微生物防制媒介昆虫进展

总结了我国微生物防制蚊、蝇、蜚蠊等媒介昆虫的进展,从20世纪70年代末以来,在细菌、病毒和真菌等媒介昆虫病原的大量分离、筛选、作用机制和安全等研究的基础上,研究了媒介微生物防制剂不同的发酵方法以及适合媒介防制的剂型,开发出孑孓灵、187悬乳剂、BsC3-41乳剂和毒力岛等制剂,经大面积防制蚊、蜚蠊等,不仅虫口密度大幅下降,而且疟疾等疾病的发病率显著降低,为我国大力发展微生物防制媒介奠定了良好的基础。根据保护环境可持续发展等国策的要求,保障人民的健康,提出了我国媒介微生物防制的策略。

生物技术在现代农药中的应用进展

生物技术在现代农药研究中的应用日益广泛。通过基因工程技术构建微生物农药菌株可以提高毒力,拓宽杀虫谱。具有抗病、抗虫和抗除草剂性能的转基因作物已投入商业化生产。依据农药新靶标的发现可以进行农药分子设计,开发高效低毒农药。仿生农药的生物合成不仅避免了化学合成的污染,而且为生物农药的制备开辟了新途径。利用微生物和酶降解法可以治理农药残留。依据酶抑制原理设计的试纸法、比色法和传感器法已用于农药残留的快速检测。

草鱼肠道一菌株产纤维素酶的分离纯化及性质研究

从草鱼肠道分离出1株枯草芽孢杆菌,有较强的活性。该菌产生的纤维素酶粗酶液,经盐析、透析,并通过葡聚糖凝胶层析柱SephadexG-75分离纯化,经SDS-PAGE后表明第2峰已纯化,得到一种相对分子质量约为62.43kD纤维素酶。分离纯化后该酶的比活力提高了2.924倍,回收率为6.38%。酶学试验研究表明:该酶的最适反应温度为55℃,最适pH值为7.0;Lineweaver-Burk法求得动力学参数,Km和Vmax分别为1.02×10-3g/mL、2.727×10-2mg/(mL·min)。

转化cry1C基因对苏云金芽胞杆菌杀虫活性的影响

将含基因cry1C的质粒 ,通过电脉冲法转入含基因Cry1C的质粒 ,通过电脉冲法转入含基因Cry1Ab、Cry1Ac和cry2的对小菜蛾具有高毒力的苏云金芽胞杆菌野生菌株YBT 80 3 1中 ,得到转化子BMBY 0 0 3。PCR和SDS PAGE分析显示 ,Cry1C可在其中正常复制、表达 ,但使受体菌部分内源质粒发生丢失。生物测定结果表明 ,转化子BMBY 0 0 3既对甜菜夜蛾有毒力 ,LC50 值为 1 1 78μL/mL ,高于出发菌株YBT 80 3 1 (LC50 1 879μL/mL) ,也对小菜蛾有毒力 ,LC50 值为 1 96 8μL/mL ,低于YBT 80 3 1 ((LC50 1 1 43 μL/mL)。表明cry1C转入后 ,提高了野生菌株YBT 80 3 1对甜菜夜蛾的毒力 ,却降低了对小菜蛾的毒力。

顶空固相微萃取-气相色谱/质谱法分析鉴定畜禽粪便中的挥发性有机化合物

采用顶空固相微萃取(HS-SPME)-气相色谱/质谱法(GC/MS)测定了牛粪、猪粪以及鸡粪中的挥发性有机化合物(VOCs)。在优化HS-SPME条件的基础上,通过GC/MS分析,从牛粪中分离鉴定出44种VOCs,从猪粪中分离鉴定出40种VOCs,从鸡粪中分离鉴定出41种VOCs。HS-SPME-GC/MS具有简单、快速、无需有机溶剂等特点,适合于畜禽粪便中挥发性有机化合物的分析与鉴定。同时,该研究揭示了畜禽养殖场臭味物质的来源,为治理其环境污染提供了科学依据。

基于发酵饲料与微生态制剂的无抗方案与应用实例

1无抗之路如何走?今后的无抗是以生物技术为主线的多元化道路,以发酵或酶处理提高饲料消化为前提的多重生物防护方案。具体的讲,主要是通过发酵饲料的应用,再加上微生态制剂、酶制剂等共同构成无抗饲料的核心。通过综合利用这些技术,达到无抗养殖的效果。

多粘类芽胞杆菌KM2501-1杀南方根结线虫活性产物研究

【目的】南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种危害严重的土传性植物病原线虫,给农业生产造成了巨大的经济损失,前期研究发现多粘类芽胞杆菌(Panebacillus polymyxa)KM2501-1具有很好的温室防治南方根结线虫效果,且可产生多种挥发性杀线虫活性物质,但对其非挥发性产物是否有杀线虫活性没有研究。本研究拟进一步分离鉴定其产生的杀线虫活性代谢产物,发掘新的杀线虫药物。【方法】对菌株KM2501-1进行液体发酵并离心收集发酵上清液,通过硅胶柱层析、高效液相色谱分离等方法得到高纯度的杀线虫活性物质,并通过液相色谱质谱联用分析、核磁共振等技术鉴定杀线虫活性物质的结构。【结果】生物活性检测显示,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵上清液具有较强的南方根结线虫触杀活性,并能有效抑制南方根结线虫卵孵化,体外杀线虫效率高达87.66%,抑制卵孵化效率达92.26%。结构鉴定结果显示多粘类芽胞杆菌产生的杀线虫活性物质为环二肽类物质cyclo(Pro-Phe),800 mg/L的cyclo(Pro-Phe)杀线虫效率达84.75%。进一步的显微观测结果表明,与对照组相比,活性物质cyclo(Pro-Phe)处理后的根结线虫肠道组织紊乱、结构发生破坏。【结论】多粘类芽胞杆菌KM2501-1产生的cyclo(Pro-Phe)是一个具有杀线虫新功能的活性物质,其可能通过破坏线虫肠道杀死线虫。

苏云金芽胞杆菌受体菌株的筛选及电转条件的优化

利用电脉冲法转化法,从150株苏云金芽胞杆菌野生菌中筛选出转化效率较高的编号为2331的野生菌,并对其最优的电转条件进行了研究。结果表明,用SG作为电脉冲缓冲液,在一次电脉冲条件下3.8ms,用7KV/cm脉冲场强以及采用对数前期(OD600nm为0.2～0.3)收获的受体菌,可以达到最高转化频率1.12x104。