Sonic hedgehog信号通路与食管癌放射抗拒的相关性研究

目的:研究Sonic hedgehog(Shh)信号通路在食管癌放射抗拒中的作用及机制。方法:以人食管癌细胞Eca109为亲本株,通过X射线反复照射(累计照射剂量60 Gy)诱导形成放射抗拒细胞株Eca109R。分别采用集落形成实验检测细胞放射敏感性,CCK-8实验检测细胞活力的变化,来证实放射抗拒细胞株Eca109R的放射抗拒性。免疫荧光及Western blot检测Eca109R和亲本细胞Eca109内Gli1蛋白与Shh蛋白的表达。结果:集落形成实验显示2 Gy的X线照射后,Eca109和Eca109R细胞的存活分数(SF_2)分别为0.499±0.042和0.937±0.013;同时,CCK-8实验显示,Eca109R细胞的活力抑制率明显低于Eca109细胞(P<0.05),证实Eca109R细胞有明显的放射抗拒性,诱导形成放射抗拒株成功。免疫荧光结果显示Eca109R细胞中Gli1表达明显高于Eca109细胞(P<0.05)。Western blot实验结果显示Eca109R细胞中的Gli1与Shh蛋白表达明显高于Eca109细胞(P<0.05)。结论:食管癌放射抗拒性的产生可能与Shh信号通路相关蛋白的过表达有关。

胃癌中钙黏附分子启动子甲基化与幽门螺旋杆菌感染的相关性研究

目的:探讨胃癌中钙黏附分子启动子甲基化与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的相关性,为临床诊断治疗提供依据。方法:纳入86例胃癌患者,获取肿瘤组织,与正常黏膜组织对照,采用甲基化特异性聚合酶链反应法检测胃癌中CDH1基因启动子甲基化。两组患者一般资料比较无显著性差异,具有可比性(P>0.05)。结果:胃癌组患者CDH1基因甲基化阳性61例,阳性率为70.9%。对照组患者CDH1基因甲基化阳性11例,阳性率12.8%,两组比较具有显著性差异(P<0.01)。胃癌组CDH1基因甲基化阳性率与肿瘤分化程度、幽门螺旋杆菌感染密切相关,而与性别、浸润程度相关性小。结论:钙黏附分子基因启动子甲基化与胃癌发生密切相关。胃癌中钙黏附分子启动子甲基化与Hp感染密切相关,由此可见,Hp感染可能参与了抑癌基因甲基化失活及肿瘤演变的发展过程。

鄂西北及周边地区汉族人群D2S1338和D19S433基因座多态性分析与调查

目的采集鄂西北及周边地区汉族人群无关个体血样,进行STR等位基因座D2S1338和D19S433多态性分析。方法应用chelex提取DNA,AmpFISTR Identifiler试剂盒扩增,毛细管电泳分型。结果在被检测的387位无关个体中等位基因座D2S1338和D19S433分别检出14和17个等位基因型以及两个等位基因的分布频率,基因座等位基因分布频率符合Hardy-Weinberg平衡。结论得到一些适合本地区应用的等位基因的频率,为以后司法物证鉴定工作提供参考。

大鼠I型肌醇三磷酸受体多种突变体的载体构建

目的构建大鼠I型肌醇三磷酸受体（IP3R1）多种突变体真核表达载体。方法以pcDNA3．0-IP3R1 WT为模板，利用重组融合的方法定点突变构建3个突变体，根据点突变的位置分别命名NG2586A、12588V、R2596A。结果构建的3个突变体，经PCR、酶切、测序，3个位点的突变完全达到预期设计。结论成功构建3个突变体，为进一步研究IP3R1对大鼠平滑肌细胞中胞浆内Ca2＋浓度的调控作用奠定基础。

HBV临床分离株复制型质粒的构建与鉴定

目的克隆HBV临床分离株全长基因组,构建真核表达复制载体,为研究HBV的耐药机制提供基础。方法从乙型肝炎患者血清中提取HBV DNA,PCR扩增HBV全长基因组,经SapI酶切后,克隆入pHY106载体,测序分析序列,然后用lipofectamine 2000将重组载体转染Huh7细胞,3 d后收集培养上清液,ELISA检测HBsAg、HBeAg水平;Real-time PCR检测细胞培养上清液中HBV含量;Southern印迹检测细胞内HBV复制中间体。结果获得5株HBV临床分离株均为野生型,其中基因B型3株,基因C型2株。成功构建5株HBV临床分离株的复制型质粒,在转染Huh7细胞的上清液中检测到HBsAg、HBeAg及HBV DNA,细胞内检测到HBV复制中间体。结论成功克隆并构建了HBV临床分离株复制型质粒,这种复制型质粒将在HBV临床分离株的耐药机制和药物敏感性等方面研究中发挥重要作用。

