α-三联噻吩对淡色库蚊血细胞的光敏作用研究

研究了α-三联噻吩(α-T)对淡色库蚊Culex pipiens pallens幼虫血细胞的光敏作用。结果表明,在活体和离体条件下,α-T对淡色库蚊4种主要血细胞的形态延展及增殖均有不同程度的影响,处理后较短的时间内,α-T能促进血细胞的增殖,但随着作用时间的延长,其对血细胞均表现出抑制作用,且抑制程度随α-T浓度升高而逐渐增强。α-T对淡色库蚊不同血细胞的影响具有一定的差异,在处理早期,其对浆血胞(SP)和原血胞(PR)的增殖促进作用较强,而在处理后期,其对粒血胞(GR)和珠血胞(SP)的抑制作用较强,并且改变了淡色库蚊幼虫体内不同血细胞之间的比例,使得GR和SP所占比例逐渐降低。实验还表明,α-T对各种离体血细胞增殖的促进作用均较对活体的弱,且促进时间明显缩短。

神经节苷脂与神经系统发育关系的研究进展

神经节苷脂(ganglioside,GA)主要存在于神经系统中,是神经细胞表面主要分子决定簇。它不仅参与神经系统的发育和学习记忆等高级神经活动,还与一些由细菌、病毒以及自身免疫等因素引起的疾病密切相关。结合近些年的研究,就其与神经系统发育的关系予以综述。

光诱导RNAi系统的构建及优化

利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载体和不同核心启动子的shRNAmir表达载体,分析它们对报告基因的干扰效果的影响。结果表明,GAVPO的表达量对报告基因沉默效果和shRNAmir的背景表达水平至关重要。低表达量的GAVPO能够实现对报告基因的微调控,报告基因的表达量下降到约60%;而高表达量的GAVPO能够高效抑制报告基因表达,报告基因的表达量下降到34%。

基于NAD^+/NADH比率荧光探针的乳酸检测法

结合氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+/NADH)比率荧光探针SoNar与酶法分析技术,建立了一种灵敏的乳酸检测方法,并进一步对影响检测性能的几个因素,如pH、温度、底物浓度、SoNar浓度等进行了优化.结果显示,该方法的检测限(LOD)为2.60μmol/L,定量限(LOQ)为8.67μmol/L,不同时间重复测定的标准偏差(RSD)为2.37%,乳酸质量浓度0~1000μmol/L范围内的Z因子值为0.82,表明该方法具备很好的稳定性和重复性.与目前常用的基于MTT-PMS的酶偶联分析法相比,本文所建立的乳酸检测法灵敏度更高,特异性更好,且生物兼容性更强.

红花籽粕对小鼠的急性毒性及抗溃疡性结肠炎作用研究

目的评价红花籽粕(红花Carthamus tinctorius的种子经过压榨提取红花籽油后的副产品)对小鼠的急性毒性及抗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)作用。方法C57BL/6小鼠ig不同剂量的红花籽粕,7 d后计算脏器指数,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝、脾、肾组织病理变化,测定血清中肝功能、肾功能及血脂水平,以评价红花籽粕的急性毒性。建立葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的UC小鼠模型,每天记录小鼠体质量,测定疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度以及脏器指数,采用HE染色和阿利新蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色评价结肠组织病理学变化,采用qRT-PCR和Western blotting检测结肠组织中炎症和黏膜屏障相关因子表达。结果急性毒性实验中,与对照组比较,红花籽粕组小鼠脏器指数、血液生化指标没有显著差异,脏器病理切片也未见异常。红花籽粕对DSS诱导的UC小鼠具有较好的保护作用,可以显著改善体质量减轻、DAI评分升高、结肠长度缩短等临床症状(P<0.01),减轻结肠组织病理损伤,抑制肠道炎症细胞的浸润,保护杯状细胞,提高紧密连接蛋白和黏蛋白的表达(P<0.05、0.01、0.001),改善肠道屏障完整性。结论红花籽粕具有较高的安全性,且对DSS诱导的UC小鼠具有显著的治疗作用。

