组织化学观察。结果除高剂量组1只大鼠于术后7d死亡,余均存活至实验完成。术后7d,中剂量组伤口明显缩小,多数伤口与创缘皮肤衔接良好。术后2d,对照组和低、中、高剂量组伤口愈合率分别为7.67%±5.46%、29.01%±7.43%、26.54%±11.49%、10.39%±3.96%;术后4d分别为28.16%±13.76%、37.99%±13.05%、42.00%±9.56%、39.58%±12.74%;术后7d分别为59.08%±19.02%、64.15%±17.92%、77.39%±8.45%、69.78±8.45%。术后2d,低、中、高剂量组伤口愈合率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后2d,各组均可见较多LN-5阳性表达,对照组与低剂量组阳性表达强(P<0.05),中剂量组阳性表达最少;术后4d,中剂量组阳性表达最强(P<0.05);术后7d,中剂量组仍有较强阳性表达(P<0.01)。结论重组Tβ4早期抑制LN-5表达,有利于细胞的增殖、分化,中晚期上调LN-5表达,改善基质环境,促进表皮细胞迁移和创伤愈合。

小鼠毛囊再生与胸腺素β4的促进效应

背景:近年来研究表明,胸腺素β4与毛囊的生长发育和毛发的生长周期有着密切关系,但其作用机制尚不清楚。目的:探讨胸腺素β4通过Wnt信号通路作用于毛囊干细胞对毛囊再生的促进作用。方法:将实验小鼠随机分为低剂量胸腺素β4组、高剂量胸腺素β4组和对照组,使用松香/石蜡混合制剂建立脱毛模型。低剂量胸腺素β4组和高剂量胸腺素β4组给药浓度分别为0.3μg/50μL和3μg/50μL,对照组给予等量PBS,每隔12 h给药1次,均匀涂抹于小鼠脱毛背部。应用大体照相、苏木精-伊红染色、免疫组化及原位杂交技术,观察毛发生长情况,检测不同时间点和不同给药浓度下小鼠毛囊根部细胞β-catenin、LEF-1 mRNA的表达水平。结果与结论:低剂量胸腺素β4组毛发再生速度高于高剂量胸腺素β4组和对照组。苏木精-伊红染色显示在脱毛初期,各组小鼠真皮和皮下脂肪层有一定炎性细胞浸润,9 d时,低剂量胸腺素β4组生长期毛囊数量明显多于高剂量胸腺素β4组和对照组。免疫组织化学和原位杂交结果分别显示β-catenin和LEF-1 mRNA主要表达于毛囊隆突部和外根鞘处细胞的胞浆中,经积分吸光度分析发现低剂量胸腺素β4组阳性细胞数量和染色强度高于高剂量胸腺素β4组和对照组(P<0.05),高剂量胸腺素β4组与对照组间差异无显著性意义。结果显示低剂量的胸腺素β4可以增加部分毛囊外根鞘处细胞内β-catenin和LEF-1 mRNA的表达。胸腺素β4可以促进毛囊再生的机制可能与影响Wnt信号通路有关。

聚乙二醇化重组人改构白介素11对骨髓抑制的小鼠促血小板生成作用的评价

目的:观察聚乙二醇化重组人改构白介素11(PEGylated IL-11 mutein,PEG-m IL 11)不同给药次数和给药剂量对骨髓抑制的小鼠血小板减少症的治疗作用,并与m IL-11进行比较,为临床应用提供参考。方法:BALB/c小鼠经2.5 Gy全身^(60)Coγ射线照射后,腹腔注射50 mg/kg卡铂制备血小板减少症模型。在给药次数研究中,将30只造模成功的BALB/c小鼠随机分为5组:溶剂对照组:d 1,4,7每日1次,共3次;m IL-11组:m IL-11 200μg/(kg·d)×9 d;PEG-m IL 11 A组:PEG-m IL 11 1800μg/(kg·d)×1 d(d 1);PEG-m IL 11 B组:900μg/(kg·d)×2 d(d 1,5)和PEG-m IL 11 C组:600μg/(kg·d)×3 d(d 1,4,7),各组小鼠均为皮下注射给药。监测5周内血小板的变化情况;在给药剂量研究中将100只造模成功的BALB/c小鼠随机分为5组:溶剂对照组:d 1,5每日1次,共2次;m IL-11组:m IL-11 200μg/(kg·d)×9 d、PEG-m IL 11低、中、高剂量组(200、420、900μg/(kg·d)×2 d,d 1,5),对各组小鼠均皮下注射给药,在5周内每隔2-3 d检测外周血细胞,并于给药后d 8选取部分动物安乐死后进行骨髓细胞培养。结果:与造模前相比,溶剂对照组Plt在最低点时降低幅度达到80%以上。给药次数研究中,PEG-m IL 11各给药组在最低点时的Plt值均明显高于溶剂对照组和m IL-11组(P<0.05),但不同给药次数的3组间差异不显著;在给药剂量研究中,PEG-m IL 11各治疗组在Plt最低点的降低幅度明显低于溶剂对照组和m IL-11治疗组(P<0.05),在最低点后Plt的恢复速度明显快于溶剂对照组,在d 10呈剂量依赖性的升高(r=0.92);PEG-m IL 11各治疗组的RBC在最低点的降低幅度明显减小并且恢复明显加快;各组WBC的变化趋势基本一致。CFU-M eg测定结果显示,PEG-m IL 11和m IL-11组同溶剂对照比相比CFU-M eg有增多的趋势,且PEG-m IL 11治疗组动物的集落数更高。结论:PEG-m IL 11对骨髓抑制小鼠血小板减少症有明显的治疗作用,而且同m IL-11相比,可以减少给药次数,提高治疗的顺应性,为开发重组白介素11的长效制剂提供了一定的依据。