音乐干预在脑健康管理中的作用概述

人们对音乐干预在医疗保健方面健康效应的研究兴趣正迅速升温。文章综述目前已开展的动物模型实验及人群干预研究证据,揭示音乐干预对脑健康管理的病理生理学机制,并提出建议:需要开展进一步研究来探讨和优化音乐干预对不同脑损伤患者的健康干预效果。

胡蜂蜇伤致病及其机制研究进展

胡蜂,又称为＂蚂蜂＂或＂黄蜂＂,是我国蜂类中毒性最强的蜂之一,在我国大概有200余种。由于胡蜂的蜇针无倒钩,可以反复蜇人,且胡蜂比蜜蜂更具有攻击性,一次性被胡蜂蜇伤20-200次即可导致急性肾衰竭甚至死亡,而蜜蜂通常需要150-1 000次[1],因此,

IRGM基因多态性与尘肺易感性研究

目的探讨免疫相关鸟苷三磷酸酶M(IRGM)基因多态性与尘肺易感性的关系。方法采用病例–对照的研究方法,选择248例尘肺患者为病例组,275例年龄相近、同性别、同民族、同工种且工龄相近的非尘肺接尘工人为对照组。采用Sanger测序法检测病例组和对照组中IRGM基因三个单核苷酸多态性(SNP)位点的基因型和等位基因。应用SNPstats软件分析单个SNP和尘肺的相关性,应用在线软件SHEsis进行各个位点的连锁不平衡分析和单体型分析。结果IRGM基因rs4958846位点的TT基因型在病例组的分布频率高于对照组,TC与CC基因型在对照组中的分布频率高于病例组,等位基因T在病例组的分布频率高于对照组,等位基因C在对照组的分布频率高于病例组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。IRGM基因rs4958842、rs4958843位点的基因型和等位基因在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。经连锁不平衡检验,IRGM的rs4958842、rs4958843、rs4958846三个基因两两位点之间均存在连锁不平衡(D’>0.7,r2>0.3)。对三个基因位点进行单体型分析,共构建4种单体型,其中ACT和ACC单体型在病例组和对照组中的频率分布差异具有统计学意义(P<0.05),所构建的其他单体型与尘肺的易感性无显著关联(P>0.05)。结论IRGM基因rs4958846位点的T等位基因和ACT单体型可能与尘肺的易感性有关。

胡蜂蜇伤所致MODS与细胞因子的相关性研究

收集30例胡蜂蜇伤患者和10例健康人血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素-33(IL-33)的水平。与对照组比较,胡蜂蜇伤组血清IL-6、IL-8、IL-33水平均升高(P<0.05);与胡蜂蜇伤非多器官功能障碍综合征(MODS)组比较,MODS组血清IL-6、IL-8水平升高(P<0.05);MODS评分与血清IL-6、IL-8水平呈正相关(P<0.05)。提示IL-6、IL-8可能协同参与胡蜂蜇伤并发MODS的过程,早期检测患者血清IL-6、IL-8水平,对于预测MODS的发生具有一定价值。

尿液结合珠蛋白水平及其基因型对早期糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨尿液结合珠蛋白(u Hp)水平及其基因型与早期糖尿病肾病(DKD)的关系。方法纳入单纯2型糖尿病(T2DM)患者(UAER <30 mg/24 h) 29例(单纯T2DM组),随机选取同期就诊的DKD患者,并按照尿白蛋白排泄率(UAER)将其分为早期DKD组(30 mg/24 h≤UAER <300 mg/24 h,33例)和临床DKD组(UAER≥300 mg/24 h,28例)。再随机选取同期体检的30例健康体检者为健康对照组。比较4组受试者的一般资料(性别、年龄、体重、吸烟史、病程、收缩压)、实验室检查结果[血尿素(Urea)、血肌酐(SCr)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、尿β2微球蛋白(β2-MG)、UAER、肾小球滤过率(GFR)]及Hp基因型。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析u Hp、UAER、尿液β2-MG水平对早期DKD的诊断价值。结果健康对照组、单纯糖尿病组、DKD组及临床DKD组患者u Hp水平依次升高,各组间比较差异均有统计学意义(P <0.05)。共检测出Hp1-1、Hp1-2、Hp2-23种基因型,3种基因型在4组受试者中的频率分布比较差异无统计学意义(P=0.525)。ROC曲线分析结果显示,u Hp的ROC曲线下面积(AUC)明显大于UAER及尿液β2-MG(P <0.001)。结论 u Hp水平随DKD病情进展而升高,对T2DM患者肾功能进展的预测价值高于尿液UAER,但未发现Hp基因型与DKD之间存在显著关联。