推行制种、推广与技术服务一体化——华中农业大学瘦肉猪产业化发展过程浅析

从培育优质种猪，组织良种猪配套生产与社会推广，开展推广与利用的全程技术服务三个方面的具体作法上，浅析了华中农业大学瘦肉猪产业的发展过程。

细胞凋亡及基因调控在兽医病毒学领域研究动态

病毒感染杀伤细胞导致靶器官组织损伤以及病毒 DNA整合于细胞中使感染进入潜伏状态 ,其致病过程是病毒感染细胞后 ,诱导和抑制细胞凋亡的自身基因或宿主相关基因表达调控的结果。随着对细胞凋亡研究的深入 ,人们逐渐认识到细胞凋亡与细胞增殖在致病作用中具有重要意义。本文简述了细胞凋亡的概念 ,某些病毒诱导或抑制细胞凋亡基因调控的研究动态 ,以及该领域研究的意义及展望。通过探讨病毒与宿主相互关系 ,为预防、治疗、诊断病毒性疾病提供新的理论依据及相应对策。

浅析我校大学生科技创新能力的现状和对策

科教兴农是我国农业振兴的必由之路。培养具有科技创新能力的农业人才是实现这一战略的根本 ,也是当代农业教育的重要使命。我校在培养大学生科技创新能力方面有自身的优势 ,同时也面临巨大困难。营造浓厚的大学生科技创新氛围 ,实施教育创新工程 ,建立完善的科技创新体制 。

兽医病理解剖学实验绘图教学的实践与体会

兽医病理解剖学是高等农业院校兽医专业的主干专业基础课。它作为一门形态学课程，具有很强的直观性和实践性，因而实验课在本课程教学中占有十分重要的地位。动物疾病病理变化错综复杂，学生对病变的辨认与描绘，需要经过系统的训练。为了加深学生对兽医病理学基本概念的...

兽医学科课程与内容设置合理化初步探讨

根据畜牧产业结构的变革以及社会对兽医专业人才的知识结构和智能结构的需求 ,简要分析了旧的兽医专业课程与内容设置的不适应性 。

规模化猪场兽医卫生保健管理程序

根据当前国内规模化猪场所实行的五段式管理模式,同时要贯彻防重于治的方针,为防制重大传染性疾病在猪场内的发生和流行,提高规模化猪场猪群健康水平,特制定规模化猪场各阶段的兽医卫生保健管理程序.

京星商品鸡在华中地区适应性与生产性能的探讨

京星 10 1和 10 2商品肉鸡是在北方气候条件下培育而成的肉鸡品种。以该品种在华中地区高温高湿气候条件下进行饲养试验 ,观察它们在华中地区的生产性能及适应性。结果表明 :京星 10 1和京星 10 2品种具有较强的抗病性能和抗逆性能 ,尤其是京星 10 2育成率高 ,生长迅速 ,饲料利用率高 ,显示出在华中地区良好的养殖前景。

湖北省三品种猪27个微卫星座位的遗传变异

采用国际动物遗传学会（ＩＳＡＧ）和联合国粮农组织（ＦＡＯ）共同推荐的２７个微卫星标记，对湖北省３个主要地方猪种（通城猪、清平猪和阳新猪）的遗传变异进行了检测。计算出各个品种的基因杂合度、各个座位的多态信息含量及品种间的遗传距离。结果表明，３个地方猪种的平均基因杂合度分别为０．７４８９、０．６９８７和０．６２７３，遗传多样性比较丰富；通城猪和清平猪亲缘关系较近。

伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/gG^-/LacZ^+突变株的构建

为了以国内地方分离株鄂A株为亲本构建伪狂犬病病毒双基因缺失株 ,采用外切酶Ⅲ和绿豆核酸酶酶切 ,构建了缺失主要毒力基因TK基因部分编码区的重组质粒 pSTK1-4 ,进一步改造成为转移质粒 pUCPB4。用HindⅢ将质粒pUCPB4线性化 ,然后与用EcoRI消化的伪狂犬病病毒鄂A株TK-/LacZ+ 突变株基因组DNA共转染PK- 15细胞 ,待完全病变后 ,收毒作空斑试验 ,PCR筛选TK缺失的重组病毒。重组病毒空斑纯化 3次 ,随机挑取空斑进行PCR扩增 ,证实所获得的病毒为均一的无TK-/LacZ+ 突变株污染的TK缺失的重组病毒。分别以TK缺失株病毒与鄂A野毒株为模板对TK基因进行PCR扩增 ,扩增产物经酶切分析和测序后发现 :TK缺失重组病毒的TK基因缺失了 2 0 5个碱基 ,XhoI和SalI位点消失 ,SmaI酶切片段发生变化。两种病毒在PK - 15细胞上形成空斑的大小和增殖的滴度无明显的差别。进一步提取TK缺失突变株基因组DNA ,与含gG -LacZ的转移质粒pUSKZ通过磷酸钙法共转染PK - 15细胞 ,待完全病变后 ,在X - gal存在下筛选蓝斑 ,将挑取的蓝斑纯化 3次后 ,对纯化的重组病毒进行TK、LacZ扩增 ,结果既能扩增出较以鄂A野毒株为模板扩增的要小的TK基因片段 ,同时又能扩增出LacZ基因 ,证实所得到的重组病毒为TK-/ gG-/LacZ+ 突变株。此双缺失突变株的构?

猪IL-2与IL-6的原核表达及其对伪狂犬病基因缺失疫苗的佐剂效应研究

将猪白细胞介素2(pIL-2)与猪白细胞介素6(pIL-6)的cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a及pGEX-KG上,转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导产生重组蛋白pIL-2与pIL-6,表达量分别占菌株总蛋白的43.45％和28.37％,经提纯后含量可分别达到97.06％和86.37％。将提纯后不同剂量的两种重组蛋白以单独或组合的方式,加入伪狂犬病(Ea株)TK^-/gG^-双基因缺失疫苗中,使每头份疫苗分别含2、5和10μg·ml^(-1)的pIL-2或(和)pIL-6,用此疫苗免疫伪狂犬病抗体阴性猪。同时设试验对照组。初次免疫30d后加强免疫,测定中和抗体,观察试验猪的日增重情况,进行统计分析。发现各试验组的抗体水平均高于不含重组蛋白的基因缺失疫苗组;其中,含2μg·ml^(-1)pIL-2试验组与含10μg·ml^(-1)pIL-2/pIL-6试验组抗体水平和基因缺失疫苗对照组之间呈显著差异(P=0.019)与极显著差异(P=0.009)。结果表明,大肠杆菌表达的pIL-2、pIL-6对伪狂犬病鄂A株基因缺失疫苗(TK^-/gG^-/LacZ^+)有较强的佐剂效应,且呈剂量相关性。不同试验组日增重比较结果表明,免疫效果高低与猪的生长速度呈正相关。本试验为重组pIL-2与pIL-6作为新型疫苗佐剂应用提供了重要的试验依据。

猪细小病毒VP_2基因的克隆、测序与原核表达

利用PCR技术从猪细小病毒的RFDNA模板中扩增了含有VP2 全基因的 2 0kb的基因片段 ,将PCR产物克隆至 pMD18 T载体 ,利用双脱氧末端终止法测定了VP2 全基因的核苷酸序列。将所得的核苷酸序列和推导的氨基酸序列分别与GenBank中的相应序列进行同源性比较 ,同源性均在 99%以上 ,从而说明该蛋白的碱基序列和氨基酸序列均具有高度的保守性。将VP2 全基因分别克隆入原核表达载体pET15 (b)、pET17(b)和 pET2 8(b)构建成表达质粒 pET15bVP2 、pET17bVP2 和 pET2 8bVP2 ;将含有VP2 基因起始位点至EcoRⅠ切点间的 0 8kb片段克隆入 pET17(b)中构建成表达质粒 pET17bVP2 f。利用上述四种质粒转化大肠杆菌BL2 1,IPTG诱导后SDS PAGE检测表达情况 ,结果发现 pET17bVP2 f质粒在 45kD处有一特异性表达带 ,而其它几种质粒均未看到特异性表达带 ,推测VP2 基因 3′端的某些结构可能对VP2 全基因的表达有一定影响。这一结果对研究VP2 基因的结构与功能具有重要意义。