伏立诺他对骨髓增生异常综合征细胞先天免疫和自噬的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂——伏立诺他(SAHA)干预骨髓增生异常综合征细胞株SKM-1细胞对自噬水平与先天免疫中的Toll样受体表达水平的影响。方法将SKM-1细胞分为空白组(不加任何干预)、Toll样受体(TLR)诱导剂组(三酰脂肽300 ng·m L^(-1))、TLR抑制剂组(氧化磷脂30μg·m L^(-1))、HDAC诱导剂组(曲古抑菌素A1抑制剂100μmol·L^(-1))、HDAC抑制剂组(SAHA 2. 5μmol·L^(-1))、自噬诱导剂组(西罗莫司2. 5μmol·L^(-1))、自噬抑制剂组(选择性磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂15μmol·L^(-1)),加药培养24h。用流式细胞仪检测细胞自噬水平;用实时定量-聚合酶链反应和免疫印迹法检测各药物干预后HDAC1、TLR2、自噬经典信号通路[磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)]以及自噬相关指标[自噬相关蛋白6(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)]的mRNA和蛋白水平。结果 SKM-1细胞经处理后,自噬诱导剂组、HDAC诱导剂组、自噬抑制剂组与空白组的自噬水平(流式荧光强度)分别为92. 9±4. 54,6. 58±1. 01,34. 10±3. 18,34. 00±2. 10; HDAC抑制剂组、TLR抑制剂组与空白组的自噬水平(流式荧光强度)分别为71. 00±10. 00,57. 60±3. 10,34. 00±2. 10; HDAC抑制剂组的PI3K、AKT、m TOR的mRNA表达水平分别为0. 26±0. 04,0. 20±0. 03,0. 40±0. 07,空白组相应的分别为1. 00±0. 18,1. 00±0. 16,1. 00±0. 18; HDAC抑制剂组的PI3K、AKT、m TOR的蛋白表达水平与基因表达水平的趋势一致;同时,HDAC抑制剂组与空白组的TLR2的mRNA表达水平分别为0. 30±0. 03,1. 00±0. 16;这2组的TLR2的蛋白表达水平为0. 72±0. 05,1. 00±0. 16。各个给药组与空白组比较,上述所有指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 SAHA在PI3K/AKT/m TOR通路上调控SKM-1细胞自噬水平,并可能通过抑制HDAC1与TLR2表达水平增加细胞自噬。

二十二碳六烯酸(DHA)对甲基汞神经毒性的保护效应及机制研究进展

甲基汞是一种具有神经毒性的环境污染物,会对人体中枢神经系统造成不可逆的损害。二十二碳六烯酸(DHA)是一种n-3长链多不饱和脂肪酸,是神经细胞生长过程中的重要成分。许多研究发现,DHA可对甲基汞导致神经系统损害产生潜在的保护作用,但机制尚不清楚。本文首先介绍了甲基汞的神经毒理作用机制,明确了甲基汞对人体的神经损伤作用。其次介绍了DHA对甲基汞暴露潜在的神经保护机制,包括DHA可通过增强细胞抗氧化能力,降低细胞对甲基汞的吸收,平衡细胞内外钙离子水平,改变细胞骨架等机制对暴露于甲基汞的细胞产生保护作用。在发育的关键时期应减少或避免甲基汞暴露,增加DHA的摄入,以保障神经系统的正常发育。最后,本文提出未来应关注多不饱和脂肪酸对甲基汞神经毒性的作用及其机制,为甲基汞所致神经损害的保护探讨新的方向。

锰与儿童健康研究进展

锰作为必需微量元素,对人体具有十分重要的作用。近些年随着工业化进程的加快,锰污染问题日益严重。由于生命早期各器官尚未发育完全,接触高剂量锰可能会对儿童生长发育产生不利影响。就生命早期锰暴露模式及其健康危害进行综述,为早期锰的毒性防治提供科学依据。

以环丙烷限制构象的新型双酰胺的设计、合成、抗癌活性及计算分析

为了探索具有新型骨架的抗癌剂,设计了一系列的以环丙烷限制构象的双酰胺类化合物.大多数含有顺式环丙烷中心的外消旋体对四种肿瘤细胞系(MCF-7、BGC-823、HepG2和NCI-H460)具有良好的抑制活性.其中,消旋体顺式-N^(1)-(2-甲基-4-(全氟丙-2-基)苯基)-N^(2)-(4-苯氧基苄基)环丙烷-1,2-二羧酰胺(1-19)对MCF-7的IC_(50)值为(8.38±0.67)mg·L^(-1),显示出可进一步优化为抗癌先导物的潜力.此外,甾醇硫酸酯酶(steryl-sulfatase,STS)被PharmMapper预测为可能的靶标蛋白,并由分子对接实验进行了验证.