气相色谱-离子阱串联质谱法同时测定猪肌肉中硝基咪唑类药物残留量

旨在建立测定猪肌肉中地美硝唑、洛硝唑、噻克硝唑、甲硝唑和奥硝唑等硝基咪唑类药物残留的气相色谱一离子阱串联质谱测定法。样品用二氯甲烷提取，盐酸反萃取。盐酸萃取液用磷酸氢二钾碱化，再用二氯甲烷反萃取，萃取液于40℃水浴中旋转真空蒸干。残余物用3mL乙酸乙酯溶解，于40℃水浴氮气吹干，加入N，O-双（三甲基硅烷基）乙酰胺和异辛烷各50pL，50℃衍生60min，进样分析，GC—MS／MS检测，外标法定量。结果表明，5种药物标准液浓度在0．005～1．6μg／mL时，与响应值呈良好线性关系，相关系数均大于0．998。洛硝唑的检测限可达0．2μg／kg，噻克硝唑为O．5μg／kg，地美硝唑、甲硝唑和奥硝唑为1．0μg／kg。空白肌肉组织样品中添加药物浓度在0．2～4．0μg／kg时，5种药物的回收率为74％～82％，日间变异系数均小于13％。表明所建立方法灵敏、准确，可用于检测猪肌肉中硝基咪唑类药物残留。

高效液相色谱法检测猪组织中硝基咪唑类药物残留

【目的】建立猪肌肉、脂肪、肝脏和肾脏中羟基地美硝唑、洛硝唑、甲硝唑、替硝唑、地美硝唑和奥硝唑残留的高效液相色谱(HPLC)测定法。【方法】样品中硝基咪唑类药物用二氯甲烷萃取,盐酸反萃取。盐酸溶液用K2HPO4碱化,再用二氯甲烷反萃取,萃取液于40℃水浴中旋转真空蒸干。残余物用流动相0.5ml溶解,进样分析。色谱柱为Hypersil ODS2,紫外检测器,检测波长320nm。以甲醇﹕水(14﹕86,V﹕V)为流动相,进样量20μl。【结果】6种药物标准液浓度在0.005～2.0μg·ml-1时,与响应值呈良好线性关系,相关系数均>0.999。羟基地美硝唑、洛硝唑和甲硝唑在肌肉和脂肪组织中检测限为0.5μg·kg-1,在肝脏和肾脏中为1.0μg·kg-1;替硝唑、地美硝唑和奥硝唑在肌肉、脂肪、肝脏和肾脏中均为1.0μg·kg-1。空白样品添加药物浓度为0.5～4.0μg·kg-1时,6种药物的回收率为60%～83%,日间变异系数均<15%。【结论】该方法能灵敏、准确的检测猪组织中硝基咪唑类药物。

美国兽药管理法的演变

美国的兽药管理法最早源于美国1906年提出的食品和药品法，到1938年正式命名为《联邦食品药物及化妆品法》（Federal Food，Drug，and Cosmetic Act，简称FFDCA）。当时，此法案在兽药和人药上没有明显的区别，二者统一于整个药品的管理范畴。之后，随着美国食品与药品管理制度和相应法规的不断发展与完善，美国逐渐对食品和药品实行更详细的划分管理，法规中不断出现一些新名词，如新药品、食品添加剂、抗生素等。其中，“兽药”就是在1968年的《兽药修正案》（Animal Drug Amendments，简称ADA）中提出的，这一新概念的提出标志着美同开始了真正意义上的兽药法制化管理。以下便从ADA开始，对美国兽药管理法的发展做一概括性介绍。

美国兽药管理机构简介

对美国兽药管理机构做了全面阐述,介绍了美国相关兽药的各个管理机构及其相应的职责和任务,目的为我国的兽药管理体制及机构建设提供可借鉴信息。

食品中农药残留暴露评估的国内外研究进展

一、农药残留的暴露评估 食品安全暴露评估是风险评估的核心，食品中的农药残留是否对健康造成影响取决于食品中残留农药的毒性以及消费者的暴露水平。人体暴露于农药残留的途径是多方面的，如实施农药生产、施用等的作业人员，

