白介素10对脑缺血大鼠神经细胞凋亡的作用研究

目的:探讨白介素10(IL-10)对大鼠脑缺血梗死灶周围神经细胞凋亡的作用。方法:成年雄性Sprague-Darley大鼠36只,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)和脑缺血+IL-10干预组(IL-10组),术后24h断头取脑,TUNEL法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotinylated UTP nick end labeling)测定梗死灶周围凋亡神经细胞的数目,免疫组化和RT-PCR法检测促凋亡基因Fas、FasL和caspase-3的表达。结果:脑缺血诱导神经细胞凋亡显著增多(P<0.05),Fas,FasL和caspase-3表达显著上调(P<0.05);IL-10干预可显著减少脑缺血神经细胞凋亡(P<0.05),并抑制FasL和caspase-3的表达(P<0.05),而对Fas的表达无明显作用(P>0.05)。结论:IL-10可抑制大鼠脑缺血梗死灶周围神经细胞凋亡,其机制可能与抑制促凋亡基因FasL和caspase-3的表达有关。

骨髓间充质干细胞移植对脑梗塞大鼠神经功能恢复及突触素表达的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对脑缺血大鼠神经功能恢复和脑组织中突触素(synaptophysin)mRNA表达的影响。方法:72只清洁级成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(vehicle组)和BMSC治疗组(BMSC组),每组18只,采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,BMSC移植前用DAPI标记,BMSC组于造模成功1 d后经侧脑室注射入BMSC(1×106),vehicle组则注射同等剂量的PBS,术后4 d、7 d和14 d通过平衡木行走、转棒上行走及网屏抓握进行神经功能评估,观察其恢复状况,并断头取脑,免疫组织化学及RT-PCR法检测突触素表达情况。结果:BMSC组缺血周边区脑组织中观察到DAPI染色的阳性细胞。BMSC组术后7 d和14 d神经功能评估明显优于MCAO组和vehicle组(P<0.05 orP<0.01);BMSC组术后4 d、7 d和14 d脑组织中突触素表达较MCAO组和vehicle组明显增高(P<0.01)。结论:BMSC移植可以促进脑缺血大鼠神经功能的恢复,促进缺血脑组织中突触素生成,BMSC移植促进脑缺血大鼠神经功能恢复部分是通过促进脑组织中生成突触素发挥作用。

神经节苷脂对缺血性大鼠脑保护作用的研究

目的探讨神经节苷脂（ＧＭ１）的脑保护作用及其可能机制。方法用四血管闭塞（４ＶＯ）全脑缺血再灌注模型，用高效液相色谱仪柱前衍生色谱法测定假手术组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ生理盐水（ＮＳ）处理组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎＧＭ１处理组的海马组织兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量，并观察缺血３０ｍｉｎ再灌注４ｄ海马ＣＡ１区病理变化。结果缺血再灌注ＮＳ处理组海马组织ＥＡＡ含量显著性降低（Ｐ＜０．０１），海马ＣＡ１区多数神经元坏死，残存神经元呈较严重缺血性改变，ＧＭ１处理组上述生化病理改变明显为轻。结论推测ＧＭ１可调控缺血再灌注早期ＥＡＡ的过度释放和（或）重摄取受阻，减轻其在细胞外堆聚引起的兴奋毒性损伤，具有脑保护作用。

神经元GAD和GABA-T的活性与癫痫发病的关系

目的 研究探索神经元内谷氨酸脱羧酶 ( GAD)和 γ-氨基丁酸转氨酶 ( GABA-T)的活性与癫痫发病的关系。方法 用致痫剂马桑内酯 ( CL)和抗痫剂苯妥因钠 ( PHT)处理大鼠培养海马神经元 ,用液体闪烁计数仪、紫外分光光度计检测培养神经元内 GAD和 GABA-T的活性。结果 与对照组比较 ,CL致痫组培养神经元内GAD活性和 GABA-T的活性显著增高 ;运用抗痫剂 PHT处理致痫神经元后 ,与 CL致痫组比较 ,神经元内GABA-T活性显著降低 ;与对照组比较差异不显著。结论 在癫痫发病中 ,痫性神经元 GAD和 GABA-T活性增高。

