MIF、TLR4、TNF-α水平在糖尿病肾病患者中的变化及其临床意义

目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平在糖尿病肾病患者中的变化及其临床意义。方法选取2012年5月—2015年4月湖北省十堰市太和医院肾内科收治糖尿病肾病患者77例。按照尿微量白蛋白和肌酐的比值(尿A/C)分为2组,尿A/C≤300 mg/g为A组42例,尿A/C>300 mg/g为B组35例;另外选择同期进行健康体检者38例为C组。比较3组的临床与生化资料及MIF、TLR4、TNF-α水平,分析MIF、TLR4、TNF-α与糖尿病肾病患者有关临床指标之间的关系。结果 A组患者体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹血糖(FPG)分别为(26.78±3.46)kg/m^2、(137.43±10.11)mmHg、(8.81±0.87)%、(8.85±1.87)mmol/L,B组患者分别为(27.15±3.53)kg/m^2、(140.24±11.25)mmHg、(9.02±0.94)%、(8.94±1.91)mmol/L,明显高于C组的(23.43±3.01)kg/m^2、(122.04±9.55)mrnHg、(5.24±0.32)%、(5.18±0.53)mmol/L,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于C组,差异具有统计学意义(P<0.01);B组患者的舒张压(DBP)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平分别为(81.43±10.22)mmHg、(3.53±0.98)mmol/L、(5.83±0.99)mmol/L、(122.45±15.32)μmol/L、(7.88±2.01)mmol/L高于A组(P<0.01)。A组MIF、TLR4、TNF-仪分别为(143.21±12.32)ng/ml、(5.72±0.87)pg/ml、(26.98±5.33)pg/ml,B组分别为(147.44±13.45)ng/ml、(6.14±0.92)pg/ml、(28.14±6.21)pg/ml,均明显高于C组(113.53±10.43)pg/ml、(1.97±0.51)pg/ml、(18.45±4.35)pg/ml,差异具有统计学意义(P<0.01)。MIF与糖尿病肾病患者病程、HbA_(1c)、FPG、TG呈正相关(r=0.435、0.459、0.521、0.254,P<0.05~0.01),与HDL-C呈负相关(-0.231,P<0.05);TLR4与糖尿病肾病患者的SCr、CPR、尿蛋白、尿A/C呈正相关(r=0.873、0.901、0.957、0.676,P<0.01);血清TNF-α与糖尿病肾病患者病程及尿A/C呈正相关(r=0.197,P<0.05;r=0.254,P<0.01)。结论 MIF、TLR4、TNF-α在糖尿病肾病患者中存在高表达,可反映糖尿病肾病的损伤程度。

来氟米特活性代谢产物对白蛋白诱导肾小管上皮细胞内NF-κB活性及TNF-α mRNA表达的影响

目的探讨来氟米特的活性代谢产物对白蛋白诱导肾小管上皮细胞内NF-κB活性及TNF-αmRNA表达的影响。方法培养的肾小管上皮细胞为空白对照;对照组加去脂的小牛血清白蛋白(BSA)30mg·mL-1共同培养;干预组先加不同浓度来氟米特的活性代谢产物(A771726)或同一浓度不同时限,0.5h后再加入BSA30mg·mL-1,EMSA法及RT-PCR检测各组NF-κB活性及TNF-αmRNA表达的变化。结果A771726在不同浓度及时限均可抑制白蛋白诱导的肾小管上皮细胞内NF-κB活性及TNF-αmRNA表达,呈剂量与时限依赖性。结论来氟米特活性代谢产物可抑制白蛋白诱导的肾小管上皮细胞内NF-κB的活性及TNF-αmRNA的表达。