重组胸腺素β4对大鼠心肌梗死心微血管及血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨重组胸腺素β4（Tβ4）对心肌梗死大鼠心微血管形成及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响.方法：SD大鼠随机分为对照组、低剂量Tβ4组（0.08μg/100g）和高剂量Tβ4组（0.8μg/100g）,结扎大鼠左冠状动脉前降支,造成永久心肌梗死模型.对照组予PBS,低剂量组和高剂量组予Tβ4腹腔注射,1、5、10d在结扎线以下的部位取材,行碱性磷酸酶和VEGF免疫组织化学显色.结果：各组微血管面积、VEGF阳性细胞平均光密度（AOD）1d差异无统计学意义,给药组10d微血管密度高于对照组,高剂量组5、10d微血管密度高于低剂量组,高剂量组10dVEGF阳性细胞平均光密度高于对照组和低剂量组.结论：Tβ4能促进心肌梗死后微血管形成,增加心肌微血管密度,上调VEGF的表达,从而改善心功能.

重组胸腺素β4调节NF-κB表达促进兔角膜碱烧伤后修复

目的:探讨重组胸腺素β4(Thymosin β4,Tβ4)对角膜碱烧伤后角膜核转录因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)表达的影响和促进角膜愈合的观察。方法:用1mol/LNaOH浸透的6mm直径圆滤纸片贴于兔角膜中央30s,建立兔角膜碱烧伤模型。动物随机分为实验组和对照组,实验组给予低中高剂量(0.1,1,10μg/50μL)Tβ4,对照组给予PBS(阴性对照组)和rh-EGF(阳性对照组)皆2次/d滴眼。烧伤后1,3,7,14d肉眼观察角膜烧伤面积的变化,照相、统计愈合率;免疫组化染色检测NF-κB和IL-1β表达;取烧伤区角膜组织匀浆液提取细胞核蛋白,用ELISA检测NF-κB的p65亚基表达水平。结果:角膜碱烧伤后Tβ4用药组角膜愈合率最高达到33.8%,相应阴性对照组为22.8%,Tβ4用药组显著高于对照组(P<0.01),其中中剂量Tβ4组愈合率高于其他剂量组;Tβ4用药组NF-κB免疫组化染色积分吸光度明显低于对照组(P<0.05),ELISA检测NF-κB的p65亚基,在Tβ4用药组中表达最少(P<0.01),IL-1β免疫组化染色阳性,但实验组和对照组差异无统计学意义。结论:重组Tβ4促进角膜碱烧伤修复,其机制可能与下调NF-κB在细胞核内的表达相关。

聚乙二醇化重组人改构白细胞介素11在食蟹猴体内药代动力学检测方法的建立

目的通过建立聚乙二醇（PEG）抗体结合ELISA法检测PEG化重组人改构白细胞介素11（PEG-m IL11）的血药浓度,PEG-m IL11在食蟹猴体内的药代动力学特征、血药浓度与量效关系。方法食蟹猴皮下注射PEG-m IL11后,在不同时间点采集血样,采用PEG抗体结合ELISA法（双抗体夹心免疫法）测定血清中的PEG-m IL11浓度,计算药代动力学参数,并检测不同时间点的血小板计数,探索血药浓度与量效关系。结果方法特异性良好,准确度与精密度均满足要求,线性范围26.34~200 ng/ml,可用于样品检测。PEG-m IL11在食蟹猴体内的消除T_（1/2）为（13.4±2.4）h,T_（max）为（6.7±2.3）h,C_（max）为（2.4±0.5）μg/ml,AUC_（（0-t））值为（77.7±15.6）μg？h/ml,CL为（4.6±0.8）ml/（h·kg）;而且PEG-m IL11血药浓度达峰先于药效达峰,药效明显滞后。结论 PEG抗体结合ELISA法测定PEG-m IL11浓度,方法稳定可靠,可满足药代动力学研究的需要。PEG修饰m IL-11达到了延长其体内代谢的效果,可减少给药次数,提高治疗便利性。