菠菜中毒死蜱残留量的暴露评估

本研究采用美国EPA评估模式,采用我国输日速冻菠菜毒死蜱残留监控数据和田间试验数据,结合我国饮食结构中的菠菜P97.5消费量和平均消费量,以及日本茎叶菜消费量数据,对我国和日本人食用我国输日速冻菠菜中毒死蜱含量进行了基于极值理论的点评估暴露估计。评估结果为我国菠菜中毒死蜱的急性膳食暴露%aPAD为16.2,慢性膳食暴露%cPAD为0.4,日本茎叶菜慢性膳食暴露%cPAD为0.4,均小于100,表明日本消费我国速冻菠菜的人群都不属于优先管理对象,食用正常渠道的菠菜应当是安全的。

呋喃唑酮残留标示物人工抗原合成与抗体制备

以乙醇肼和碳酸二甲酯为原料,合成2种半抗原3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)和3-(4-羧基苯亚甲基)-氨基-2-恶唑烷酮(CPAOZ),经戊二醛法和碳二亚胺法将半抗原与牛血清蛋白(BSA)偶联合成2种人工抗原AOZ-BSA和CPAOZ-BSA,产物经紫外光谱扫描分析鉴定。用2种人工抗原采取不同程序免疫新西兰大白兔,获得8组多克隆抗体。AOZ-BSA抗体效价1:0.8×104～1:3.2×104,对AOZ灵敏度低,IC50均大于100μg/ml。CPAOZ-BSA抗体效价1:1.6×105～1:6.4×105,对AOZ与苯甲醛衍生物N-苯亚甲基-3-氨基-2-恶唑烷酮(PAOZ)灵敏度高,IC500.91～11.56ng/ml,特异性好,仅与呋喃唑酮(交叉反应率6.15%)、3-(2-硝基苯亚甲基)-氨基-2-恶唑烷酮(NPAOZ,交叉反应率5.73%)有交叉反应,与衍生试剂苯甲醛和其他药物没有交叉反应(交叉反应率<0.01%)。本研究制备出AOZ特异性抗体,为我国开发AOZ酶联免疫试剂盒奠定基础。

免疫化学方法测定动物组织中呋喃唑酮残留标示物

以自制特异性抗体为核心试剂,建立了以苯甲醛为衍生试剂的呋喃唑酮残留标示物间接竞争ELISA方法。通过方阵滴定法和间接竞争法确定ELISA方法最佳反应条件:抗原最佳包被浓度200μg/L,抗体最佳稀释倍数1∶2.5×105,抗体与药物最佳工作配比40μL∶60μL,最佳竞争时间1h。检出限为0.1μg/L,检测范围0.1～25.6μg/L,线性关系良好。在空白组织中(猪肌肉、猪肝脏、鸡肌肉、鸡肝脏、鱼肉)添加0.4、1.0和5.0μg/kgAOZ,回收率55.8%～96.6%,相对标准偏差均小于20%。测定20份不同组织的空白样品,方法的检出限为0.4～0.5μg/kg。以100mg/kg呋喃唑酮饲喂动物,其组织样品同时经HPLC方法和本方法测定,数据表明本方法具有实际检出能力,测定结果与仪器方法的测定结果相近。通过与德国同类试剂盒比较实验表明,本方法的灵敏度、精密度、准确度接近于进口试剂盒水平,可用于动物可食性组织肝脏和肌肉中AOZ筛选。

免疫激活与抗菌药物调节研究进展

免疫激活主要通过多种细胞因子影响动物食欲和促进机体蛋白质及糖类分解,降低动物的生长性能。抗菌药物可调节免疫细胞活性,影响机体免疫激活状态。现有的研究提示,在应用抗菌药时除应注意考虑其在体内的药效外,还应考虑其免疫调节作用,以维护动物健康,促进动物生长。

猪尿液中抗菌药物快速筛选拭子法的建立

为防止抗菌药物在动物性食品中的残留,以枯草芽孢杆菌为受试菌,建立一种检测活体动物尿液中抗菌药物残留的快速筛选拭子法,进行宰前活体检疫.添加试验测定猪尿液中5类抗菌药物最低检测限分别为:β-内酰胺类青霉素和氨苄青霉素均为0.05mg/L;氨基糖苷类庆大霉素0.05mg/L、新霉素0.4mg/L;四环素类金霉素0.1mg/L;大环内酯类红霉素0.05mg/L和氟喹诺酮类恩诺沙星0.2mg/L.各抗菌药物添加回收率范围均在64.0%～107.7%,变异系数均小于15%.假阴性结果显示,除青霉素(5%)和氨苄青霉素(4%)出现假阴性外,红霉素、庆大霉素、新霉素、恩诺沙星和金霉素均未出现假阴性.与国外同类试剂盒比较,结果显示两者对10种抗菌药物的检测限一致.