尿白蛋白诱导肾小管上皮细胞损伤的作用机制研究

目的 :研究尿白蛋白诱导肾小管上皮细胞损伤的机制。方法 :用去脂的小牛血清白蛋白 (BSA) 2 0mg/mL加入肾小管上皮细胞内 ,EMSA、RT PCR及流式细胞仪分别检测不同时限核转录因子 κB(NF κB)活性、骨桥蛋白mRNA表达及细胞凋亡的情况。体外培养的肾小管上皮细胞作为空白对照。结果 :去脂的小牛血清白蛋白可刺激肾小管上皮细胞内NF κB活性增加 ,骨桥蛋白mRNA表达上调 ,细胞凋亡率增加。结论 :尿白蛋白诱导小管上皮细胞损伤与诱导肾小管上皮细胞内NF κB活性增加 ,导致骨桥蛋白mRNA转录上调及细胞凋亡有关。

2001-2004年十堰地区尿路感染病原菌调查及耐药性分析

目的:调查本地区近3年来尿路感染致病菌分布情况,同时监测其耐药性,为临床用药提供参考。方法:用纸片扩散法进行抗生素敏感试验,双纸片协同筛选试验和纸片扩散法表型确证试验检测超广谱β内酰胺酶(ESBLs)。结果:尿培养阳性的399份尿标本中,分离出革兰阴性杆菌241株,占60.40%,革兰阳性球菌158株,占39.60%,致病菌所占比例为:大肠埃希菌45.61%、葡萄球菌17.04%、粪肠球菌10.78%、链球菌9.27%、克雷伯菌5.76%、变形杆菌2.76%、屎肠球菌2.51%、铜绿假单孢菌1.75%、不动杆菌1.25%、棒状杆菌0.75%、沙雷氏菌0.50%、阴沟肠杆菌0.50%、其他1.50%。产ESBLs菌73株,占革兰阴性杆菌尿路感染30.29%。革兰阴性杆菌对氨苄青霉素、环丙沙星、磺胺、庆大霉素的耐药率分别为86.84%、55.90%、70.61%、45.85%。革兰阳性球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、环丙沙星、磺胺的耐药率为50.35%～88.46%。结论:本地区尿路感染的主要致病菌仍以革兰阴性杆菌为主,但革兰阳性球菌的比例明显升高,产ESBLs菌株的流行情况相当严重。细菌对临床常用抗生素的耐药率较高。

连续血液净化治疗在妊娠合并急性肾衰竭中的应用观察

目的观察连续性血液净化治疗在妊娠合并急性肾衰竭的应用。方法18例妊娠合并急性肾衰竭的患者行连续性血液净化治疗,用前稀释连续静-静脉血液透析滤过(CVVHDF)治疗,观察治疗前后血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、电解质、血pH值、血常规、C反应蛋白(CRP)、APACHE Ⅱ评分,用放射免疫法测定治疗前、12h、24h、治疗后血液及废液中白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果18例患者中,16例痊愈,1例死亡,1例转为慢性肾衰竭。治疗后血BUN、Cr较治疗前明显下降(P<0.05);血电解质、血白细胞数及血pH值正常;CRP、APACHEⅡ评分、IL-6、TNF-α水平较治疗前下降,有显著差异(P<0.05)。结论妊娠合并急性肾衰竭早期行连续性血液净化治疗疗效好,其机制明显降低IL-6、TNF-α水平,降低炎症反应,使抗炎因子和促炎因子趋于动态平衡。

肾脏淀粉样变性的临床病理分析

目的：探讨肾脏淀粉样变性病（amyloidosis,AL）的临床病理特点、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析9例肾脏淀粉样变性病患者的临床表现,并对其肾活检组织进行光镜、特殊染色、免疫荧光、免疫组化及超微结构观察。同时对患者进行随访获取预后信息。结果9例肾脏淀粉样变性病患者的临床上主要表现为肾病综合征伴进行性肾功能不全并逐渐恶化。肾活检组织光镜观察,早期淀粉样变光镜表现轻微,可有系膜轻度增生或基底膜空泡变性及轻度增厚,PASM染色可见节段性睫毛状结构；后期,肾小球系膜区明显增宽、基底膜增厚,毛细血管腔闭塞,呈无细胞结节硬化状态。免疫荧光表现不一,部分病例全部阴性,部分表现免疫球蛋白及补体沿系膜区或毛细血管壁不同程度的沉积。刚果红染色呈砖红色,甲基紫染色呈紫红色。免疫组化显示,5例来源于轻链λ,1例来源于轻链κ,全阴性者有3例。电镜观察下,肾小球毛细血管基底膜部分节段无明显病变,部分节段不规则增厚,肾小球基底膜外侧和（或）内皮下可见淀粉样纤维沉积；系膜轻、中度无细胞性增生,其内可见不规则排列淀粉样纤维沉积,直径8~10 nm,无分支,僵硬,排列紊乱。足突大部分融合,肾间质纤维化,其内亦可见淀粉样纤维沉积。结论肾脏淀粉样变性多见于中老年,根据光镜的典型病理学改变,并结合刚果红和甲基紫染色,可明确诊断。电镜检查是早期诊断肾淀粉样变的重要手段。