规模化猪场大肠杆菌的耐药性监测及血清流行病学调查

为了调查猪致病性大肠杆菌的耐药性及流行血清型 ,从湖北、河南、江西、安徽、浙江等省的 33个猪场采集 32 1份仔猪黄、白痢病料进行细菌的分离和生化鉴定 ,结果分离到大肠杆菌 30 2株 ,其中致病性大肠杆菌 2 76株。对 112株致病性大肠杆菌进行了 15种抗生素敏感性试验 ,发现分离菌株对 15种药物均有不同程度的耐药性 :青霉素 G对其完全没有抑制作用 ;先锋霉素 抑制作用最强 (97.3% ) ,其次为呋喃妥因 (78.6 % )、痢特灵 (71.4 % )、环丙沙星(6 8.8% )、诺氟沙星 (6 5 .1% )。 112株菌中 ,有 4 7种耐药谱型 ,多数为 6耐以上的菌株 (80株 ) ,占供试菌株的 71.4 %。应用微量平板凝集试验 ,对分离的 2 76株致病菌进行了血清型鉴定 ,鉴定共有 72种血清型 ,其中优势血清型 10种 ,占能定型分离致病菌株的 5 3.7%。

猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗的制备及安全性与免疫性试验

用本室分离鉴定的猪伪狂犬病毒鄂A强毒株接种仓鼠肾细胞 (BHK 2 1) ,制备病毒抗原液 ,毒价不低于 10 6TCID50 / 0 1ml。经一定浓度的甲醛溶液灭活后与油相佐剂乳化研制成油乳剂灭活油疫苗 4批。本研究对该制品的安全性、免疫性进行了测定。对 18g左右小白鼠接种 0 3ml,初生仔猪、断奶仔猪及妊娠母猪加倍剂量注射 ,均未出现不良反应 ,安全性良好。对母猪的繁殖性能不产生影响。后备母猪及妊娠母猪血清中和抗体指数于免疫后 2 1d达到 316以上 ,间隔 35d加强免疫一次后 ,中和抗体指数可达 10 0 0以上。断奶仔猪及初生仔猪免疫后对强毒的攻击 ,保护率分别为 10 0 %及 90 62 %。

分散固相萃取气相色谱-负化学离子源质谱法测定大豆和玉米中20种农药的残留量

建立了一种大豆和玉米中20种农药残留量的分散固相萃取气相色谱-负化学离子源质谱分析方法。样品经乙腈提取并浓缩后加入N-丙基乙二胺（PSA）、石墨化碳黑和C183种填料进行分散固相萃取净化,气相色谱-负化学离子源质谱分时段选择离子监测技术测定与确证,外标法定量。所有农药在20~400μg/L范围内线性均良好;方法的定量限（LOQ）均不高于2μg/kg;在5,10和20μg/kg3个添加水平下所有农药的平均回收率均处于70%~130%之间,相对标准偏差（RSD）低于17%;运用该方法检测大豆和玉米样品时没有干扰现象。

猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组克隆与序列分析

参照国外发表的猪Ⅱ型圆环病毒 (porcinecircovirustype 2 ,PCV - 2 )全基因组序列 ,设计一对PCV - 2特异性引物 ,用该室分离的PCV - 2豫A株感染PK - 15细胞 ,从中提取PCV - 2复制型基因组DNA ,并以之为模板进行PCR扩增。回收PCR产物 ,构建重组测序质粒T -PCV - 2。测序结果表明 ,猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组为 176 7bp ,与GenBank收录的PCV - 2国外分离株核苷酸的同源性可高达 97%。序列分析表明 ,复制型豫A株的基因组包含 10个读码框架 ,其中ORF1、ORF2是其两个最主要的读码框架 ,分别编码 314、2 34个氨基酸。豫A株和PCV - 1间的ORF1、ORF2的氨基酸序列同源性分别为 85 %、6 6 % ,与其它PCV - 2毒株间的ORF1氨基酸同源性均在 98%以上 ,而ORF2的氨基酸同源性为 92 %～ 97%。

猪细小病毒VP_2蛋白在昆虫细胞中的表达及其特性

将猪细小病毒 (PorcineParvovirus,PPV)vp2 基因重组到杆状病毒Bac To Bac表达系统的pFastBacⅠ质粒中 ,构建了pFast vp2 质粒。在DH10 Bac大肠杆菌中 ,pFast vp2 与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒 (AcNPV)基因组 (Bacmid)发生同源重组 ,从而获得重组穿梭载体Bac mid vp2 ,转染Sf9细胞得到重组病毒AcNPV vp2 。SDS PAGE和Western blotting分析可见大小约为 6 4kD的特异性带 ,表明AcNPV vp2 在Sf9细胞中成功地表达了PPVVP2 蛋白。红细胞凝集试验和间接ELISA进一步证实 ,表达的VP2 蛋白具有与全病毒相同的血凝活性和相似的抗原性。电镜观察VP2 蛋白的粗提物 ,发现VP2 蛋白可自行装配成许多病毒样粒子 (VLPs)

乳胶凝集试验与血清中和试验检测猪伪狂犬病血清抗体的比较

应用血清中和试验 (SNT)和伪狂犬病乳胶凝集试验 (LAT)诊断试剂盒对两种伪狂犬病标准阳性血清、伪狂犬病病毒 (PRV)高免血清及 6 0份被检猪血清进行了PRV抗体效价测定和相关性分析 ,两种方法测得的抗体效价之间呈强相关性 (r=0 .96 ) ,且LAT效价比SNT一般高出一个滴度 ;对来自 35个猪场的 414份猪血清进行了PRV抗体检测 ,并与SNT检测结果进行了对比 ,结果在SNT检测为阳性的 171份血清中 ,LAT检出阳性 16 8份 ,阳性符合率为 98.2 % (16 8/ 171) ,在SNT检测为阴性的 2 43份血清中 ,LAT检出 5 2份血清为PRV抗体阳性 ;对猪瘟、口蹄疫 (O型 )、猪细小病毒、猪衣原体四种标准阳性血清和来自无伪狂犬病猪场的 18头健康猪血清进行检测 ,检测结果均为阴性 ,其符合率为 10 0 % (2 2 / 2 2 )。结果表明 ,两种方法检测结果符合率高 ,特异性强 ,LAT比SNT敏感、快速简便和实用。

藏鸡生长曲线拟合和分析的比较研究

【目的】了解藏鸡的生长发育规律。【方法】运用Gompertz,Logistic,von Bertalanffy3种非线性模型分别对饲养在西藏高原的藏鸡0至16周龄体重生长数据进行了曲线拟合和分析。【结果】3种模型均能很好的模拟藏鸡生长曲线,但Gompertz模型拟合效果更佳;进一步分析Gompertz模型拟合参数,发现藏公鸡成年体重(1 252.0 g)显著高于藏母鸡(808.9 g),但藏公鸡拐点时间为13.20周较藏母鸡的拐点时间11.27周迟。【结论】运用3种模型对藏鸡进行生长曲线的拟合和分析是可行的,对及时了解藏鸡的生长发育规律提供了参考。