磁性功能材料应用于食品中有毒有害物质检测的研究进展

磁性固相萃取是近年来不断发展的一种样品前处理技术,而磁性功能材料作为磁性固相萃取的吸附剂,由于其独特的物理和化学特性引起广泛关注。本文总结分析了2010年以来磁性功能材料在食品中农药、兽药、合成色素、及其他有毒有害物质检测应用方面的研究进展,以期为食品安全检测新技术的推广应用提供参考。

耐药弯曲杆菌适应性代价研究进展

弯曲杆菌在产生耐药性之后,其生存力、稳定性、毒力可能会发生一系列的变化,即适应性发生改变。耐药菌的适应性若增强,则能在机体内占据主导优势,增加耐药菌在宿主和环境中传播的风险;若耐药菌获得了适应性代价(即适应性和生命力的下降),在各方面不敌敏感菌,则会在竞争中逐渐被清除。部分产生适应性代价的细菌通过自身的代偿突变恢复其适应性,可能会成为优势菌群,加大治疗难度。故耐药菌与敏感菌的竞争力决定了其在宿主体内或环境中的存在和繁殖能力,也决定了宿主疾病的发展与转归。弯曲杆菌作为一种引起临床多种动物包括人类患病的致病菌,其耐药性引起了人们的关注,其适应性分析更是人们研究的热点。本文对近年来耐药弯曲杆菌的适应性进行了综述,旨在为控制耐药弯曲杆菌的扩散转移和耐药性管理决策提供理论依据和参考。

聚醚类抗生素残留分析方法研究进展

聚醚类抗生素是从链霉菌中提取出来的离子载体类抗生素,包括莫能菌素(monensin,MON)、马杜霉素(maduramicin,MAD)、盐霉素(salinomycin,SAL)、拉沙菌素(lasalocid,LAS)等,具有较广的抗虫谱,对常见的鸡艾美耳球虫有抗虫活性,对反刍动物及猪有促生长作用。由于聚醚类抗生素的不规范使用,导致其在动物性食品中残留蓄积,引起人类健康问题,因此,要加大该类抗生素残留检测强度。聚醚类抗生素的残留分析方法主要包括分光光度法、微生物检测法、色谱法(薄层层析法、高效液相色谱、液相色谱—串联质谱法)及免疫学方法。文章总结了该类抗生素的残留分析方法,并对聚醚类抗生素残留检测技术未来的研究发展方向做出展望,以期为今后多残留检测聚醚类抗生素提供参考依据。

兽药残留分析中样品前处理技术研究进展

样品前处理是兽药残留分析中的关键步骤,直接影响检测的结果。近年来,出现了一些新的样品前处理技术,如固相萃取、基质固相分散萃取、固相微萃取、搅拌棒吸附萃取、膜萃取、液相微萃取、超临界流体萃取、加速溶剂萃取、分子印迹、微波辅助萃取。这些技术能够有效地减少分析过程中由样品前处理过程带来的误差,具有前处理快速、简便的优点,同时可与分析仪器联用,实现分析的自动化。本文对这些新技术的基本原理、特点及在兽药残留分析中的应用进行了综述,并对样品前处理的前景进行了展望。

畜禽沙门氏菌病防制研究进展

沙门氏菌为肠杆菌科沙门氏菌属成员,具有约2 600种血清型,其在自然界中十分普遍,是一种条件致病菌,对畜禽健康、人类公共安全、食品安全都有严重的影响。近年来,随着养殖业的迅速发展,沙门氏菌对畜禽养殖业的影响越来越严重。实际生产中的抗生素滥用导致沙门氏菌的耐药状况愈发严重,致病性沙门氏菌可引起猪副伤寒、鸡白痢、禽伤寒、禽副伤寒等畜禽疾病,非致病性沙门氏菌可能造成动物源性食品的污染,加大了防制的难度。作者主要从沙门氏菌临床诊断、实验室诊断及预防和治疗中存在的问题进行了综述,以期为畜禽沙门氏菌病防制措施的改进提供参考依据。

