微生物产β-葡聚糖酶的储存稳定性研究

为在短期内了解β-葡聚糖酶的储存稳定性,用加速实验估算了β-葡聚糖酶在不同温度下的储存寿命。选择的实验温度为28、36.2、45℃。将盛有β-葡聚糖酶的样品瓶放入不同温度的水浴中,不同时间取样并测定β-葡聚糖酶活性。实验数据的统计处理结果得出:β-葡聚糖酶在45、36.2℃和28℃活性损失10%所需时间为1.36、4.37和20.09d;活性损失50%所需时间为8.5、25.47、104.9d。由寿命估算曲线估算出β-葡聚糖酶在25、20、15、4℃和0℃时,性损失10%需要的时间分别为30.7、67.0、145.9d,2.21年,4.14年;活性损失50%所需时间为154.0、316.0、648、3154d。从加速实验的结果可以看出β-葡聚糖酶的稳定性可以满足储存的需要。加速储存实验可以在较短时间内估算出β-葡聚糖酶储存寿命。

嗜热酶的稳定机制和稳定策略的研究进展

来源于嗜热菌的嗜热酶具有热稳定性和嗜热性。嗜热酶与对应的中温酶序列具有高度的序列同源性、高度相似的三级结构和催化机制。在简单总结了嗜热酶的生化和分子特性后,本文重点讨论了嗜热酶稳定的分子机制和提高蛋白质稳定性的策略。嗜热酶稳定的分子机制包括:氨基酸组成特性、蛋白质分子内的作用力、蛋白质构型的影响、锚定N末端和C末端、环的缩短和固定、翻译后修饰。提高蛋白质热稳定性的策略包括:蛋白质工程策略(序列一致概念、理性设计、定向进化、多肽链延伸和计算模型)、化学修饰法、添加保护剂提高酶的稳定性。

理性和非理性蛋白质设计策略在酶工程中应用

理性和非理性的蛋白质设计策略是两个非常有效的酶改性工具。在对酶性质改造方面已取得了可喜的成绩。本文将两种蛋白质设计策略的特点、各自使用的方法、进化路线及最近三年在酶工程改造上取得的成就加以总结。并讨论了两种蛋白质设计策略的区别、联系及蛋白质工程改造的未来发展方向。