胸腺素β4对急性心肌梗死大鼠心肌磷酸化蛋白激酶表达及纤维化的影响

目的：探讨胸腺素β4（Tβ4）对心肌梗死大鼠心肌磷酸化蛋白激酶（p-Akt）及心肌纤维化的影响。方法：SD大鼠随机分为对照组、Tβ4低剂量组和高剂量组，结扎大鼠左冠状动脉前降支, 造成永久心梗模型。对照组予PBS，低剂量组和高剂量组予Tβ4腹腔注射，1、 5、 10d取材，行胶原纤维组织化学显色和pAkt免疫组织化学显色。结果：各组胶原纤维面积无明显差异；10d pAkt阳性细胞平均光密度高、低剂量组均高于对照组，高、低剂量组10d pAkt阳性细胞平均光密度均高于5d和1d 。结论：Tβ4对早期心梗的心肌纤维化影响不明显；Tβ4能促进急性心梗心肌的Akt磷酸化，上调p-Akt的表达，可能激活下游心肌保护因子从而改善心功能。

重组胸腺素β4调节ICAM-1、MMP-2和LN-5促进创伤愈合的实验研究

目的探讨重组胸腺素β4(Thymosin β4,Tβ4)通过改善创面基质环境促进大鼠皮肤创伤愈合的作用机制。方法在大鼠背部制作直径8mm的全层皮肤损伤模型,动物分为对照组(PBS)、Tβ4低剂量组、Tβ4中剂量组、Tβ4高剂量组,每组5只,每天两次给药,2d、4d、7d取材,行ICAM-1(Intercellular adhesion molecule-1)、MMP-2(Matrix metallopoproteinase-2)、LN-5(Laminin-5)的免疫组化并进行平均积分光密度(IOD)分析。结果经Tβ4处理后的创面,ICAM-1阳性表达多,早期中、高剂量组表达较强(p<0.01),中期均减弱,高剂量组相对较强;晚期各组表达增强,高剂量组最强(p<0.01)。MMP-2早期对照组表达最高(p<0.01),高剂量组最弱(p<0.01);中期中剂量组表达明显(p<0.05);晚期基质阳性明显增多,对照组表达最强(p<0.01),高剂量组最弱(p<0.01)。LN-5早期各组均可见较多的阳性表达,对照组与低剂量阳性强(p<0.01),中剂量组阳性最少;中期中剂量组表达最强(p<0.01);晚期中剂量组仍然有较强的阳性表达(p<0.01)。结论Tβ4可能是通过调节ICAM-1、MMP-2、LN-5的表达,改善创面基质环境,促进皮肤创伤愈合。

胸腺素β4调节皮肤创伤愈合时ICAM-1及VEGF的表达

目的研究重组胸腺素β4(thymosin 4,Tβ4)调节ICAM-1和VEGF的表达促进创伤愈合的机制。方法成年雄性SD大鼠,体质量200～250 g,制备全层皮肤缺损模型。动物随机分为PBS对照组和Tβ4 2μg/50 L组、6μg/50μl组和18μg/50μl组。实验组于模型制备后即刻、每天7:00、19:00伤口表面滴加Tβ4 50μl。对照组滴加等量PBS液。造模后2、4、7 d取材染色。结果H-E染色显示各组有不同程度的炎症反应和肉芽组织形成。Tβ4处理后,ICAM-1阳性表达增多,2 d时2、18μg组表达较强(P<0.01),4 d时各组均减弱,18μg组相对较强,7 d时各组表达增强,18μg组最强(P<0.01)。4 d时VEGF阳性最多,7 d时阳性减少,6μg组表达强度保持在较高水平(P<0.05)。结论重组Tβ4可能抑制炎细胞的活化和增殖,调节炎症反应影响ICAM-1、VEGF的表达,促进创伤愈合。

