PAG1相互作用蛋白的筛选和验证

目的:在原发性放射抗拒喉癌细胞中筛选鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白(PAG1)的相互作用蛋白并验证其相互作用情况。方法:采用免疫沉淀技术通过特异抗体富集PAG1结合蛋白,SDS-PAGE对免疫沉淀复合物进行分离,从胶中切取PAG1结合蛋白条带,质谱鉴定其成分,NCBI数据库检索各个蛋白功能,进一步运用免疫荧光双标法验证互作蛋白。结果:利用免疫沉淀联合质谱分析筛选得到包括整合素β1在内的9个候选蛋白质,免疫荧光双标法证实PAG1与整合素β1能共定位。结论:原发性放射抗拒喉癌细胞中PAG1与整合素β1存在相互作用,为进一步研究PAG1功能奠定基础。

超声诊断左下肢神经纤维瘤1例

神经纤维瘤（Neurofibroma,NF）是发生于周围神经系统中的一种良性肿瘤,好发于颈部、四肢、背部、纵膈及腹膜后,多见于成年人,分为局限性神经纤维瘤、丛状神经纤维瘤、弥漫型神经纤维瘤三类。本文通过对1例左下肢局限性神经纤维瘤病例的报道,提高对该疾病的认识,有助于该疾病早期诊断及采取正确的治疗手段,现报告如下。

PAG1与整合素β1的相互作用及其位点分析

目的:在原发性放射抵抗喉癌细胞中分析鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白(PAG1)与整合素β1的相互作用情况,并探讨PAG1与整合素β1的结合基序。方法:提取Hep-2max细胞总蛋白,采用免疫共沉淀技术检测PAG1、整合素β1相互作用;进一步运用多肽阵列技术在聚乙二醇(PEG)修饰纤维素膜上合成覆盖PAG1蛋白全部序列的多肽阵列,包含7个重复氨基酸,多肽长度为12个氨基酸,将阵列与整合素β1重组蛋白孵育,通过整合素β1特异抗体检测,使用TotalLab软件分析各点光密度。结果:PAG1免疫沉淀复合物中检测到整合素β1,整合素β1免疫沉淀复合物中检测到PAG1;PAG1多肽阵列两个区域存在阳性结合反应,分别位于Pro^(216)-Arg^(232)和Asn^(356)-Gly^(377)之间。结论:PAG1与整合素β1的相互结合在喉癌原发性放射抵抗中发挥重要作用。

XRCC1 Arg194Trp位点基因多态性与结直肠癌易感性的Meta分析

目的:运用Meta分析探讨X射线交叉互补修复基因1(X-ray cross-complementing group 1,XRCC1)Arg194Trp位点基因多态性与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)易感性的关系。方法:检索中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普科技期刊全文数据库(VIP)、万方、Pub Med、EMBASE等数据库中与XRCC1 Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性有关联的研究,按照纳入和排除标准筛选文献、提取数据,采用Stata12.0软件进行Meta分析。以OR值及其95%可信区间为效应指标,根据异质性检验结果,选择固定效应模型或随机效应模型对OR值进行合并。结果:纳入27个病例对照研究,病例组6 314例,对照组9 946例。Meta分析结果显示,总体人群中XRCC1 Arg194Trp位点基因多态性与CRC易感性有关(TT vs.CC:OR=1.19,95%CI=1.03~1.38,P=0.021)。按人种亚组分析结果显示,与亚洲人群的结直肠癌易感性有关(TT+CT vs.CC:OR=1.18,95%CI1.01~1.37,P=0.034;TT vs.CC:OR=1.28,95%CI=1.00~1.68,P=0.048;T vs.C:OR=1.16,95%CI=1.02~1.32,P=0.023),与高加索人群结直肠癌易感性无关。敏感性分析显示结果稳定性较好,发表偏倚检验结果显示不存在发表偏倚。结论:XRCC1 Arg194Trp位点基因多态性与亚洲人群结直肠癌易感性有关,携带T等位基因的亚洲人群发生结直肠癌的风险较高;但XRCC1 Arg194Trp位点基因多态性与高加索人群结直肠癌易感性不相关。

抑制糖基转移酶GnT-V的表达可增强胶质瘤细胞放射敏感性

目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(GnT-V)介导的N-糖基化修饰在胶质瘤细胞放射敏感性中的作用及调控机制。方法:采用RT-PCR和Western blot技术筛选GnT-V高表达的胶质瘤细胞;运用RNA干扰技术抑制GnT-V基因和蛋白表达,流式细胞术和荧光显微镜观察细胞N-糖基化修饰改变;4 Gy X-射线处理后分析细胞放射敏感性差异。结果:成功筛选GnT-V高表达的U251细胞;下调U251细胞中GnT-V的表达,可阻断N-糖链合成,逆转X-射线诱导的G2/M期阻滞,促进细胞凋亡。结论:抑制GnT-V的表达可通过阻断N-糖基化修饰增强胶质瘤细胞的放射敏感性。