吉林地区384例HBeAg阴性乙肝患者HBV-DNA检测结果分析

目的了解吉林地区HBeAg阴性乙型肝炎患者乙肝病毒血清标志物（HBV-M）与乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV—DNA）的相关性．方法收集吉林地区384例HBeAg阴性乙型肝炎患者，按HBeAg阴性的不同模式分为6组；采用实时荧光定量PCR方法检测HBV—DNA，酶联免疫法（ELISA）法检测HBV-M．结果HBeAg阴性乙肝患者HBV-DNA阳性率为48．7％．结论HBeAg阴性不同模式的乙肝患者间HBV-DNA阳性检出率的差异较大，HBeAg阴性乙肝患者中仍有部分患者存在乙肝病毒颗粒复制．

梅花鹿鞭与伪品牛鞭细胞色素b DNA指纹鉴定

目的探讨梅花鹿鞭及牛鞭线粒体细胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因特异性片段特征,建立梅花鹿鞭的DNA指纹鉴定方法。方法采用引物设计软件Primer Premier 5.0设计了用于鉴定梅花鹿鞭的特异性引物,用此引物对市售的梅花鹿鞭样本进行DNA指纹鉴定。结果梅花鹿鞭能扩增出306 bp大小的片段,而牛鞭未能扩增出相应片段。结论梅花鹿鞭DNA具有特异性指纹特征,所得梅花鹿鞭DNA指纹特征图谱可用于市售梅花鹿鞭的鉴定。

貂心与其伪品的脱氧核糖核酸指纹特征研究

目的探讨貂心脱氧核糖核酸(DNA)指纹特征鉴定方法。方法采用碱裂解法提取新鲜貂心与伪品动物组织中线粒体DNA,设计特异性引物,进行PCR扩增。结果从新鲜貂心及鸡心、鸭心、鹅心、兔心等伪品动物组织中提取出相同大小的16.8 Kb线粒体DNA,只有貂心DNA可扩增出1 100 bp大小的片段。结论貂心DNA具有特异性指纹特征,所得貂心DNA指纹特征图谱可用于与其伪品动物心脏的鉴定及分析,且方法简便,结果可靠。

SBHL对人宫颈癌细胞凋亡作用的实验研究

目的研究澳洲茄胺盐酸盐（SBHL）对人宫颈癌细胞的增殖抑制作用和机制。方法用MTT法检测SBHL对ME180细胞增殖影响，用流式细胞技术和琼脂凝胶电泳法分析细胞凋亡、细胞周期变化，用电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果SBHL作用ME180细胞24h后，细胞存活率明显下降，而且随着澳洲茄胺盐酸盐浓度的增加，抑制作用增强（P〈0.01）；SBHL可将ME180细胞周期阻滞于G1期，诱导细胞凋亡，细胞凋亡率明显增加（P〈0.01）；细胞超微结构呈现典型的凋亡特征。结论SBHL可通过阻滞细胞周期发展发挥抑制ME180细胞增殖的作用，SBHL还可诱导细胞发生凋亡。

鹿茸等动物生药鉴定方法的研究进展

鹿茸是传统名贵中药材。我国在2010年版《中华人民共和国药典》中规定了梅花鹿茸、马鹿茸为正品药材。由于鹿茸及产品需求量增加,使得伪品、混淆品和代用品在国内的中药源市场屡见不鲜,导致了中药材市场的混乱。这种现象也见于其它名贵中草药材,如人参、鹿鞭、龟甲以及貂心等,严重影响了中国传统药学的美誉,更制约着中国传统医药的规范化、标准化和国际化的发展。因此提供简捷、精准的鉴定方法为净化中药材市场、发扬光大我国的传统中药具有极其深远的意义。

鼻腔深部出血止血方法的比较观察

目的:通过老年顽固性鼻出血的诊治对鼻腔深部出血采用填塞及射频治疗鼻腔深部出血两种止血方法的比较观察探求最优的止血方法。方法:选取138例患者经鼻内窥镜采用填塞/射频治疗鼻腔深部出血,观察各种方法的疗效。结果:两种治疗效果比较,差异无统计学意义(P>0.05),但填塞患者的痛苦较大,使用射频治疗患者痛苦小,再次出血少。结论:两种止血方法比较各有所长,鼻内镜下射频治疗有一定的优势,诊治老年顽固性鼻出血效果好,患者痛苦小、危险性少,容易接受,临床上值得广泛推广应用。

早期糖尿病足患者治疗中联合应用前列地尔与胰激肽原酶治疗的效果探析

目的探讨早期糖尿病足患者在前列地尔给药基础上,取胰激肽原酶加用效果及对预后的影响。方法选择早期糖尿病足患者80例,均为该院内分泌科2016年5月—2018年5月收治,随机分组,就单用前列地尔治疗(对照组,n=40)与联用胰激肽原酶治疗(观察组,n=40)总有效率、炎性因子水平、足背动脉血流、踝肱指数、不良反应率展开对比。结果观察组早期糖尿病足患者总有效率经评定为95.0%,对照组为72.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前炎性因子hs-CRP、TNF-α、IL-6,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后均低于治疗前,且观察组各指标水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前足背动脉血流、踝肱指数差异无统计学意义(P>0.05),治疗后均有升高,且观察组各指标水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组面红、头痛各1例,不良反应率为5.0%;对照组仅面红1例,不良反应率为2.5%,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论针对临床收治的早期糖尿病足患者,在前列地尔给药基础上,取胰激肽原酶加用,可显著提高总有效率,减轻炎性反应,促足背微循环改善,且具较高安全性。