重组胸腺素β4调节兔角膜碱烧伤后MMP-2和TIMP-2的表达

目的探讨重组胸腺素β4(thymosinβ4,Tβ4)调节基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2,TIMP-2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及促进兔角膜碱烧伤愈合的作用机制。方法用40g.L-1NaOH浸透的6mm直径圆滤纸片贴于兔角膜中央30s,建立兔角膜碱烧伤模型。60只健康成年新西兰白兔随机分为实验组和对照组,实验组每天2次分别给予低剂量(0.002g.L-1)、中剂量(0.02g.L-1)、高剂量(0.2g.L-1)Tβ4,对照组每天2次分别给予PBS(阴性对照组)和rh-EGF(金因舒滴眼液,阳性对照组)滴眼。分别于角膜碱烧伤后第3天、第5天、第7天、第9天、第11天观察角膜烧伤面积的变化,并统计角膜愈合率;分别于角膜碱烧伤后第1天、第3天、第7天、第14天免疫细胞化学染色检测MMP-2、TIMP-2和VEGF表达。结果在角膜碱烧伤后第11天,实验组高剂量Tβ4组角膜愈合率最高达33.76%,阴性对照组为22.69%,阳性对照组为21.38%,实验组高于阳性对照组(P<0.01或P<0.05),其中中剂量Tβ4组角膜碱烧伤后第3天、第5天、第7天、第9天角膜愈合率高于其他剂量组,但差异均无统计学意义(均为P>0.05)。免疫细胞化学显示早期(第1天和第3天)各组MMP-2表达差异无统计学意义(P>0.05),后期(第7天和第14天)实验组较阴性对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。TIMP-2在各时期组间比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05);在角膜碱烧伤后第14天时,rh-EGF阳性对照组平均积分光密度染色最深,实验组染色明显弱于rh-EGF阳性对照组。结论重组Tβ4可能是通过调节MMP-2和TIMP-2的表达,影响二者的平衡,协同调节多种因子促进新生组织重塑,促进角膜碱烧伤修复。

重组人胸腺法新的制备及其作为老年人流感疫苗免疫增强剂的效果评价

目的采用重组技术制备重组人胸腺法新(rh Tα1),初步探讨rh Tα1对老年小鼠接种流感疫苗免疫应答效果的影响。方法用DNA重组技术构建胸腺法新的原核表达载体p GE-Tα1,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,经高密度发酵和纯化成功制备rh Tα1。老年Balb/c小鼠接种流感疫苗后,随机分为实验组和对照组,实验组给予低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 mg/kg)的rh Tα1,对照组给予PBS(阴性对照组)和化学合成的胸腺法新(c Tα1 0.4 mg/kg,阳性对照组),皆皮下注射,每周2次,连续4周。动态监测小鼠血清中的血凝抑制(HI)抗体效价,采用MTT法测定小鼠脾脏T、B淋巴细胞转化功能、使用ELISA方法检测血清细胞因子水平(IL-12,IFN-γ),并观察脾脏形态学结构的变化。结果 rh Tα1的表达载体构建成功,经发酵和纯化获得纯度>95%的目的蛋白;动物实验显示,与阴性对照组比较,rh Tα1各浓度组与c Tα1组均能提高老年鼠的HI抗体效价,提高脾脏T、B淋巴细胞转化功能以及血清中IL-12、IFN-γ的表达水平,脾脏组织病理形态明显改善,而且rh Tα1中高剂量组与c Tα1组效果相近(P>0.05)。结论使用DNA重组技术成功制备rh Tα1,且rh Tα1能够提高老年小鼠流感疫苗接种的免疫效果,为开发适合老年人的疫苗免疫应答增强剂提供了理论基础。

注射用重组人凝血因子Ⅷ食蟹猴单次及反复给药毒性研究

目的通过单次及30天重复给予食蟹猴静脉注射重组人凝血因子Ⅷ,观察可能出现的毒性反应性质和程度,为临床安全用药提供参考资料。方法急性毒性实验采用致死剂量法,一次静脉给药后,观察食蟹猴可能出现的急性毒性反应。长期毒性实验中连续给药30天,停药后恢复期观察4周,期间观察食蟹猴各项指标变化。结果急性毒性实验除61 250 IU·kg^(-1)组动物给药后第14天乳酸脱氢酶(LDH)与药前相比升高外,其他均未见明显异常。30天连续给药实验中,出现与凝血因子Ⅷ抗体和抑制物相关的临床症状,未发现与给药明确相关的毒性病理改变。结论食蟹猴单次静脉注射用重组人凝血因子Ⅷ的最大耐受剂量大于61 250 IU·kg^(-1);30天重复给药未见明显毒性反应剂量(NOAEL)为250 IU·kg^(-1)。

荧光素酶报告基因法测定生物制品活性研究进展

生物学活性是反映生物制品药物有效性的关键质量属性,荧光素酶报告基因法利用报告基因的表达量反映药物的生物学活性,具有高效简便的优势,得到药品监管机构的认可。该文综述了荧光素酶报告基因法的技术原理、关键要素、分类及特征,归纳总结了其在生长因子、激素以及抗体等生物药活性测定方面的应用,可为生物药研发领域的科研人员提供参考。

孙犁编辑思想浅析

孙犁是中国现当代文坛的优秀作家，创作过一些小说和散文，影响深远，实际上他还是一个优秀的编辑工作者。孙犁在长期的编辑工作中积累了丰富的编辑经验，形成了自己的编辑思想，尤其在文艺编辑方面有比较深入的理论思考，有一定特色。