香港玛丽医院肝脏移植中心护理见闻

通过香港玛丽医院肝脏移植中心为期1个月的进修学习,了解了香港玛丽医院肝脏移植中心以开展各种肝脏移植为主,尤其是活体肝移植;了解了中央输候名册的意义和作用-保证供肝的公平分配;学习到充分的术前检查和准备;细致而严密的术后观察治疗和护理;出院病人复诊时特殊的医生看病人模式,体会到移植协调员重要的桥梁作用和来自肝康会的社会支持。

DA到Lewis大鼠肝脏移植急性排斥模型的建立

目的：建立大鼠原位肝脏移植的急性排斥模型并观察其排斥反应的特点．方法：采用近交系雄性DA大鼠为供体，Lewis大鼠为受体，改良“二袖套”法建立肝脏移植模型30例．随机分为两组，对照组（n=15）术后不用免疫抑制剂，FK506处理组（n=15）术后1-7d用FK506 0．2mg／（kg·d）灌胃．术后4，7和10d分别随机处死3只，检测血清肝功能生化指标[天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（BILI）]以及肝脏病理组织学变化，每组各留6只观察生存期．结果：术后7和10d时对照组血清AST，BILI浓度均高于FK506处理组[AST：7d，（17．74±3．6）μkat/L vs（7．94±1．6）μkat/L，P〈0．05；10d，（21．94±4．3）μkat/L vs（4．74±0．7）μkat/L，P〈0．05．BILI：7d，（90．94±18．8）μmol／L vs（6．84±0．7）μmol／L，P〈0．05；10d，（111．54±23．3）μmol／L vs（15．54±3．2）μmol／L，P〈0．05]．术后7d，对照组移植物出现明显的排斥反应的病理学变化，10d时更为严重．FK506组术后7和10d病理学检查为不明确或轻度的排斥表现．对照组中位生存时间为12d，95％可信区间为（11．77-13．90）d（n=6，12d×4，14d×1，15d×1）．FK506处理组中位生存时间为78d，95％可信区间为（65．26-90．74）d（n=6，〉65 d×1，〉67d×1，76 d，78d，89d和90d），生存时间明显较对照组延长（P〈0．05）．结论：DA到Lewis大鼠品系组合可以建立稳定可靠的肝脏移植急性排斥模型；该模型的排斥反应的特点与临床相似，且可以为抗排斥药物FK506预防而达到长期存活．

原位肝脏移植术后胆道并发症的诊治

目的:探讨原位肝移植术后胆道并发症的诊断和治疗。方法:总结2004年10月～2006年4月在本院接受原位肝脏移植的117例患者的临床资料,分析肝移植术后胆道并发症的诊断和治疗方法。结果:术后发生胆道并发症15例(12.82%),其中7例发生胆道狭窄,1例胆道吻合口梗阻,2例吻合口胆漏,T管拔除后胆瘘2例,胆泥瘀积或结石3例,除1例行再次移植外,其余经过引流、介入等治疗均获得满意的疗效。结论:肝移植术后胆道并发症发生的病因机制仍有许多方面值得研究探讨,及时预防、诊断、处理胆道并发症将明显地提高肝移植患者的生存期和生活质量。

肝脏移植术后肺部感染危险因素分析及护理

目的:通过对肝移植术后发生肺部感染的危险因素进行分析,探讨有针对性的管理方式。方法:使用自行设计的调查表,对73例肝移植中有肺部感染的患者进行回顾性因素分析。结果:术前或术后大量胸腹水、肾功能异常、术后呼吸机使用时间≥2 d、术中或术后大出血、术后肺水肿、营养方式、手术前后不具备积极的应对机制等均与术后肺部感染相关。结论:明确相关危险因素,在手术前后有目的的预防或及时加强管理,能使肝移植术后肺部感染率大大降低,提高手术成功率。

