Bar表达框基因载体高频转化栽培小麦

为探讨无载体主干序列（细菌DNA）的表达框基因直接转化栽培小麦的可行性和有效性，对栽培小麦（Triticum aestivum L．）进行了bar表达框基因的基因枪转化．通过试材培养、外植体分离、bar表达框基因分离提取和纯化、基因枪轰击、诱导分化与再生培养、再生苗核酸抽提、转基因检测及除草荆涂抹试验等方法，筛选到23株全部来自幼胚愈伤的独立再生苗，其中18株显示bar表达框基因的整合，且均表现抗除草荆效应．基因型鄂麦12号的转化频率（1．55％）高于鄂恩1号（0．87％），两基因型在1100psi轰击压下的转化频率均高于900psi，其中鄂麦12号达到3．51％，明显优于鄂恩1号，且高于常规小麦基因枪的平均转化频率0．50％～1．00％．鄂麦12号幼胚在1100psi轰击压下转化bar表达框基因可获高转化效应．袁明受体基因型、外植体类型、轰击压等因素在优化表达框基因转化体系中具重要作用．推断表达框基因转化方法具有片段小、环境安全、转化效率高、整合模式简单、表达高效等优势，在作物遗传转化中具有广泛应用前景．

多重PCR—一种高效快速的分子生物学技术

多重PCR是在一个反应体系中同时扩增多个目的片段的PCR技术,具有高特异性、高灵敏度、高效率、低成本的特点,适合大量样本的分析与鉴定。简述了多重PCR的基本原理,综述了多重PCR在医学、遗传学、植物生物学、海洋生物学等生命科学领域的应用现状,对目的片段选择、引物设计、复性温度和时间等PCR技术要素进行了分析,并介绍了其最新进展。

胚龄对小麦盾片组织培养的影响

研究了播种时间、取材时间和盾片大小对小麦愈伤组织诱导、器官分化和植株再生的影响.结果表明,元月初播种的材料具备很好的盾片组织培养效果,生根和绿点率都可达100%,植株再生频率平均为46%;开花后第16 d取材,生根和绿点率都达100%,植株再生频率平均达80%;达到最佳组织培养效果的的盾片大小为0.15～0.20 cm.