声带息肉3种手术方法的比较观察

目的通过对声带息肉3种手术方法的比较观察,探求最优的手术方法。方法选择自2005年1月至2011年1月分3个时段的患者,在间接喉镜下、支撑喉镜下、纤维喉镜下手术各40例,观察各种方法的疗效。结果 3种手术方法比较各有所长,纤维喉镜下手术有一定的优势,诊治声带息肉效果好,患者痛苦小,危险性少,容易接受。

狼疮性肾炎患者淋巴毒素-β表达及相关性研究

目的探讨淋巴毒素-β(LT-β)在狼疮性肾炎发病及免疫调节紊乱中的作用。方法用ELISA检测血清LT-β水平,PBL RNA斑点杂交测定LT-β基因转录水平;PCR-RLFP法分析LT-β基因多态性。结果狼疮性肾炎患者血清LT-β水平比正常显著增高(P<0.01),与未合并狼疮性肾炎组比亦显著增高(P<0.01);基因转录水平比正常对照组显著增高(P<0.05),与未合并狼疮性肾炎组比亦显著增高(P<0.05)。未发现LT-β基因的XhoⅠ酶切位点具有多态性。结论提示LT-β是导致狼疮性肾炎发生的主要因子,LT-β参与SLE的免疫调节紊乱。

社会主义市场经济条件下思想政治工作创新性研究

市场经济的自发性使人们的自我意识相对弱化,市场经济利益主体的多元化使社会结构相对松散,人们在社会中的自由度有了广阔的空间,这必然引起人们思维方式的变化。因此,随着社会主义市场经济的深入发展,思想政治工作必须开拓创新。

致病性阿米巴原虫疫苗研究进展

阿米巴原虫在自然界广泛分布,可通过粪-口途径、黏膜直接接触等多途径进行传播,可产生特殊的酶类侵入并寄生在人体。由于早期诊断不及时、缺乏有效抗阿米巴感染的药物、难以阻断传播途径,所以预防至关重要。因此研发抗阿米巴原虫感染的疫苗对疾病的预防与传播具有重要意义。

DNA甲基化及测定方法

在真核生物中,甲基化只发生在胞嘧啶第五位碳原子上,由DNA甲基化转移酶(DNMT)催化,以S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,将甲基转移到胞嘧啶上,生成5-甲基胞嘧啶(5m C)的一种反应。其可保护DNA不被限制性内切酶切开。在人类基因组中,DNA的胞嘧啶约有4%被甲基化,它与基因表达有重要关系。活性染色质DNA呈低甲基化。60%~90%Cp G二核苷酸的胞嘧啶是甲基化的。

构建医学检验本科微生物学及微生物学检验实验教学体系的探讨

根据医学检验专业的办学定位及培养目标,提出了改革微生物学及微生物学检验实验教学体系的新思路,以培养面向21世纪微生物学检验的高级应用型技术人才为目标,创建了多层次教学模式,即基础教学为主,研究型教学为辅,增加综合性设计性实验,形成开放式实验教学体系。这种实验教学体系的形成,既能强化学生的基本既能训练,又能提高学生的分析问题、解决问题及创新能力。

中药材川贝母DNA指纹鉴定研究

目的建立川贝母DNA指纹鉴别方法。方法采用CTAB法从川贝母等样品中提取基因组DNA,对其5s rDNA区序列进行扩增并在此基础上展开了分子鉴定研究。经Primer Primer5.0引物设计软件设计川贝母的特异性引物,利用PCR技术对川贝母与其他品种的贝母进行鉴别比较。结果川贝母能扩增出274bp大小的片段,而其他贝母未能扩增出相应片段。结论川贝母DNA具有特异性指纹特征,可作为川贝母与其伪品鉴定的有效方法,该方法简便快速、结果可靠。

聚合酶链式反应偶联单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术用于鹿鞭线粒体DNA指纹的研究

目的建立一种快速、简便、准确的分子生物学方法,用来鉴别鹿鞭真伪及品种。方法应用柱色谱法提取梅花鹿鞭、马鹿鞭、牛鞭以及市售鹿鞭线粒体DNA;根据GenBank中鹿类动物线粒体细胞色素b基因序列,设计一对引物用于线粒体DNA的聚合酶链式反应(PCR)特异性扩增;应用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对聚合酶链式反应产物进行单链构象多态分析(single strand conformation polymorphism,SSCP)。结果梅花鹿鞭、马鹿鞭以及部分市售鹿鞭可显示清晰且迁移率不同的片段;对照组伪品鹿鞭及部分市售鹿鞭无特异性显示。结论柱色谱法提取线粒体DNA所需时间短,DNA纯度高,DNA分子的破坏性较小,为特异性聚合酶链式反应扩增提供一级结构保证;单链构象多态分析法可以清晰显示正品梅花鹿鞭、马鹿鞭以及部分市售鹿鞭单链片段,其一级结构中的碱基差别为正品梅花鹿鞭、马鹿鞭的不同迁移率提供依据,也为药源市场鹿鞭的鉴别提供一种可以直接进行亚种间鉴别的快速、简便、准确的可行性方法。

