脑蛋白水解物对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化损伤的修复作用及其胃漂浮片处方的优化

目的:检测脑蛋白水解物(BPH)对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的修复作用,运用星点设计-效应面法对BPH胃漂浮片的处方进行优化。方法:将对数生长期PC12细胞分为正常对照组、模型组(300μmol·L-1 H2O2)、BPH组、人工胃液处理的BPH(GBPH)组、人工肠液处理的BPH(IBPH)组、人工胃液处理的BPH片(GBPH-T)组和人工胃液处理的BPH漂浮片(GBPH-FT)组(后5组均加不同条件处理的20、40、60、80和100mg·L-1BPH),另设空白对照组;正常对照组不做任何处理,空白对照组只加培养基,其他各组采用300μmol·L-1 H2O2孵育3h造成损伤模型。采用MTT法检测细胞活力;利用Design-expert8.0.6Trial软件,将HPMC-K4M、十八醇和丙烯酸树脂Ⅱ号用量作为考察因素,以8h累积释放度为评价指标,优化处方。结果:与正常对照组比较,60mg·L-1 BPH组细胞活力明显升高(P<0.05);与模型组比较,BPH、IBPH、GBPH和GBPH-FT组细胞活力明显升高(P<0.05或P<0.01);与BPH组比较,IBPH组细胞活力明显降低(P<0.05),GBPH组细胞活力差异无统计学意义(P>0.05);与GBPH-T组比较,GBPH-FT组细胞活力明显升高(P<0.05)。优化处方为BPH 20mg,乳糖10mg,硬脂酸镁0.4mg,微晶纤维素20mg,HPMC-K4M27mg,十八醇63mg,丙烯酸树脂Ⅱ号13mg;BPH胃漂浮片均在5s内起漂,持续漂浮>8h,8h累积释放度实测值与预测值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BPH对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤具有修复作用。星点设计-效应面法预测性和重复性良好,合理可行,可用于BPH胃漂浮片处方的优化。