植物神经系统疾病红外线热图研究

本文采用日本产６Ｔ６１型红外线热象仪对３２例植物神经系统疾病的红外热象图及其温度进行了测定，发现雷诺病与雷诺现象和肢端麻木症的肢端皮肤较正常组皮肤温度明显下降（Ｐ＜０．０１），其红外线热图象呈黑色或深兰色，而红斑性肢痛症则相反，其肢端皮肤温度较正常明显升高（Ｐ＜０．０１），其红外线热图呈灰白或红色，根据肢端皮肤温度下降抑或升高，从而为植物神经系统疾病的诊断和防治提供一种新的客观指标。

中枢性坐骨神经痛(附2例报告)

中槛性坐骨神经痛十分罕见．多为大脑镰旁或旁中央小叶区病变所致，临床上常常误诊。我们所见2例报告如下。

脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后微血管生成及bFGF和VEGF表达的影响

目的:探讨脂肪来源的干细胞(ADSC)移植对大鼠脑缺血后微血管生成的可能机制。方法:72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组),每组18只,采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ADSC移植前用DAPI标记,ADSC组于造模成功1d后经侧脑室注射入30μL的经DAPI标记的ADSC细胞悬液,内含1×106细胞,vehicle组则注射同等剂量的PBS,术后4d、7d和14d分批处死实验动物,并断头取脑,采用免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测缺血区脑组织的新生血管及bFGF和VEGF表达的动态变化。结果:大鼠脑缺血后缺血区即可见大量的微血管生成,2周达高峰。ADSC组较MCAO组和vehicle组缺血区微血管密度明显增高(P<0.01);ADSC组术后4d、7d和14d脑组织中bFGF和VEGF的表达水平较MCAO组和vehicle组明显增高。结论:ADSC移植促进脑缺血大鼠缺血区微血管的生成,其机制可能与促进bFGF和VEGF的表达有关。

p25/cdk5可能参与人参皂苷Rb1减轻Aβ_(25-35)诱导的tau蛋白过度磷酸化

目的探讨在Aβ25-35诱导的皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中,人参皂苷Rb1对周期依赖性蛋白激酶(cyc lin-de-pendent k inase 5,CDK 5)的激动亚基p35/p25的影响。方法通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测胎鼠皮层神经元CDK 5的两个亚基cdk5和p35/p25的蛋白水平,以及CDK 5的磷酸化底物tau蛋白在Ser199/202、Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平。结果凝聚态Aβ25-35(20μmol.L-1)作用于皮层神经元12 h,可使皮层神经元中p25的数量增多,以及tau蛋白在Ser199/202、Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平增高,但对cdk 5亚基表达水平影响并不明显。Rb1和calpain特异性抑制剂calpeptin可减少皮层神经元p25的生成,同时人参皂苷Rb 1和CDK 5特异性抑制剂roscovitine可减轻凝聚态Aβ25-35诱导的皮层神经元tau蛋白的过度磷酸化水平。结论p25/cdk 5可能参与人参皂苷Rb1减轻Aβ25-35诱导的tau蛋白过度磷酸化。

人参皂苷Rg1对寡聚肽Aβ_(1-42)增加JNK活性及诱导凋亡的影响

目的：在寡聚肽Aβ1-42诱导的神经元凋亡过程中,探讨人参皂苷Rg1的保护作用和可能机制；方法运用寡聚肽Aβ1-42来诱导原代培养的皮层神经元损害,把神经元分为空白对照组、Aβ组、sp600125与Aβ共同孵育组以及人参皂苷Rg1与 Aβ共同孵育组,然后观察 JNK、p-JNK、caspase-3活性和TUNEL细胞数的变化。结果寡聚肽 Aβ1-42作用15 min,皮层神经元的JNK磷酸化水平明显增加；经过预先孵育24 h人参皂苷Rg1（2．5～10μmol·L^-1）后,再与寡聚肽Aβ1-42共同孵育15 min,JNK磷酸化水平明显降低；寡聚肽Aβ1-42孵育24 h,caspase-3活性和TUNEL数明显升高；人参皂苷Rg1（10μmol·L^-1）预处理24 h后,再与Aβ1-42共孵育24 h组中caspase-3和TUNEL阳性数目明显下降。结论人参皂苷Rg1可通过JNK通路减轻寡聚肽Aβ1-42诱导的神经元凋亡。

