药用植物湖北罗田苍术亚种的花粉母细胞减数分裂过程

药用植物湖北罗田苍术因其特有的形态和地理分布被划分为一个新亚种。对罗田苍术的花粉母细胞减数分裂过程进行了观察,结果表明,染色体(2n=24)正常配对与分离,没有出现未配对染色体,在2次分裂后期和末期没有落后染色体及形成微核,最后产生较高比例的可育花粉。研究结果为罗田苍术的较高结实率及种子的高成活率提供了细胞学解释。

不同核数的灵芝菌丝体转录组比较分析

以野生灵芝[Ganoderma lucidum(Leyss. ex Fr.)Karst.](D)、自然单核灵芝(Mo)、双核灵芝(Mu)的菌丝体为材料,利用高通量测序技术筛选差异表达基因,并进行GO分析和KEGG富集分析。通过差异基因分析,筛选出568个差异表达基因。GO分析结果表明,野生灵芝(D)与自然单核灵芝(Mo)菌丝体的差异表达基因主要富集在转录调控及DNA模板化、tRNA氨酰化、组蛋白甲基化等过程;野生灵芝(D)与双核灵芝(Mu)菌丝体的差异表达基因主要富集在染色质沉默、L-丝氨酸代谢、硫化合物代谢等过程;自然单核灵芝(Mo)与双核灵芝(Mu)菌丝体的差异表达基因主要富集在染色质沉默、DNA模板转录、谷氨酸分解等过程。KEGG富集结果表明,自然单核灵芝(Mo)与双核灵芝(Mu)菌丝体在代谢通路上有明显的差异,差异基因主要被注释到过氧化物酶、维生素代谢等通路。野生灵芝(D)与自然单核灵芝(Mo)菌丝体、野生灵芝(D)与双核灵芝(Mu)菌丝体的差异基因并没有KEGG富集的结果,说明其代谢通路没有明显差异。筛选出3个品系中表达量差异均显著的基因,共12个,并对基因的主要功能进行预测。12个基因中有5个基因可以匹配到GO库。GO注释结果表明,这5个基因主要被注释到氧化还原酶活性、金属离子结合、膜的调控与膜组成等方面。

紫苏不同外植体的培养及再生

探讨了紫苏(Perilla frutescens)不同外植体在不同激素的不同浓度及组合培养基中的培养及再生情况,建立了紫苏的高效快捷再生体系。结果表明:(1)再生率由高到低依次是茎尖、真叶、子叶和下胚轴;(2)茎尖无论有无激素处理,再生率都在85%以上,添加合适的激素可提高增殖系数。真叶在MS+TDZ 0.05 mg/L～0.1 mg/L范围处理下再生率均达70%左右。子叶最适激素组合为MS+KT 1.0 mg/L+IAA 1.0 mg/L,再生率22.22%。下胚轴最适激素组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 1.0 mg/L,再生率14.61%;(3)再生苗在1/2 MS中生根良好,生根率达86.67%,平均根长7.36 cm;(4)真叶外植体可形成叶簇,并可反复诱导不定芽发生,增殖能力强,培养周期短,是最理想的外植体。

基质固相分散—加速溶剂萃取ASE—气相色谱法测定土壤中毒死蜱残留量

建立了用氧化铝和活性碳作为基质固相分散剂的加速溶剂萃取方法预处理土壤样品中的毒死蜱,用丙酮、甲醇(1∶1,V/V)在加速溶剂萃取仪上以10.3Mpa、60℃提取10 min,萃取液经浓缩定容后,用Agilent 6890气相色谱仪进行检测,土壤中毒死蜱农药的回收率为89.2%～92.8%。该法用于土壤中毒死蜱的农药残留测定,速度快,检出限为0.001 mg/kg。

固相萃取—气相色谱法测定饮用水中百菌清

采用C18固相柱提取水样中百菌清杀菌剂，通过毛细管气相色谱法一电子捕获检测器（GC-ECD）定量，供试农药的平均加标回收率为78．6％-93．0％。2．0μg/L空白加标实验的相对标准偏差（RSD）为0．069，实际样品的测定结果表明，该方法分离效果好，能够满足饮用水中百菌清分析的要求。

黄连的组培再生及遗传转化研究

目的建立黄连的组培再生及遗传转化体系。方法以黄连子叶和下胚轴为外植体,用不同的基本培养基添加不同种类及浓度的植物生长调节剂进行组培再生研究;利用基因枪转化法研究黄连胚性愈伤组织和遗传转化。结果子叶和下胚轴在MS培养基上愈伤诱导率分别可达86.31%和54.34%;与MS培养基相比6,7-V培养基可获得更高的愈伤诱导率和增殖率;诱导愈伤组织最适宜的激素组合为0.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT;不同细胞分裂素培养的愈伤组织颜色和质地差异明显;0.5 mg/L KT+0.5 mg/L IAA与1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA组合可诱导出胚性愈伤组织,产生体细胞胚;无激素的6,7-V培养基可维持胚性愈伤组织的不断生长;含1 mg/L GA3+0.5 mg/L IBA的6,7-V培养基可使体细胞胚萌发成苗;转化后的胚性愈伤组织经3 mg/L除草剂Basta筛选,检测到β-葡萄糖苷酸酶(GUS)阳性,PCR检测再生植株膦丝菌素乙酰转移酶基因(bar)阳性。结论建立并完善了黄连的组织培养再生体系,并在此基础上利用转基因技术获得了具有相关性状的植株,实现了黄连的遗传转化,为黄连性状的遗传改良奠定了基础。