喹赛多对猪直肠粪便中大肠杆菌数及肠黏膜免疫影响

去势长大仔猪随机分为6组,Ⅰ和Ⅳ组饲喂不含抗菌药的基础日粮,Ⅱ和Ⅴ组基础日粮中添加100mg/kg喹乙醇,Ⅲ和Ⅵ组基础日粮中添加100 mg/kg喹赛多。Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组仔猪灌服1010CFU大肠杆菌(O139:K88),Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组仅灌服肉汤。喹赛多饲喂猪直肠粪便中大肠杆菌总数和接种血清型大肠杆菌数与喹乙醇饲喂猪均无显著差异(P>0.05),喹赛多和喹乙醇饲喂猪直肠粪便中接种血清型大肠杆菌数均低于非药物饲喂猪(P<0.05)。饲料中添加药物可降低空、回肠上皮内淋巴细胞和IgA分泌细胞数(P<0.05);喹赛多饲喂猪空肠IgA分泌细胞数低于喹乙醇饲喂猪(P<0.05)。大肠杆菌接种降低仔猪平均日增重(P<0.05),药物显著改善平均日增重(P<0.05);喹赛多饲喂猪平均日增重在整个试验期高于喹乙醇饲喂猪(P<0.05);这些结果显示喹赛多减少肠道大肠杆菌数量,抑制因肠道接种刺激所引起的免疫激活,特别是肠道免疫激活,以促进仔猪生长。

粮谷中敌菌灵的GC-MS检测方法研究

采用气相色谱-质谱选择离子测定粮谷中的敌菌灵,与国内外现有的方法相比,方法简便,经济快速、准确,测定方法在测量范围内具有良好的线性关系(r>0.999),测定的回收率范围为83.5%～92.7%。检出限为0.002mg/kg,相对标准偏差为1.36%～3.82%。并对以上结论进行了多个实验室验证,表明其方法的检测灵敏度和准确性均能满足我国进出口粮谷中敌菌灵的检测限量要求。

微量环丙沙星对人源大肠杆菌和粪肠球菌体外敏感性的影响

建立人离体肠道模拟模型,研究微量环丙沙星对人源肠道大肠杆菌和粪肠球菌敏感性的影响,进而用聚合酶链反应法扩增耐药菌的gyrA基因的耐药决定区,并分析其耐药机制。结果显示,大肠杆菌连续培养后存活菌株对微量环丙沙星耐药,此耐药菌对其他抗菌药敏感;粪肠球菌经连续培养,对环丙沙星和其他抗菌药物仍敏感;耐药大肠杆菌的gyrA基因发生突变,248位碱基由C变为T,259位由G变为T,相应地,该基因编码的蛋白质在83位的丝氨酸和87位的天冬氨酸分别改变为亮氨酸和酪氨酸。研究表明,微量环丙沙星对人肠道菌群具有不同的选择作用,能诱导大肠杆菌产生耐药性。这为动物源食品中环丙沙星残留的安全性评价提供了试验依据。

喹赛多对山羊生长性能及胴体品质的影响

60只3月龄左右杂交山羊,随机分为6组,空白对照组饲料不添加任何药物,药物对照组饲料添加50mg/kg喹乙醇,4个试验组饲料中分别添加25、50、150和250mg/kg喹赛多,试验期90d。结果表明喹赛多25、50和150mg/kg能改善山羊平均日增重(ADG)4.4%、14.5%和7.2%,提高饲料转化率(FCR)5.9%、12.0%和7.4%。喹赛多250mg/kg提高FCR8.6%,但降低ADG2.1%。喹赛多50mg/kg组ADG和FCR均高于喹乙醇组。喹赛多50mg/kg降低山羊腹泻频率39.0%,但随剂量增加,其抗腹泻作用下降。喹赛多25、50、150和250mg/kg能提高山羊屠宰率2.5%、9.0%、5.0%和1.0%,增加眼肌面积4.8%、34.1%、16.1%和14.0%。喹赛多50mg/kg组山羊净肉率提高14.0%,高于其他各组。喹赛多各剂量均能显著增高肌肉pH值,平均降低滴水损失值13.7%。可见,喹赛多适宜剂量,尤其50mg/kg,有较好的促进山羊生长和改善胴体品质的作用。

喹赛多对犊牛生长性能和血清生化指标的影响

32头犊牛随机分为4组,分别投喂添加喹赛多0(对照)、25、50和100 mg/kg的饲料,观测不同剂量的喹赛多对犊牛生长性能及血清生化指标的影响。结果表明:添加喹赛多25、50和100 mg/kg组犊牛的平均日增重分别比对照组提高8.4%、15.2%和9.3%,犊牛的腹泻频率分别降低55.6%、66.7%和55.6%;喹赛多对犊牛的血清生化指标无显著影响。可见,饲料中适宜添加喹赛多(50 mg/kg),对犊牛有较好的促生长作用。