脂肪来源的干细胞移植对脑缺血大鼠脑组织IL-10及TNF-α表达的影响

目的:观察脂肪来源的干细胞(ADSC)移植对脑缺血大鼠脑组织IL-10及TNF含量变化,探讨ADSC对脑缺血损伤的保护机制。方法:将72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(Vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组)四组,每组18只,采用线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ADSC移植前用DAPI标记,ADSC组于造模成功1 d后经侧脑室注射入30μL的经DAPI标记的ADSC细胞悬液,内含1×106细胞,Vehicle组则注射同等剂量的PBS,各组分别于术后4 d、7 d和14 d分批处死后取出脑脑织,采用ELISA法、免疫组织化学法和半定量RT-PCR法,检测大鼠脑组织中IL-10和TNF-α表达的变化。结果:与假手术组相比较,MCAO组大鼠4 d和7 d时脑组织中TNF-α和IL-10的表达明显上调(P<0.05)。MCAO组与vehicle组各相应时间点IL-10和TNF-α表达均无统计学差异(P>0.05)。与vehicle组相比,ADSC组4 d、7 d和14 d时脑组织中IL-10的表达显著上调,TNF-α的表达明显下调(P<0.05)。结论:ADSC移植可上调脑缺血大鼠IL-10的表达,并下调TNF-α的表达,这可能是ADSC具有脑缺血保护作用的机制之一。

白介素10对大鼠缺血梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax表达的作用研究

目的探讨白介素10对大鼠脑缺血梗死灶周围Bcl-2和Bax表达的作用。方法48只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血组(MCAO组)、脑缺血+溶剂对照组(Vehicle组)和脑缺血+IL-10干预组(IL-10组),免疫组化和RT-PCR法观察术后24h梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax表达水平的变化。结果与Sham相比,MCAO组梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax的表达显著上调,Bcl-2/Bax比值显著下降;与Vehicle组比,IL-10组Bcl-2的表达显著上调,Bax表达显著下调,Bcl-2/Bax比值显著增加。结论IL-10与脑缺血梗死灶周围Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax比值增加有关,提示IL-10可能与抑制梗死灶周围脑组织神经细胞凋亡有关。

糖尿病与高血压病的脑血流动力学对照研究——经颅多普勒超声研究报告

为了观察糖尿病和高血压病对脑血流动力学的影响 ,我们采用经颅多普勒检测了糖尿病、高血压病以及糖尿病 +高血压三组患者脑底动脉的血流速度。结果为糖尿病组 ( n=4 8)的血流异常率为4 1.7% ,高血压病组 ( n=160 )的异常率为 30 % ,而糖尿病 +高血压病组 ( n=35)的异常率则高达 82 .9% ,明显高于前两组 ( P<0 .0 0 5)。各组患者都以 MCA的血流异常最为突出 ,其次为 ACA、CS、BA、VA和PCA,而糖尿病 +高血压病组的 CS损害亦较为突出。认为高血压病的脑血管损害随病情进展而增加 ;糖尿病的脑血管损害较高血压病多见 ,而这两类疾病一旦同时存在 。

人体平衡功能定量测评

建立国产平衡仪的正常值范围，探讨各指标的敏感性及可靠性，运用国产人体平衡仪对202例相对正常人群及某些疾病患者进行测评，并分组进行比较。结果：该仪器大部分指标与年龄相关，但并非线性关系，动摇径、动摇轨迹、包络面积、单位面积轨迹长、动摇角度及能耗等指标在正常与疾病组间有差异。提示人体平衡功能与年龄相关，该平衡仪有助于客观和定量地评价人体平衡功能。

脑缺血再灌流后bFGF基因的表达及MK-801的影响

目的 研究脑缺血再灌流后 b FGF基因表达的意义及其机制。方法 采用原位杂交和免疫组化的方法 ,观察大鼠脑缺血再灌流后 b FGF基因的表达及 MK- 80 1对它们的影响。结果 缺血 2 h再灌流 1h可见 b FGF表达增高 (P<0 .0 5 ) ,b FGF m RNA表达于 12 h达高峰 ,b FGF蛋白于 2 4h达高峰 ;MK- 80 1组与缺血组相比 ,于再灌流 6 h～ 48h b FGF表达减弱 (P<0 .0 5 )。结论 局灶性脑缺血再灌流可诱导 b FGF表达 ,MK- 80 1则能抑制脑缺血后 b FGF的表达。

国产电脑型人体平衡功能仪信度与效度检验

采用国产电脑型人体平衡功能仪对12名健康志愿者的不同站立姿势多次重复检测以评价该仪器的信度及效度。结果：除功率谱（pow1，pow2，pow3）外，大部分指标皆有较好的重测信度，反映姿势稳定性的指标（dx．dy．lug，lngx，lngydeg,ent）皆有较高的辨别效度。提示：该平衡议能检测站立稳定性，对平衡功能的测评有帮助。