白介素-10基因修饰骨髓间充质干细胞调控大鼠异种原位肝移植免疫耐受机制的研究

目的研究人类白介素(human interleukin,hIL)-10基因修饰的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对大鼠原位异种肝移植排斥反应的影响及机制。方法建立豚鼠(供体)对Wistar大鼠(受体)的非协调性异种原位肝脏移植模型。供受体各90只,随机分为三组:空白对照组(A组),MSC组(B组),hIL-10修饰MSC(hIL-10-MSC)组(C组),每组各30只。观察受体鼠存活时间、肝功能的变化,用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain re-action,RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immune absorbent assay,ELISA)检测移植肝的白介素(interleukin,IL)-12、IL-15、IL-18、IL-4、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α及IL-10的mRNA表达情况及各细胞因子的含量。结果与A组和B组相比,C组大鼠的生存时间延长、肝功能好转,细胞因子IL-12、IL-15、IL-18、TNF-α含量及其mRNA表达明显降低,IL-4和IL-10显著升高(P<0.05)。结论 hIL-10-MSC对移植肝的保护作用可能与其抑制IL-12、IL-15、IL-18、TNF-α细胞因子的表达,促进细胞因子IL-4的表达有关。

建立大鼠部分肝移植动脉化模型的实验研究

目的 建立稳定的大鼠部分肝移植动脉化模型 ,并观察术后病理变化。方法 采用改良二袖套法建立大鼠部分肝移植模型 ,并进行供体的腹腔动脉与受体的右肾动脉端端吻合 ,采用肝穿刺活检技术于术后 1d、2d、4d及 7d行肝活检。结果 动物术后 1周存活率为 85 .4 %。病理组织学检查术后第 2天可见细胞核有丝分裂象 ,第 4天偶见细胞核有丝分裂象 ,第 4、7天可见双核细胞。结论 通过技术改进 ,提高了模型建立的稳定性。肝穿刺活检技术是进行大鼠肝移植术后相关问题研究的简便、安全、可行的方法。

一氧化氮促释放剂在保护大鼠减体积肝移植后缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨一氧化氮促释放剂(FK409)在保护减体积肝移植大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法:将56对(112只)SD大鼠分为两组,分别为FK409处理组和对照组。其中各组的8对大鼠用于观察存活率,20对用于观察移植后血中肝脏天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素、NO水平及移植物内早期生长反应因子-1(EGR-1)蛋白水平的变化。结果:FK409处理组的1周存活率、血清NO水平均高于对照组(P<0.05),ALT、AST及肝组织中的EGR-1蛋白含量则低于对照组(P<0.05)。结论:一氧化氮促释放剂(FK409)能够通过增加NO的合成,来减轻原位减体积肝移植大鼠的再灌注损伤,改善微循环,提高移植肝脏的功能。

川芎嗪预处理在预防大鼠移植肝缺血再灌注损伤中的作用探讨

目的:探讨川芎嗪预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的作用及可能的机制。方法:将125只雄性SD大鼠随机分成3组:假手术组、对照组(生理盐水作为肝脏灌注液)、实验组(川芎嗪预处理,生理盐水作为肝脏灌注液)。假手术组仅结扎肝动脉,对照组和实验组行大鼠原位肝移植,分别于术后1、6、24、72h剖杀各组大鼠各5只,检测各组大鼠血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量以及血清内毒素水平;检测肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1β)的含量,观察大鼠肝脏组织病理学和Kuffer's细胞超微结构改变。结果:实验组大鼠的ALT、AST、TNF-α、IL-1β的表达明显低于对照组,但高于假手术组(P<0.05);实验组炎症反应及Kuffer's细胞活跃程度明显轻于对照组。结论:川芎嗪预处理能抑制kuffer's细胞吞噬活性,减轻大鼠移植肝缺血再灌注损伤。

大鼠30%小体积肝移植模型三种切肝方法的比较

目的:探讨不同肝叶选取和切肝方法对小体积肝移植术后生存率的影响,以建立理想的成功率高的大鼠30%小体积肝移植模型.方法:采用以Kamada的"二袖套法"非动脉化大鼠原位肝移植模型为基础,建立大鼠30%小体积肝移植模型.实验分为3组:Ⅰ组:中叶供肝的30%小体积肝移植组(n=28):Ⅱ组:右中叶和右叶供肝的30%小体积肝移植组(n= 15);Ⅲ组:改进切肝方法的30%中叶供肝小肝移植组(n=36).观察3组术后并发症和7d生存率.结果:Ⅱ组切肝时间和术后肝后下腔静脉狭窄的发生率明显低于Ⅰ组(11±3 min vs 13±2 min,P=0.0305;0/15 vs 8/28,P=0.036),但胆漏的发生率高于Ⅰ组(4/15 vs 0/28,P=0.011).Ⅲ组肝后下腔静脉狭窄的发生率明显低于Ⅰ组(1/36 vs 8/28,P=0.008),其他并发症发生率各组间无明显差别.术后7d生存率Ⅰ(33%)、Ⅱ(50%)、Ⅲ(60%)组间无统计学差别.结论:采用中叶供肝、改进切肝技术可以建立具有更稳定的大鼠30%小体积肝移植模型.