鹿茸线粒体DNA的指纹鉴定研究

目的通过鹿茸特异性引物鉴别和随机扩增多态DNA(RAPD)鉴别的比较,选择一种更简便的方法用于鉴别鹿茸。方法采用盐析法从梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸、市售鹿茸等样品中抽提线粒体DNA,并应用试剂盒进行纯化。进行特异性引物扩增和序列测定,同时进行随机扩增多态DNA扩增。结果梅花鹿茸,马鹿茸,驯鹿茸以及部分市售鹿茸经特异性引物扩增后均可在琼脂糖凝胶中显示313 bp片段,只是条带亮度不同。而其余市售鹿茸无扩增条带;随机扩增多态DNA不仅有效显示阳性与阴性的DNA扩增结果,而且对梅花鹿茸,马鹿茸,驯鹿茸的聚合酶链反应产物的差异,以不同的条带数目和条带亮度得以验证。结论随机扩增多态DNA鉴别鹿茸真伪的方法更准确快捷,通过随机扩增多态DNA扩增后主条带与梅花鹿茸或马鹿茸扩增的条带大小和亮度一致,则为正品;如不一致,则为《中国药典》规定外的鹿茸或其他混淆品。这种方法对于筛选、甄别市售动物中药材,特别是名贵中药具有广阔的应用前景。

鹿茸毛细管电泳DNA指纹图谱研究

目的采用随机扩增DNA多态性(RAPD)技术扩增鹿茸的线粒体DNA,扩增产物用无胶筛分毛细管电泳紫外检测,从而建立鹿茸的高效毛细管电泳-随机扩增DNA多态性(HPCE-RAPD)指纹图谱。方法对影响聚合酶链式反应(PCR)扩增和毛细管电泳的因素进行优化,在20 mmol·L-1NaH2PO4-Na2HPO4-2 mmol·L-1EDTA缓冲溶液[0.8%(W/V)HPMC,15 mmol·L-1TBAP,pH 7.3]、进样电压-10 kV、分离电压-8 kV的优化条件下,对梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸以及人工伪鹿茸进行分析。结果将获得的指纹图谱进行相似度分析,发现不同鹿茸样品的指纹图谱相似度有明显区别,可用于鹿茸样品的快速真伪鉴别。结论 HPCE-RAPD指纹图谱结合了RAPD技术多态性丰富、检出率高、技术简便和毛细管电泳高效、快速、灵敏等优点,适用于鹿茸及其伪品的快速鉴别,通过进一步研究,本方法还可广泛应用于其他易混中药材的快速鉴别。

安五脂素通过激活NRF2发挥对力竭训练小鼠肝脏损伤的改善作用

剧烈或过度运动过程中机体耗氧量大量增加,会产生过量的自由基。其中,肝脏组织中的自由基水平会因力竭运动增加2~3倍甚至更多,从而导致肝脏组织发生氧化应激损伤,影响肝脏的正常功能。安五脂素是南五味子木脂素中具有代表性的单体成分之一,本研究前期工作已报道,安五脂素对力竭训练小鼠表现出显著的抗疲劳作用,且该作用可能与激活骨骼肌组织中NRF2[nuclear factor(erythroid-derived 2)-like 2]/ARE(antioxidant responsive element)通路抗氧化功能相关。本研究通过建立力竭训练小鼠模型,观察安五脂素对其肝脏组织损伤的保护作用,并应用NRF2抑制剂ML385,通过H2O2所致HepG2细胞损伤模型实验明确安五脂素与NRF2的相关作用机制,动物福利和实验过程均遵循北华大学动物伦理委员会的规定。结果显示,安五脂素能够明显降低力竭训练小鼠血清中ALT(alanine aminotransferase)、AST(aspartate aminotransferase)水平,改善肝脏组织病理损伤,显著提高SOD(superoxide dismutase)、GSH-Px(glutathione peroxidase)、CAT(catalase)水平,降低MDA(malondialdehyde)、8-OHdG(8-hydroxy-2 deoxyguanosine)含量,显示出较强的抗氧化作用。安五脂素能够上调肝组织中NRF2/ARE抗氧化调节通路,增加Bcl-2(B-cell lymphoma 2)表达并降低Bax(Bcl-2-like protein 4)、caspase3的表达,且体外实验结果中安五脂素对抗氧化及凋亡相关蛋白的影响与动物实验中完全一致。给予ML385干预后,安五脂素对上述所有指标的影响均被抑制。安五脂素通过抗氧化作用发挥对力竭训练小鼠肝损伤的保护作用,该作用与其激活NRF2作用相关。