胞液型磷脂酶A_2cDNA与载体PRCCMV连接及表达

目的 选择适当的表达载体 ,启动胞液型磷脂酶A2 (cytosolicphospholipaseA2 ,简称cPLA2 )cDNA的表达 ,为进一步研究各种因素对该酶活性的影响奠定基础。方法 从cPLA2 PMT2 重组体中获得人cPLA2cDNA片段 ,使之与酶切线性化的PRC CMV载体平末端连接 ,并转染鼠巨噬细胞 ,筛选、扩增阳性细胞 ,提取RNA ,Northern杂交法检测cPLA2 mRNA。结果 应用cPLA2 PRC CMV重组体转染鼠巨噬细胞后 ,经过North ern杂交检测到cPLA2 cDNA的表达。结论 cPLA2 PRC CMV是一有效的表达系统。

血管紧张素转换酶基因多态性及其酶活性与冠心病关系的研究

目的 研究血管紧张素转换酶 (ACE)基因多态性、血管紧张素转换酶活性与冠心病的相关关系。方法 应用聚合酶链式反应 (PCR)检测ACE基因第 16内含子I/D多态性 ,并计算基因型和等位基因频率。应用酶偶联速率法检测血清血管紧张素转换酶活性。结果 在 5 1例冠心组中ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 35 %和 6 1% ,ACE平均活性为 35 0 3± 91 1,在 83例正常对照组中的ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 16 %和 4 5 % ,ACE平均活性为 2 86 7± 79 6 ,两者相比具有显著性差异。结论 ACED等位基因可能是冠心病潜在的危险因素之一 。