平消片对大鼠的长期毒性研究

目的 :观测大鼠连续重复给予平消片可能产生的毒效应及其恢复情况 ,为临床安全用药提供毒理学依据。方法 :本研究观测指标及方法均按《中药新药研究指南》中规定的统一指标和方法进行。结果 :给药后中、高剂量组动物出现耳尖、尾尖、口唇、爪尖发绀 ,少动、精神萎蘼等症状 ,但 1～ 2小时后完全恢复 ;高剂量组个别动物这种症状逐步加重 ,相继有 4只动物因呼吸衰竭而死亡 ;低剂量组个别动物只出现少动、精神不振现象 ,但在 3 0分钟内完全恢复 ,其后未见任何不良反应 ;各组动物粪便性状正常、生长情况良好 ;血液学指标、血液生化指标、脏器系数、脏器病理学检查均未见异常。结论 :平消片大鼠长期毒性试验的最大无损害作用剂量为 3 74mg·kg- 1 体重。临床应用时应严密注意本药主要成分马钱子中毒的发生。

凋亡相关基因的表达与胃癌的关系

目的 :研究凋亡相关基因bcl 2、bax、p5 3表达在胃癌发展过程中可能的作用机制。方法 :采用免疫组化SABC法检测 81例临床标本 (慢性浅表性胃炎 2 9例、萎缩性胃炎 13例、胃炎伴异型增生 2 1例、胃癌 18例 )的bcl 2、bax、p5 3蛋白表达。结果 :在慢性浅表性胃炎组中无bcl 2表达 ,异型增生组阳性表达率 5 % ,胃癌组为 2 0 % ,阳性表达率呈逐渐增加趋势 ;bax蛋白阳性表达率在慢性浅表性胃炎组为 83.3% ,萎缩性胃炎组为 6 4 .3% ,异型增生组为 6 0 % ,胃癌组为 4 6 .7% ,阳性表达率呈逐渐减少趋势 ;p5 3在慢性浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组无表达 ,在异型增生组阳性表达率 2 0 .6 % ,胃癌组为 4 2 .4 % ,阳性表达率呈逐渐增加趋势。结论 :在胃癌的发展过程中可能存在凋亡抑制 。

扫描电镜生物标本的一种新干燥方法—叔丁醇冻干法

对于含水份多的生物样品进行彻底脱水与干燥处理,是电镜标本制作过程中的关键环节。标本干燥通常采用的是临界点干燥法。本法存在人为假象的问题,而且所需干燥仪器又特殊昂贵。最近我们成功地对生物标本在脱水过程中进行了中间溶剂的变换实验。结果发现:叔丁醇是最有效和最合适的有机溶剂,且挥发性极好,仅需一个真空泵,而无需特殊仪器,故成本低廉。

培养细胞透射电镜标本制作方法的改进

培养细胞的形态学观察,特别是超微结构的观察,多年来由于制作标本时细胞即难收集,又易离散等诸多问题而受到一定的限制。当前关于这方面技术的多种报道可规纳为两类,一类为“顶扣包埋法”,即将细胞置于载玻片或盖玻片上进行培养,然后直接在玻片上进行常规的清洗、固定、脱水和包埋等一系列透射电镜样本制作程序。最后,用灌满包埋树脂的四环素胶囊扣在载有培养细胞的玻片上进行聚合,

肽类生长因子与前列腺增生

随着细胞学及分子生物学研究的不断深入,人们对多肽生长因子的生化特性和生物学作用的认识愈趋广泛,并逐渐认识到它在调节前列腺的生长发育以及前列腺增生(BPH)的发生中发挥着重要的作用[1].

幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞凋亡的影响

为了探讨幽门螺杆菌(HP)相关性胃疾病细胞凋亡这一生物学特性,揭示HP与胃癌的关系及其可能的致癌机制,利用DNA缺口末端标记(DNEL)技术对正常胃粘膜、HP阳性和HP阴性慢性胃炎、萎缩性胃炎、不典型增生及胃癌等活检组织共计130例,进行细胞凋亡状态的研究。结果显示,HP性慢性胃炎和萎缩性胃炎的凋亡指数明显增加(P<0.01),而HP阳性不典型增生和胃癌的凋亡指数降低,从慢性胃炎到胃癌,HP阳性组的凋亡指数明显递减。这提示,从慢性胃炎到胃癌形成的过程中,HP可在前期诱导细胞凋亡,而在后期呈现抑制细胞凋亡的倾向,HP相关性胃疾病可能更具恶变倾向。

独活胶囊急性及长期毒性研究

目的:评价独活胶囊急性及长期毒效应,为临床安全用药提供毒理学依据。方法:按《中药新药研究指南》要求,应用昆明种小鼠经口进行急性毒性试验,应用Wistar大鼠和杂种犬进行90天经口长期毒性试验。结果:小鼠、大鼠大剂量给药后10分钟出现尾尖发绀、烦躁不安、呼吸加快等中毒症状,部分小鼠因呼吸衰竭而死亡,但大鼠给药30天后中毒症状消失;高剂量组大鼠生长较对照组缓慢,病理学检查可见部分大鼠胃胀气、粘膜水肿,光镜下可见高剂量组少数大鼠及犬肝细胞内有玻璃样小体出现,经恢复期观察此种改变为可逆的,基本恢复正常水平;各剂量组大鼠、犬的血液学、血液生化学各指标与对照组相比,均未发生有意义的变化,小鼠经口LD50为7.35±0.62g/kg。结论:独活胶囊属低毒类药物。

大肠腺癌和腺瘤上皮细胞缝隙连结超微结构的研究

随着肿瘤病因学研究的进展,现已发现细胞间通讯联系的异常很可能是癌变促进过程中的重要环节之一。本实验用铁氰化锇法特异性标记大肠腺癌和肠腺癌上皮细胞缝隙连接蛋白(gap junction protein,GJP),进而观察在GJP数量和着色深浅等方面的变化和区别。

幽门螺杆菌感染与胃粘膜上皮p53蛋白表达的关系

目的 研究幽门螺杆菌（ＨＰ）根除治疗对ｐ５３ 蛋白表达的影响，并探讨ＨＰ与胃癌的关系。方法 利用免疫组化染色对２０６ 例胃粘膜活检组织（其中包括正常胃粘膜、ＨＰ阴性胃癌前各阶段病变和ＨＰ阳性胃癌前各阶段病变ＨＰ根除治疗前后及胃癌）进行ｐ５３ 蛋白表达的分析。结果 在正常胃粘膜未见ｐ５３ 蛋白表达。ＨＰ阳性胃癌前阶段病变ｐ５３ 蛋白表达阳性率显著高于正常胃粘膜及ＨＰ阴性胃癌前阶段病变，其中ＨＰ阳性肠上皮化生ｐ５３ 蛋白表达阳性率显著高于ＨＰ阴性相应病变组，低于ＨＰ阳性异型增生组。ＨＰ阳性胃癌前阶段病变ＨＰ根除治疗后，其ｐ５３ 蛋白表达阳性率显著降低。结论 ＨＰ感染可促进突变型ｐ５３ 基因表达增强；ＨＰ根除治疗可使胃癌前阶段病变ｐ５３ 蛋白表达阳性率明显降低。

微血管形成与宿主组织间关系的实验研究

利用扫描电镜观察到胎生和新生大鼠晶体血管膜的血管芽生方式分5种,即单向芽生方式、双向芽生方式、胶原和周皮细胞介导的芽生方式、血管源性细胞诱导的芽生方式以及芽生芽的方式。文中阐述了血管周皮细胞和玻璃体细胞的来源及其功能,探讨了血管形成及改建的机理,并进而提出周皮细胞和血管源性细胞在血管形成过程中的重要作用。

对免疫组织化学染色的几点体会

目前常用的免疫组织化学染色方法有ＡＢＣ法、ＳＰ法和ＬＳＡＢ法等。免疫组化染色已成为科研和临床工作常用方法。为此，我们就近年来该方面的工作介绍以下几点体会。１组织标本、固定液和缓冲液组织标本离体后，应在３０ｍｉｎ之内及时进行固定，所取组织不宜过大，并应...

