第2代测序技术在甲基丙二酸尿症以及苯丙酮尿症诊断中的应用

目的探讨第2代测序技术在儿童常见遗传代谢病诊断中的价值,提出遗传代谢病诊断的新策略。方法采用目标区序列捕获及第2代高通量测序技术对临床诊断的3例甲基丙二酸尿症、2例苯丙酮尿症患儿进行检测,同时采用Sanger测序技术对患者突变进行验证。结果 3例甲基丙二酸尿症患儿检测发现均为MMACHC基因突变,其中1例为c.80A>G(P.Q27R)和c.609 G>A(P.W203X)复合杂合突变,1例为c.394C>T(P.R132X)和c.567dup T(P.I190fs)复合杂合突变,另1例为c.80A>G(P.Q27R)和c.271dup A(P.R91fs)复合杂合突变。2例苯丙酮尿症患儿检测发现PAH基因突变,其中1例为c.158G>A(P.R53H)和c.838G>A(P.E280K)复合杂合突变,另1例为c.158G>A(P.R53H)和c.1238 G>C(P.R413P)复合杂合突变,上述突变均为已知致病突变位点杂合突变;Sanger测序结果与第2代测序结果相符合。结论本研究提示第2代测序技术具有低成本、高通量、高敏感度以及可灵活设计的特点,可作为儿科临床常见遗传代谢病基因诊断的首选工具。

一例由染色体不平衡易位t（5;15）导致的Prader-Willi综合征

目的 对1例临床疑似Prader-willi综合征（Prader-Wil syndrome,PWS）的患儿进行遗传学诊断和分型.方法 应用染色体核型分析结合甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MS-PCR）及短串联重复序列（short tandem repeat,STR）家系连锁分析方法对患儿进行诊断和分子病理学分型.结果 患儿染色体核型为45,XX,der（5）t（5;15）（q35;q13）,-15,存在5号与15号染色体之间的不平衡易位;甲基化特异性PCR及STR家系连锁分析方法进一步证实患儿为父源15号染色体不平衡易位导致的15q缺失型Prader-Willi综合征.结论 临床疑似PWS的患儿应进行遗传学检查,以便获得确诊.细胞遗传学及分子遗传学方法的有效结合对于临床诊断、分辨不同病理类型、遗传咨询以及产前诊断都具有积极的作用.