非糖尿病肾病血液透析患者动静脉内瘘流量对心功能的影响研究

目的探讨非糖尿病肾病血液透析患者动静脉内瘘血流量对心功能的影响。方法以在本院就诊的186例采用动静脉内瘘行血液透析的非糖尿病肾病患者为研究对象，观察分析其动静脉内瘘血流量、心输出量及心功能情况。结果经不同模型间比较，血流量与心输出量的关系采用三阶多项式进行拟合可取得最优效果。按照＜0.90 L/min，0.90-2.20 L/min，＞2.20 L/min将血流量分为三组，三组间心输出量、心肺再循环比值的差异均具有显著性（P＜0.01）。血流量＞2.20 L/min的患者有较高的心力衰竭比例，与其他两组相比差异也具有显著性（P＜0.01）。结论长期、高流量的动静脉内瘘可显著影响血液透析患者的心功能，主要表现在心输出量和心肺再循环等方面；动静脉内瘘和心输出量、血流量之间的关系是复杂的，可以采用三阶多项式回归模型初步拟合这种关系；高血流量患者易发生心力衰竭。

糖尿病肾病血透效果影响因素及其防治

目的探讨影响终末期糖尿病肾病血透效果的因素 ,为有效防治提供理论依据。方法选择 4 2例终末期糖尿病肾病 (DN)血透病人和同期 5 0例非糖尿病肾病 (非DN)血透病人 ,分别观察其存活时间、死亡原因、并发症及血生化指标。结果两组 1～ 2年 ,>2年存活时间差异有显著性意义 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;主要死因为心血管病变 ,其次为感染 ;首次透析时肾功能与病死率成正比 ;DN组透析低血压、心血管病变、感染及视网膜病变较非DN组高 ,两组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;两组血透前Glu ,血透期间Alb比较 ,差异有显著性意义 (P<0 .0 5 )。结论早期充分的血透、减少透析时血糖的波动、防治并发症、营养支持是减少终末期血透病死率 ,提高其存活时间及生活质量的有效措施。

肾小球疾病中肾小管损伤的进展

探讨肾小球疾病中肾小管损伤的机制及相关治疗的进展。

DKK3在慢性肾小球肾炎中表达及诱导肾小球足细胞迁移的机制研究

目的研究DKK3在慢性肾小球肾炎中的表达,分析DKK3在慢性肾小球肾炎发生、发展中的意义。方法选取人正常肾组织20例、慢性肾小球肾炎组织80例为研究材料,通过实时定量PCR和免疫蛋白印迹实验验证DKK3在人正常肾组织、慢性肾小球肾炎组织中的相对表达;实时定量PCR分析β-catenin mRNA在人正常肾组织、慢性肾小球肾炎组织中的相对表达,Pearson相关性分析DKK3与β-catenin在慢性肾小球肾炎组织中的表达相关性;选取肾小球足细胞MPC5进行DKK3基因过表达,transwell实验验证实验组和对照组中细胞迁移和侵袭的影响;免疫蛋白印迹实验验证DKK3对细胞迁移和侵袭的影响机制。结果与正常肾组织相比,DKK3在慢性肾小球肾炎组织中表达上调(P<0.01),同时DKK3的表达与β-catenin呈正相关性,并参与慢性肾小球肾炎的进展(P=0.0002,r^2=0.1651);DKK3基因过表达后能明显促进细胞迁移和侵袭(P<0.01);免疫蛋白印迹实验显示DKK3基因过表达后能上调Vimentin、N-cadherin、MMP7、β-catenin蛋白的表达,下调E-cadherin蛋白的表达水平(P<0.01)。结论 DKK3在慢性肾小球肾炎组织中表达上调,可能是重要的调控因子参与慢性肾小球肾炎的进展。