乳腺癌中p21^(WAF1)的表达

目的:探讨乳腺癌中p21WAF1的表达与细胞增殖活性及预后的关系。方法:采用免疫组化法检测p21WAF1在58例无淋巴结转移的乳腺癌中的表达,采用流式细胞术分析DNA含量。结果:在乳腺癌中p21WAF1的阳性率为43%,阳性反应产物见于瘤细胞核,p53阳性者的p21WAF1阳性表达率(54%)高于p53阴性者(35%),p21WAF1的表达与SPF(S期细胞比例)和患者预后无关。结论:乳腺癌中p21WAF1的表达不能作为判断肿瘤细胞增殖活性和患者预后的独立标志物。

胃癌及癌前病变组织中细胞凋亡和增殖的原位观察

为探讨细胞凋亡和增殖在胃癌发生中的作用,利用DNEL技术和PC-NA免疫组化染色对130例胃粘膜活检组织进行观察。结果表明,在胃癌和癌前病变,其凋亡指数分别低于和明显高于正常胃粘膜,其增殖指数均明显高于正常胃粘膜;从浅表性胃炎到胃癌,凋亡指数明显递减,增殖指数明显递增。结果提示,胃癌前病变粘膜上皮细胞更新加快,不稳定性增加,通过细胞增殖与凋亡的分离和NDA损伤,可导致胃癌的发生。

运用TUNEL技术检测胃粘膜活检组织凋亡细胞

细胞凋亡，亦称程序化细胞死亡，是由基因调控的细胞主动死亡过程。当凋亡发生时，核内的核酸内切酶活化，将ＤＮＡ降解为１８０～２００ｂｐ及其倍数的片段。１９９２年Ｇａｖｒｉｅｌｉ等［１］创立了脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技...

延缓失神经肌萎缩提高功能恢复的实验研究

目的：减轻结缔组织增生的干扰,促进神经胶质细胞增生和轴突再生,提高脊髓神经纤维的再生效果,延缓肌萎缩提高功能恢复.方法：切除狗L1-2L3-4脊髓节段,采用缝匠肌尾侧部桥接脊髓缺损局部,术后不同时间采用行为学和形态学方法进行测试和观察.结果：肌桥段内有再生的神经纤维,肌萎缩逐渐恢复,双下肢运动功能有所恢复,Tarlov Motor Scotol分级2～4级.结论：肌桥桥接脊髓缺损局部减轻结缔组织增生的干扰,提高脊髓神经纤维的再生效果,延缓肌萎缩提高功能恢复.

胃癌组织中Fas蛋白的表达及其意义的分析

目的:研究胃癌组织中Fas蛋白的表达情况,探讨Fas在胃癌发病中的作用及其意义。方法:采用免疫组化S-P法分别检测了52例胃癌,52例癌周组织和10例正常胃黏膜组织中Fas基因的表达。结果:52例胃癌组织中Fas表达的阳性率为46.1%(24/52),癌周组织Fas表达阳性率65.3%(34/52),对照组Fas表达阳性率为90%(9/10)。结论:Fas蛋白的异常表达与胃癌的发生发展有关,其低表达可能与在胃癌发生发展过程中癌细胞的免疫逃逸有关。

胃癌及癌前病变组织中p53蛋白表达的研究

目的:研究p53蛋白表达在胃癌发生发展过程中的变化规律。方法:利用免疫组化染色对206例胃黏膜活检组织,包括正常胃黏膜、慢性浅表性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌,进行p53蛋白表达的分析。结果:正常胃黏膜和慢性浅表性胃炎中未见p53蛋白的表迭;肠上皮化生的p53蛋白表达阳性率显著高于正常胃黏膜和慢性浅表性胃炎;异型增生的p53蛋白表达阳性率高于肠上皮化生,而显著低于胃癌组织。结论:p53基因突变是胃癌发展发生过程中的一个重要环节。