豚鼠原发性骨性关节炎超微结构与生化改变的动态观察

目的 通过动态观察豚鼠软骨降解的形态学与血液生物化学的改变 ,探讨骨性关节炎的早期病变机制。方法 选用 Harlty雌性豚鼠 30只 ,分为出生后 1、3、7个月组 ,每组各 10只。在扫描电镜下 ,观察 3组豚鼠膝关节软骨的降解情况 ,并测定其血清蛋白聚糖 GI区和雌二醇的水平。结果 3个月组关节软骨即有严重降解。 1个月组豚鼠的雌二醇水平已达到较高浓度并随着年龄的增长而升高。出生3个月组软骨严重破坏时 ,蛋白聚糖也明显低于出生 1个月组软骨正常时的水平 ,并随着年龄的增长而继续下降 ,各组间的差异均有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。

高价特异半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物的研制

目的：制备出高价特异的半抗原雌二醇抗体和高纯度稳定的雌二醇－１７半琥珀酸－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）复合物。方法：主要使用材料包括半抗原载体复合物、半抗原活化体、ＨＲＰ及免疫用新西兰纯系家兔。具体方法为：（１）自行设计小分子半抗原的微量快速免疫方案，免疫全过程半抗原雌二醇的总使用体重量为３６７．５μｇ／ｋｇ，免疫时间为１１周。（２）首次建立活化４Ｂ珠与ＢＳＡ交联的反相快速亲合免疫吸附技术，以除去抗载体抗体，批次特异纯化了抗雌二醇抗体，（３）改进皮质醇－１７半琥珀酰胺－ＨＲＰ的标记法，建立了雌二醇－１７半琥珀酸－ＨＲＰ标记技术。结果：研制出高价特异的抗雌二醇抗体，效价１∶５万以上、抗体的活性达５ｍｇ／Ｌ；抗载体ＢＳＡ抗体的含量为０。首次制备出高纯度稳定的雌二醇－１７半琥珀酸－ＨＲＰ复合物；用ＥＬＩＳＡ法与自制固相Ｅ２抗体结合鉴定，复合物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５纯化后Ａ４５０峰值与Ａ４０３及Ａ２８０基本吻合，复合物的活性为５ｍｇ／Ｌ。结论：本研究建立的半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物的制备、纯化及分析鉴定技术简便、快速经济。