基于WNT/β-catenin信号通路研究DMBT1调控慢性肾小球肾炎发生发展的作用机制

目的研究DMBT1在人慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)中相对表达及甲基化水平,分析DMBT1与WNT/β-catenin信号通路在CGN发生发展中的关联。方法收集30例正常人肾组织(肾癌手术中切除的癌旁正常肾组织)、86例CGN患者肾组织作为研究对象,通过实时定量PCR和免疫蛋白印迹实验验证DMBT1在CGN肾组织中的表达,采用甲基化PCR分析DMBT1在CGN患者中甲基化水平。选取人肾小球足细胞分为两组:DMBT1转染组(进行DMBT1基因过表达)和对照组,采用细胞划痕实验研究两组细胞迁移情况;通过免疫蛋白印迹实验验证DMBT1对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果与正常肾组织相比,DMBT1在CGN患者肾组织中表达下调(P<0.01);甲基化PCR结果显示CGN患者的DMBT1甲基化程度明显增高;DMBT1基因过表达能抑制细胞迁移和侵袭(P<0.01);过表达DMBT1后,WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子明显受到抑制。结论DMBT1在CGN中下调,能作为重要的调控因子参与CGN的发生发展。

Fabry病肾病合并左肾静脉压迫综合征1例

患者男，22岁，主因腰痛、浮肿10个月余入院，以“慢性肾炎”收住院。查体：P80次／min，BP131／79mmHg，咽无充血，颜面部、胸部、脐周、背部、双手掌散在暗红色针尖样皮疹．压之不褪色，双眼睑及双下肢轻度凹陷性水肿，余未见异常。追问病史：患者10岁左右有手指及足趾末端放电样疼痛，

ANGPTL8敲除减轻DEN诱导的小鼠急性肝损伤

目的 探讨血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)在N-二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠急性肝损伤中的作用及机制。方法 选取雄性野生型(WT)和ANGPTL8敲除(ANGPTL8 KO)C57BL/6J小鼠,腹腔注射DEN(50 mg/kg)诱导急性肝损伤模型(15日龄各组32只,8周龄各组14只)。利用PCR和免疫荧光检测肝组织和肝原代细胞中ANGPTL8的表达变化;试剂盒检测血清中ALT、AST含量;HE染色观察肝脏组织病理学变化;流式细胞术和共聚焦显微镜分析肝原代细胞活性氧(ROS)累积差异;ELISA检测血液中炎症因子IL-6、IL-1β含量;TUNEL染色检测肝细胞凋亡水平。结果 DEN诱导3 d显著上调肝脏中ANGPTL8表达;与WT小鼠相比,ANGPTL8 KO可显著下调DEN诱导小鼠血清中ALT和AST、IL-6和IL-1β水平;ANGPTL8KO小鼠肝小叶紊乱程度、炎症细胞浸润、肝细胞淤血、空泡样变和坏死程度较轻;ANGPTL8 KO小鼠显著改善DEN诱导的肝细胞ROS累积和凋亡。结论 DEN上调肝脏中ANGPTL8表达,ANGPTL8进一步促进肝脏急性炎症期ROS累积、炎症因子表达和肝细胞凋亡,从而加剧DEN诱导的急性肝损伤。