GM_1对帕金森病治疗作用的实验研究

研究单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1 )对帕金森病 (PD)的治疗作用。运用选择性偏侧 (右侧 ) PD大鼠模型 ,观测正常对照组、 PD组 (造模后 14d)、 PD生理盐水 (NS)治疗组和 GM1 治疗组 (10 mg/ kg IP qd、连续 14d) ,阿朴吗啡 (APO)诱发的旋转行为改变和纹状体线粒体钙 (MCa)、钙调素 (Ca M)含量改变。PD组表现明显的 APO诱发的旋转行为 (≥ 6 r/ m in) ,黑质损伤侧 (右侧 )纹状体 MCa、Ca M含量与正常对照组比较显著性升高 (P<0 .0 1) ;GM1 治疗组 APO诱发的旋转行为明显好转 ,黑质损伤侧纹状体 MCa、 Ca M含量与 PD组比较无显著差异性 (P>0 .0 5 )。GM1 能改善实验性 PD的部分行为、生化改变 ,对

SH-SY5Y细胞高表达糖原合成激酶3β对tau蛋白磷酸化和微管稳定性的影响

目的:构建高表达糖原合成激酶3β(GSK3β)的SH-SY5Y(人骨髓神经母细胞瘤细胞)转基因细胞模型,观察GSK3β高表达对宿主细胞tau蛋白磷酸化、微管稳定性的影响。方法:构建GSK3β真核表达质粒,转染SH-SY5Y细胞,使GSK3β在SH-SY5Y细胞中得到高表达,应用蛋白免疫印迹方法,观察tau蛋白磷酸化、总tau蛋白、微管蛋白乙酰化水平的变化情况。结果:GSK3β真核表达质粒转染SH-SY5Y细胞36h后,GSK3β在SH-SY5Y细胞中的表达达到高峰,tau蛋白Ser199/202、Thr231、Thr205等位点的磷酸化水平在转染后48h达到高峰;tau蛋白总量未有明显变化。转染后60h,微管蛋白乙酰化水平明显减低。结论:高表达GSK3β的SH-SY5Y细胞可使tau蛋白的磷酸化水平增高,从而降低tau蛋白结合和稳定微管蛋白的能力,导致微管蛋白乙酰化水平明显减低。

镁缺乏与锥体外系疾病

测定了５９例锥体外系疾病患者的血浆和红细胞内镁的含量，并与健康人对照。结果表明：各病例组血浆镁明显低于正常对照组（Ｐ＜０．００１）；红细胞内镁也较正常对照组低，其中以帕金森综合征组最显著（Ｐ＜０．００１）。硫酸镁治疗１４例。均有一定疗效。笔者认为，锥体外系疾病与镁缺乏有关，补镁可作为锥体外系疾病的一种治疗措施。

糖尿病患者脑血流动力学观察——经颅多普勒超声研究

应用经颅多普勒超声(TCD)检查对3组不同病程糖尿病患者的脑动脉血流速度进行了观察.每组均有部分患者出现脑血流速度异常,病程6～10年和11～15年组的糖尿病患者,其异常率显著高于病程5年以内者,而前两组之间则无显著差异.血流速度异常绝大多数表现为血流增快,常为局限性或节段性,且常伴有血管杂音及紊流,提示为动脉狭窄所致.受检的6条动脉中以大脑中动脉的损害最为常见和突出;而在反映此类患者的血流变化时,收缩期峰值血流速度似乎更敏感.观察结果表明,糖尿病性脑血管损害的发生比通常认为的更早.

大鼠脑缺血再灌流后HSP70的表达和bFGF对其影响

目的 研究脑缺血再灌流后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的意义及外源性碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对其影响。方法 应用免疫组化的方法观察大鼠局灶性脑缺血再灌流后脑组织 HSP70的表达以及在侧脑室注射外源性 b FGF对其影响。结果 缺血 2小时再灌流 0小时即可见 HSP70表达 ,至 2 4小时达高峰。 b FGF组与生理盐水组相比于 6～ 48小时各组可见 HSP70表达增高 (P<0 .0 5 )。结论 脑缺血诱导HSP70的表达 ,外源性 b FGF能增加 HSP70的表达。