有机相酶促酯化反应中水分调控技术的研究

在有机相酶促反应中，水含量是影响酶活力的关键因素．对异辛烷／正辛醇体系中柱状假丝酵母脂肪酶催化萘普森酯化反应中的水分调控技术进行了研究．结果表明：水合盐对———Ｎａ２ＳＯ４·１０Ｈ２Ｏ／Ｎａ２ＳＯ４对系统水分的变化具有有效的缓冲作用；非极性硅藻土吸附固定酶，使之对水分的敏感性得到缓解；另外，加入分子筛去除副产物———“水”

NO:一种重要的生物信使分子

一氧化氮（nitricoxide，NO）以其多样而新颖的生理、病理作用和广泛的组织分布，得到国内外学者的关注。研究表明：NO是一重要的细胞内信使分子和神经递质，参与血管调节、炎症免疫反应等过程。L－Arg-NO途径异常和NO产生异常，会引起某些疾病。从NO抑制剂和NO供体两方面；提出NO相关性疾病的治疗方法。

聚乙二醇偶联的甲氨蝶呤衍生物合成及其体外缓释性能

目的寻求用聚乙二醇对甲氨蝶呤进行化学修饰的新方法,探讨甲氨蝶呤-聚乙二醇偶联物的体外缓释特征。方法用微波催化结合化学催化合成方法,研究甲氨蝶呤-聚乙二醇偶联物的合成反应条件并考察其溶解性能,用累积释放百分比测定偶联物在正常生理条件下的体外缓释特征。结果采用"微波催化+化学催化"的合成方法,偶联物中甲氨蝶呤的相对标准含量可达到99%以上,在纯水中的溶解度提高了128倍,水溶性和脂溶性均有明显增加。体外缓释实验表明,未经偶联的甲氨蝶呤4h后即可基本释放完全,而偶联物在经过72h以后,仍只有11%被释放出来。结论微波催化与常规化学催化相结合,是合成甲氨蝶呤-聚乙二醇偶联物的新途径,可极大地改善甲氨蝶呤的溶解性能,达到缓释的目的。

中枢神经系统靶向性Mn-SOD的克隆和在大肠杆菌中的表达研究

靶向性超氧化物歧化酶 (SOD)是治疗氧自由基引起神经细胞损伤所致疾病等的有效途径 .将破伤风毒素C部分 (tetanustoxinfragmentC ,TTC)基因与编码Mn SOD的cDNA融合克隆进pET 2 2b(+)载体 ,1mmol/L异丙基 D 硫代半乳糖 (IPTG)诱导在大肠杆菌中表达 .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)图谱可见约 71ku有表达产物条带 ,与理论计算值相符 ;蛋白质印迹 (Westernblot)分析显示 ,表达产物与抗Mn SOD及破伤风毒素的多抗有免疫反应 ,而且表达产物用邻苯三酚自氧化法测定具有SOD活性 .融合蛋白可作为有效的试剂靶向性输送Mn SOD到神经元细胞 。

CuZn-SOD乳酸-羟乙酸共聚物缓释微球的制备及体外、体内释放研究

目的 探讨CuZn-SOD包裹入乙酸-羟乙酸共聚物制备的药物微球的缓释效果。方法 采用复乳法制备CuZn-SOD乙酸-羟乙酸共聚物(PLGA)药物微球,分别用恒温摇瓶法和ELISA法检测体外和体内的释放效果。结果 有机相/分散相体积比、内水相体积、蛋白质浓度等因素影响微球的性质,由于聚合物的吸附作用,CuZn-SOD的体外释放呈明显的两段释放,释放不完全;体内释放显示微球制剂有一定的缓释效果。结论 该微球有比较好的缓释作用。

可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C6 0 0 pBV TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白 ,优化发酵工艺 ,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略 :间歇流加、DO stat、pH stat,摸索了一种流加策略 ,即DO stat pH stat组合流加 ,有效的避免了发酵过程中 ,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加 ,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下 ,得到高效表达。菌体密度最终达到 30 0g L(WCW )以上 ,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的 4 2 % ,含量为 1 1g L。在整个发酵过程中 ,乙酸浓度接近于 0 ,且未使用任何特殊手段 ,如纯氧、加压等 ,简化了发酵工艺 ,降低了发酵成本 ,为TRAIL的工业化生产创造了条件。

细菌的群体行为调控机制-Quorum sensing

群体效应 (Quorumsensing)是近来日益受到广泛关注的一种细菌群体行为调控机制 ,很多细菌有这种能力 ,即分泌一种或多种自诱导剂 (Autoinducer) ,细菌通过感应这些自诱导剂来判断菌群密度和周围环境变化 ,当菌群数达到一定的阀值 (quorum ,菌落或集落数 )后 ,启动相应一系列基因的调节表达 ,以调节菌体的群体行为。不同类型的细菌具有不同的群体效应调节系统 ,很多细菌分泌同一种诱导剂 ,以此调控不同种类细菌间的作用行为。群体效应系统在自诱导剂与受体之间存在专一性 ,同时又在调节基因和信号传递系统中体现出多样性和复杂性。由于不少人或植物的病原菌的致病机制等受群体效应的调控 。

反义寡核苷酸的修饰及第二代反义药物

目的：目前反义寡核苷酸技术的应用尤其是作为药物应用的研究备受重视。为此，对其化学修饰及构建进行综述。方法：全面查阅有关文献，综合归纳了反义寡核苷酸的修饰及第二代反义药物的研究进展。结果：反义寡核苷酸用于药物治疗是一个令人鼓舞的方向。结论：反义寡核苷酸可望发展成为一种新型的治疗药物。

一种新糖肽抗生素LY333328的抗菌活性与作用机制

对新的糖肽抗生素药物———LY3 3 3 3 2 8的抑菌杀菌活性、机理、化学结构修饰的影响进行了综述。LY3 3 3 3 2

反义核酸药物硫代磷酸酯寡核苷酸

对一类颇有应用前景的反义核酸药物硫代磷酸酯寡核苷酸的合成技术、反义特性、作用原理及药物动力学等几方面的最新研究进展，作了较为详尽的论述。

反义硫代磷酸酯寡聚核苷酸及其专一性

反义硫代磷酸酯寡聚核苷酸及其专一性１）刘红魏东芝２）（华东理工大学生物化学研究所生物反应器工程国家重点实验室，上海２００２３７）反义核酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ）包括反义ＤＮＡ、反义ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ三种．根据碱基互...