苏合香丸治疗蛛网膜下腔出血的网络药理学研究

目的采用网络药理学的研究方式,探讨具有醒脑开窍作用的苏合香丸治疗蛛网膜下腔出血的分子机制,以指导临床应用。方法利用中药相关数据库搜索出苏合香丸的有效化学成分,依据这些化学成分找到针对中枢神经系统的治疗靶点,并与蛛网膜下腔出血的疾病靶点相匹配,找到治疗蛛网膜下腔出血的关键靶基因,进一步应用Systems Dock完成分子对接验证,最后对其靶点采用GSEA法富集分析。结果根据口服生物利用度、类药性及血脑屏障筛选出苏合香丸的11种有效成分,对应着183个靶点,与蛛网膜下腔出血的382个靶点应用cytoscope软件得到最终关键节点21个,这些节点与蛛网膜下腔出血后的血管痉挛、昏迷患者促进苏醒等作用密切相关。结论本研究揭示了苏合香丸治疗蛛网膜下腔出血的作用机制,体现了中药复方多靶点的治疗优势,为进一步药理学研究提供了实验依据。

基于网络药理学分析头痛宁治疗蛛网膜下腔出血的机制研究

采用网络药理学研究方法,探讨头痛宁治疗蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)的分子机制。利用中药相关数据库搜索出头痛宁的有效化学成分,这些成分按照口服生物利用度(oral bioavailability,OB)、类药性(Drug-likeness,DL)及血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)透过性差异分类,并找到对应靶点。应用Cytoscope软件"merge"功能将药物靶点与SAH的疾病靶点匹配,得到治疗SAH的关键靶点,经Metascape平台进行富集分析。结果表明根据OB≥30%、DL≥0.18及血脑屏障(blood brain barrier,BBB)≥0.3或BBB<0.3筛选标准,得到头痛宁容易透过BBB的7种有效成分及不易透过BBB的14种有效成分,它们分别对应着57、120个靶点。将这些靶点与SAH的273个靶点共同分析后得到易透过BBB的10个关键节点及不易透过BBB的28个关键节点,Metascape分析结果显示这些关键节点主要在炎症、神经元修复、神经递质调节、周围神经重塑、脂质及激素代谢、血管舒缩调节方面富集。揭示了头痛宁治疗蛛网膜下腔出血的作用机制,体现了中药复方多靶点的治疗优势,为进一步药理学研究提供了实验依据。

白藜芦醇通过SIRT1减轻蛛网膜下腔出血大鼠神经系统炎症反应

目的:白藜芦醇(RSV)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经系统沉默信息调节因子同源蛋白1(SIRT1)的表达及炎症反应的影响。方法:48只成年雄性SD大鼠分为对照组(Control)、蛛网膜下腔出血组(SAH)、RSV治疗组(RSV)和RSV联合组SIRT1抑制剂EX 527处理组(RSV+EX 527),利用自身血液注射法制备SAH大鼠模型,神经功能缺损评分检测大鼠神经功能变化,Western Blot检测SIRT1表达水平变化,免疫荧光染色观察小胶质细胞表面标记CD11b的表达变化,利用ELISA检测神经系统炎性细胞因子TNF-α和IL-1β变化。结果:与正常对照组相比,SAH大鼠神经功能受损明显(P <0. 05),中枢神经系统SIRT1表达降低(P <0. 05),小胶质细胞活化明显(P <0. 05),TNF-α和IL-1β均显著升高(P <0. 05);经过RSV治疗后,与SAH大鼠相比,治疗组大鼠神经功能明显得到改善(P <0. 05),神经系统SIRT1表达增加(P <0. 05),小胶质细胞活化受到抑制(P <0. 05),炎性细胞因子TNF-α和IL-1β水平下降(P <0. 05);使用EX 527处理后,RSV的神经保护作用受到抑制,表现为SAH大鼠神经功能恢复不明显,中枢神经系统小胶质细胞持续活化,细胞因子TNF-α和IL-1β水平维持在较高水平。结论:RSV通过促进SIRT1表达抑制炎症反应发挥对SAH大鼠中枢神经系保护作用。

睫状神经营养因子对大鼠脑缺血后髓鞘再生的影响

目的:研究睫状神经营养因子(CTNF)对脑缺血大鼠胼胝体髓鞘再生的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、双侧颈总动脉结扎(2-VO)组和CTNF治疗组(CTNF)。利用2-VO法制备大鼠脑缺血损伤模型,在术后24 h内用0. 4μg/kg的CTNF或生理盐水分别给予CTNF治疗组、2-VO组和Sham组大鼠尾静脉注射。给药7 d后通过神经缺损功能评分(NSS)和转棒实验(Rota-Rod)检测各组大鼠神经功能,电镜观察胼胝体内髓鞘超微结构的变化,通过免疫荧光染色观察少突胶质细胞转录因子2(Olig-2)的表达,Western Blot检测髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达。结果:与Sham组相比,2-VO组大鼠神经功能显著受损(P <0. 05);电镜下可观察到大鼠胼胝体髓鞘变薄、完整性差;胼胝体部位Olig-2表达显著减少; MBP表达显著下降(P <0. 05)。经CTNF治疗后7 d的大鼠出现神经功能明显改善(P <0. 05),胼胝体髓鞘结构明显恢复,Olig-2表达明显增加,MBP表达明显增加(P <0. 05)。结论:CTNF处理能够改善脑缺血大鼠神经功能,促进髓鞘再生。

SIRT1通过促进eIF2α去乙酰化抑制PC12细胞氧化应激反应

目的:研究沉默信息调节因2相关酶1(SIRT1)和真核起始因子2α(eIF2α)在PC12细胞氧化应激过程中的作用。方法:大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤来源的PC12细胞分为4组:对照组(Control)、D-半乳糖处理组(D-gal)、白藜芦醇处理组(RSV)、RSV和EX527联合处理组(RSV+EX527),利用D-gal处理制备神经细胞氧化应激模型,MTT法检测细胞增殖活性,real time RT-PCR检测SIRT1和eIF2αm RNA水平变化,利用商品化试剂盒检测各组细胞中氧化应激,利用免疫共沉淀(Co-IP)技术检测eIF2α去乙酰化水平。结果:与正常对照组相比,D-gal处理组细胞的活性下降,SIRT1和SOD表达下降,GSH水平下降,MDA水平升高,eIF2α去乙酰化水平降低;RSV处理后,SOD活性增加,GSH水平升高,MDA水平下降,eIF2α去乙酰化水平增加;EX527+RSV联合处理后,RSV导致的上述变化减弱或消失。结论:在PC12细胞中SIRT1能够通过eIF2α去乙酰化抑制细胞氧化应激而发挥保护作用。

脑卒中诊疗关键技术创新与临床应用

脑卒中是指因各种诱发因素引起脑内动脉狭窄、闭塞或破裂,造成急性脑血液循环障碍,临床上表现为一过性或永久性脑功能障碍的症状和体征.脑卒中分为缺血性卒中和出血性卒中,其中缺血性脑卒中约占脑卒中总数的60%~70%.脑卒中是当今世界严重危害人类健康和生命安全的难治性疾病,具有发病率高、致残率高和死亡率高的特征.我国是目前世界上脑血管病负担最大的国家,不仅因为其人口基数庞大,而且中国人群更易罹患脑血管疾病,死于脑血管疾病的患者数量高达心血管疾病的3倍.