CD4^+CD25^+调节性T细胞回输对大鼠肝移植急性排斥反应的影响

目的:探讨回输CD4+CD25+调节性T细胞对大鼠肝移植急性排斥反应的影响．方法:免疫磁珠阴性加阳性分选Lewis大鼠脾脏、外周淋巴结内的CD4+CD25+调节性T细胞,分离后的细胞与丝裂霉素C处理过的DA 大鼠脾细胞混合培养3 d．淋巴细胞增殖实验评价新鲜分离和体外培养后的CD4+CD25+调节性T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用．以DA大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立4组原位肝移植模型,每组12例,共48例．A 组术后不进行任何干预;B组术后0-6 d FK506 0．2 mg/(kg·d)灌胃;C组、D组术前1 d经阴茎背静脉分别向受体回输新鲜分离、体外培养后的1×106的CD4+CD25+T细胞．术后7 d每组随机处死6只,收集血标本作血清天冬氨酸氨基转移酶(asparate transaminase,AST)、总胆红素(bilirubin,BIL)检测,取肝脏标本作病理学检查,每组各留6只观察生存期．结果:分选后的CD4+CD25+T细胞纯度为 90．2％±1．8％(86％-93％,n=10),淋巴细胞混合培养实验中新鲜分离和体外培养后的 CD4+CD25+T细胞均可抑制CD4+CD25-T细胞的增殖(7 681．7±1 004．9,6 573．3±1 722．7 cpm vs 24 918．7±2 276．3 cpm;P=0．000,P =0．000)．术后7 d,新鲜细胞回输组以及体外培养细胞回输组AST低于对照组(8．1±2．0 μkat/L vs 17．9±3．8 μkat/L,P=0．000;8．4±1．4 μkat/L vs 17．9±3．8 μkat/L,P=0．000),BIL亦低于对照组(45．8±9．0 μmol/L vs 98．4±21．2 μmol/L,P=0．000;44．7±12．0 μmol/L vs 98．4 ±21．2 μmol/L,P=0．000)．四组的Banff评分比较,两组细胞回输组与对照组比较有统计学差异(P<0．05)．两组细胞回输组生存时间均大于对照组(21．7±1．7 d vs 12．8±0．5 d,P=0．0001; 30．3±1．7 vs 12．8±0．5 d,P=0．000 4),体外培养细胞回输组生存时间大于新鲜细胞回输组 (30．3±1．7 d vs 21．7±1．7 d,P=0．0017)．结论:回输新鲜分离/经供体抗原体外激活的受体CD4+CD25+调节性T细胞,可以明显减轻大鼠肝脏移植的急性排斥反应,延长生存期; 其中经供体抗原体外激活的CD4+CD25+调节性T细胞的作用更持久．

超声刀技术在肝肿瘤切除术及活体肝移植术中的应用

目的:观察超声刀技术在肝肿瘤切除术及活体肝移植术中应用的临床效果。方法:回顾性对比采用超声刀技术和未采用超声刀技术在肝肿瘤切除术及活体肝移植术中临床效果差异。结果:采用超声刀技术的肝部分切除术患者组与未采用超声刀技术组的患者相比术中出血量、术后24h引流量明显减少,术后1周天冬氨酸氨基转移酶(ALT)明显降低。结论:超声刀技术在肝肿瘤切除术及活体肝移植术中是一种安全、有效的工具,可进一步推广及运用。

甲状腺激素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨甲状腺激素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其可能作用机制。方法:建立大鼠70%的肝脏缺血再灌注模型,将64只健康雄性SD大鼠随机分成4组:正常对照组(S组),缺血再灌注组(IR组),缺血预处理组(IPC)组,甲状腺激素干预组(T3组)。缺血1h再灌注6h、24h后,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,病理切片HE染色和免疫组化方法分别检测肝脏组织的病理改变和肝细胞核因子-κB(NF-κB)阳性表达。结果:肝脏缺血再灌注后,IR组的ALT、AST水平及MDA、TNF-α、NF-κB阳性表达明显高于S组,GSH含量、SOD活性明显下降(P<0.01),肝组织病理损伤较S组严重,T3组、IPC组均能改善以上情况(P<0.01),而T3组及IPC组之间无明显差异(P>0.05)。结论:甲状腺激素和缺血预处理一样对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。其机制可能通过减少氧自由基的产生及减轻脂质过氧化反应,降低TNF-α的表达和抑制NF-κB的活化来实现。

