禽流感病毒单克隆抗体的制备及其抗蛋白抗原的分析

以纯化的H9N2亚型禽流感病毒为抗原，免疫BALB／c小鼠，细胞融合后，经间接ELISA和血凝抑制试验（HI）筛选，获得了8株能稳定分泌抗禽流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。特异性试验证明，8株杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水的特异ELISA抗体效价可达113．2×10^3～1：5．1×10^4，其中2株HI效价达2^12。8株单抗与H5亚型血凝素分型抗原不发生血凝，与减蛋综合征（EDS-76）病毒、传染性支气管炎病毒（IBV）、新城疫病毒（NDV）均不反应。亚类鉴定证实，除1C7单抗为IgG2b外，其他7株均为IgG1亚类。Western blotting试验分析初步表明。8株单抗至少针对纯化病毒粒子3种不同的蛋白抗原，其中3株针对核蛋白（NP）．2株针对基质蛋白M1，2株针对血凝紊HA／HA1。对感染细胞的Western blotting分析结果与纯化病毒结果基本一致，其中1株朱明显沉淀纯化病毒粒子蛋白的单抗可以与感染细胞的M2蛋白多肽反应。