玉米芯多糖及其硫酸酯抗凝血活性及其机制

目的:研究玉米芯多糖及其硫酸酯抗凝血活性的作用,探讨玉米芯多糖及其硫酸酯抗凝血机制,为玉米芯抗凝的临床应用奠定基础。方法:采用酸提法提取玉米芯粗多糖(ACC),并对其分级、纯化及硫酸酯化;以生理盐水为对照组,将ACC、玉米芯纯化多糖(ACP)及其玉米芯硫酸酯化多糖(ACS)分别按低、中、高浓度分为3组,分别检测小鼠全凝血时间(CT)、出血时间(BT)及对人混合血浆的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT)。结果:每1000g玉米芯中可提取ACC 12.5g,提取率为1.25%,总糖含量为59%,气相色谱法分析其单糖组成为葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)和半乳糖(Gal),其摩尔比为15.36∶2.67∶1.00;纯化后多糖的总糖含量为90.2%,气相色谱法分析其单糖组成为Glc、Xyl和Gal,摩尔比为3.90∶2.12∶1.00;离子色谱法分析ACS的硫酸根含量为9.86%;与对照组比较,除ACC低、中浓度组外,其余各组小鼠的CT和BT均明显延长(P<0.05或P<0.01),人混合血浆的APTT和TT明显延长(P<0.05或P<0.01),呈现浓度依赖性,PT无变化。结论:ACC具有抗凝血活性,并通过内源性凝血途径和共同凝血途径来实现抗凝血作用。

survivin基因沉默对“三阴”乳腺癌细胞株中caspase3和caspase7基因的影响

目的探讨"三阴"乳腺癌细胞中沉默survivin基因对抑癌基因caspase3和caspase7的影响。方法针对survivin基因设计干扰片段并与真核表达载体pGCsilencerTMU6/Neo/GFP进行连接,之后转染"三阴"乳腺癌细胞MDA-MB-231;通过RT-PCR鉴定survivin基因mRNA水平沉默效果;用RT-PCR检测沉默survivin基因对caspase3和caspase7表达及细胞凋亡的影响。结果 survivin基因沉默可引起MDA-MB-231细胞凋亡;caspase3和caspase7表达升高,灰度分析结果显示差异具有统计学意义(P=0.008)。结论 (1)RNAi技术沉默MDA-MB-231细胞中survivin基因,达到了对其表达的抑制效果;(2)survivin基因沉默可上调caspase3和caspase7的表达;(3)survivin基因沉默可引起细胞凋亡;(4)survivin基因可作为"三阴"乳腺癌基因治疗的新靶点。