成人肝移植术后依从性及影响因素的研究

目的:评估成人肝移植术后的依从性及影响因素,为改善其依从性提供依据。方法:采用问卷调查方法对46例肝移植术后超过6个月的成人受者进行随访和调查。结果:成人肝移植术后具有较好的总依从性[(40.02±4.79)分],其中服用免疫抑制药物依从性最好[(3.70±0.37)分],其次为良好生活习惯依从性[(3.30±0.51)分],再次为随访依从性[(3.24±0.80)分],自我监测依从性最差[(2.24±0.85)分]。影响成人肝移植术后依从性的主要因素有移植术后时间(r=-0.445,P=0.002)、职业(t=-2.08,P=0.044)、有势力的他人(r=0.415,P=0.007)和社会支持(r=0.577,P=0.000)。结论:应加强肝移植术后受者随访和自我监测的依从性教育,帮助受者寻求更多的社会支持,尤其是医护人员的专业支持,对术后时间较长的受者和非干部人群给予更多关注。

肝移植患者家属心理状况与生活质量调查

目的探讨肝移植患者家属的心理状况及其对生活质量的影响,为改善此类特殊人群生活质量提供依据。方法采用焦虑、抑郁自评量表和SF-36简明健康量表,对52例肝移植患者家属进行问卷调查,分析其相关性。结果肝移植患者家属的焦虑、抑郁得分显著高于健康人群(均P<0.01);肝移植患者家属在生理职能、情感职能、社会功能、精神状态、活力及对健康总评价方面得分显著低于健康人群(P<0.05,P<0.01);焦虑、抑郁情绪与肝移植患者家属的情感职能、社会功能、精神状态、活力及健康总评价呈负相关(均P<0.01),抑郁情绪与患者家属的生理职能呈负相关(P<0.05)。结论肝移植患者家属存在严重的焦虑、抑郁情绪,并影响了他们的生活质量,有必要采取行之有效的干预措施。

肝动脉重建对大鼠部分肝移植后移植肝的影响

目的阐明肝动脉重建在大鼠部分肝移植中的意义。方法SD大鼠96只,POLT组行二袖套法切除左外叶和乳头叶的原位部分肝移植n=24,APOLT组行二袖套法切除左外叶和乳头叶的原位部分肝移植,联合肝动脉重建n=24,分别于术后第1,2,4和7天处死后查肝功能、组织学检查及流式细胞仪检测移植肝增殖活性。结果肝功能ALT、TB第一天即开始明显增高,以后逐渐降低,第四天ALT和TB均高于APOLT组,差异有显著性(P<0.05);组织学检查术后可见APOLT组可见更多的二倍体和多倍体肝细胞(P<0.05);第2天和第4天APOLT组增殖指数分别为(33.81±3.45)%和(35.33±2.52)%较POLT组(23.08±4.66)%和(29.79±1.81)%明显增高,差异有显著性(P<0.01)。结论该研究结果初步表明肝动脉吻合可明显改善大鼠部分肝移植移植肝的功能,减轻移植肝的组织学改变,促进部分移植肝的再生。

肝移植术后胆道铸型的风险因素和治疗

目的:探讨肝移植术后胆道铸型的风险因素,回顾治疗方法。方法:回顾性总结本院自2005年1月～2005年12月肝脏移植受体中发生胆道铸型的患者的材料。结果:112例肝移植受体中发生胆道铸型共15例。结论:供肝缺血时间过长和胆道狭窄的患者更容易发生胆道铸型,在外科手术之前可以进行内镜治疗并能够获得满意的效果。