调整FUT8表达对食管鳞癌细胞放射敏感性的影响

目的探讨α-1,6岩藻糖基转移酶(FUT8)在食管鳞状细胞癌(ESCC)放射抵抗中的作用。方法利用Oncomine和GEPIA数据库分析FUT8在食管癌中的表达水平,利用String数据库分析FUT8表达相关分子。采用慢病毒转染技术,在亲代ESCC细胞中分别过表达及敲低FUT8的表达。给予6 Gy剂量的X线照射后,克隆形成实验和流式细胞术分析FUT8对细胞放射敏感性的影响。结果Oncomine和GEPIA数据库显示,FUT8在ESCC组织中的表达明显高于正常组织。String数据库分析显示FUT6、MGAT2、MGAT4A、MGAT4B、MGAT4D、MGAT5、B4GALT1、B4GALT2、B4GALT3等基因与FUT8有明显的相互作用。细胞实验表明,FUT8过表达后的ESCC亲本细胞,经6 Gy照射,克隆形成能力显著增强,细胞凋亡比例减少,G2/M期细胞阻滞减弱,放射敏感性下降;而敲低FUT8表达后的ESCC亲本细胞,经6 Gy照射,克隆形成能力显著减弱,细胞凋亡比例增加,G2/M期细胞阻滞增强,放射敏感性增强。结论FUT8在ESCC组织中高表达,且体外实验证实FUT8对ESCC的放射抗性具有调控作用,有望成为克服ESCC放射抵抗的新靶点,具有重要的临床意义。

高通量血液透析对尿毒症患者血浆毒素分子含量及机体微炎症状态的影响

目的:分析高通量血液透析对尿毒症患者血浆毒素分子含量及机体微炎症状态的影响。方法:选取在本院接受住院透析治疗的尿毒症患者96例作为研究对象,随机分为观察组及对照组各48例。对照组接受低通量血液透析(LF-HD),观察组接受高通量血液透析(HF-HD),对比两组血浆肾功能相关毒素,氧化应激相关毒素,瘦素、全段甲状旁腺激素、非对称性二甲基精氨酸水平,微炎症状态相关因子水平等差异。结果:观察组透析后血浆BUN、Scr、UA、β2-MG水平低于对照组(P<0.05);观察组治疗后血浆MDA、Cor水平低于对照组,GSH、SOD水平高于对照组(P<0.05);观察组透析1次及5次后的血浆Leptin、iPTH、ADMA水平明显低于对照组(P<0.05);观察组透析后血浆hs-CRP、IL-6、TNF-α、ASAA水平低于对照组(P<0.05)。结论:尿毒症患者接受高通量血液透析,可以有效排出患者体内相关毒素,降低全身微炎症状态,具有积极的临床意义。

5-氮胞苷对培养兔骨髓基质细胞心房利钠肽表达的影响

目的研究5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对体外培养兔骨髓基质细胞中心肌特异性心房利钠肽(atrialnatriureticpolypeptide,ANP)表达的影响,探讨骨髓基质细胞向心肌样细胞分化的条件。方法体外分离培养兔骨髓基质细胞用不同浓度5-aza诱导培养,以RT-PCR方法测定诱导前后ANP的表达。结果正常培养兔骨髓基质细胞不表达ANP。经5-aza诱导并继续培养24h后,骨髓基质细胞表达ANP,在一定时间、浓度范围内ANP含量逐渐增加。结论5-aza诱导体外培养兔骨髓基质细胞表达心肌特异性ANP,与诱导时间及浓度呈正相关,提示可诱导兔骨髓基质细胞向心肌样细胞分化。

血液透析及血液透析滤过对尿毒症患者P300影响的研究

目的通过事件相关电位P300探讨尿毒症患者认知功能,以及血液透析、血液透析滤过对尿毒症患者认知功能的影响。方法52例尿毒症患者随机分为血液透析组31例,血液透析滤过组21例,分别接受血液透析、血液透析滤过治疗1月,测定两组患者治疗前后P300,以同期健康体检者作对照。结果①尿毒症患者P300异常率为86.6%,高于健康对照组,表现为P300潜伏期延长,波幅降低;②血液透析及血液透析滤过组患者治疗后P300的异常率较治疗前明显下降,同治疗前比较,潜伏期缩短,波幅增高,上述改变血液透析滤过组较血液透析组更明显。结论慢性肾衰竭尿毒症患者认知功能障碍发生率高,血液净化可以明显改善尿毒症患者的认知功能,血液透析滤过优于血液透析。