间充质干细胞在大鼠异种肝移植肝组织中的迁徙、定居及组织修复作用

目的观察间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)在大鼠异种肝移植肝组织中的迁徙、定居及组织修复作用。方法分离培养、体外扩增豚鼠骨髓MSC,经4,6-联脒-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记后用荧光显微镜进行体外示踪观察。制作豚鼠对Wistar大鼠的肝移植模型,DAPI标记的MSC经股静脉植入Wistar大鼠,用荧光显微镜观察术后12h、24hMSC在移植肝的迁徙及定居情况;采用苏木素-伊红(HE)染色观察移植肝组织的损伤情况。结果 DAPI标记MSC的标记率达100%,标记后MSC生长和增殖特性未受影响。MSC经股静脉注入后,12h即出现在移植肝,24h分布于移植肝血管及周围组织。显微镜下观察,空白对照组术后24h的肝小叶中央静脉和肝血窦淤血明显,肝细胞可见严重空泡状变性,坏死灶较多,肝组织中有较多中性粒细胞的聚集、浸润;MSC组肝小叶、中央静脉、汇管区结构清晰,炎症细胞浸润较轻。结论 MSC可以迁徙并定居于大鼠异种移植肝中,对移植肝组织损伤有修复作用。

肝移植受体直接照顾者生活质量调查分析

目的探讨肝移植受体直接照顾者的生活质量及影响因素。方法对肝移植受体直接照顾者46例进行一般情况和SF-36量表调查,采用Spearm an相关分析和多元回归分析影响因素。结果(1)与正常人群相比,在小于40岁的照顾者中,男性情感职能得分高于正常人群(P<0.05),其余纬度无统计学意义;女性情感职能得分高于正常人群(P<0.05),生理职能与精神状态得分低于正常人群(P<0.05),其余纬度无统计学意义;在大于40岁的照顾者中,男性生理职能、情感职能、社会功能、精神状态及健康总评价得分均低于正常人群(P<0.05);女性生理职能、情感职能、社会功能、精神状态及活力的分值均低于正常人群(P<0.01),其余纬度无统计学意义。(2)影响照顾者生活质量的因素:年龄、文化程度、经济状况、受体有无并发症、受体术后时间、医疗费用支付方式。结论肝移植受体直接照顾者当中,大年龄组较正常人群生活质量明显下降,而小年龄组较正常人群虽有所下降,但却能采取积极的应对方式,改善不良情绪对生活质量的影响;通过分析,发现影响这些照顾者生活质量的因素是多方面的;提示在临床工作当中,关注这部分特殊人群,有必要采取有效的干预措施,提高其生活质量。

胸腺素β4通过激活AKT-Bad信号通路减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤

目的 :探讨胸腺素β4(thymosinβ4,Tβ4)预处理对小鼠肝脏缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤的作用及其可能的机制。方法:100只雄性ICR小鼠随机分为4组:空白对照(Sham)组;70%肝脏缺血再灌注组;生理盐水(Saline)组;Tβ4组。肝脏缺血再灌注后1、3、6、12、24 h收集血清检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。上述时间点收集的肝脏组织分为两部分:一部分甲醛固定后进行HE染色观察肝脏组织病理学变化;另一部分保存于液氮中进行Westernblot与PCR实验。Tβ4、AKT、p-AKT、Bad、p-Bad的表达水平用Western blot进行检测;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白介素-6(IL-6)的mRNA水平用PCR进行检测。结果:与正常肝组织相比,Tβ4表达水平在缺血再灌注后1、3 h降低,从6 h开始恢复至正常水平;再灌注后Tβ4组ALT、AST水平明显低于70%缺血再灌注组与生理盐水组(P<0.05),同时Tβ4组的肝脏组织病理学变化明显改善,TNF-α与IL-6的表达水平也受到抑制;Tβ4组p-AKT与p-Bad的表达水平在缺血再灌注后1、3、6 h升高,从12 h开始各组间无差异。结论:胸腺素β4可以通过直接激活AKT-Bad信号通路和抑制炎症因子的表达减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤。

肝移植术后感染菌群分布及耐药分析

目的:了解肝移植术后感染的病原菌分布及耐药性特点。方法:对2006～2007年医院肝移植患者术后送检的各类标本中分离出的118株病原菌的分布及耐药性进行回顾性分析。结果:57例肝移植患者术后感染的发生率为66.7%,病原菌分离部位主要以痰液、血液、胆汁、尿液为主,占78.0%。最常见病原菌分别为铜绿假单胞菌(25.4%)、表皮葡萄球菌(18.6%)、肺炎克雷伯菌(11.0%)、不动杆菌属(9.3%)、白假丝酵母菌(9.3%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率分别为50.0%和38.5%,表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌中的耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检出率均为50%。细菌耐药性均较高,而且呈现多重耐药现象。结论:感染是肝移植术后的主要并发症之一,应加强耐药监测,及早进行预防和治疗。