一新富含甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的优化表达

目的:探索大肠杆菌原核表达系统制备具有生物功能的抗菌肽的最佳诱导条件。方法:将富甘氨酸果蝇抗菌肽基因的核心片段构建表达载体pET32a+中,经序列分析证实基因序列的正确性。在不同温度、不同时间和不同IPTG浓度进行诱导后,用15%SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,发现有一条分子量约8kD的新增蛋白条带。结果:研究表明在37℃菌液OD值0.8时诱导7h蛋白表达量最高(IPTG 0.7mmol/L,AMP 100μg/ml,0.3%Glu)。结论:获得了抗菌肽表达的最佳诱导条件,为大量诱导产生该抗菌肽奠定了理论基础。

ESYT-2在致密核心囊泡分泌中起到的作用

目的:研究秀丽隐杆线虫(简称线虫)中一种扩展的Synaptotagmin同源物ESYT-2在致密核心囊泡分泌过程中起到的作用。方法:以线虫为研究对象,运用线虫腔胞吸收ANF-GFP的基本原理来确定ESYT-2与分泌相关,之后又进一步使用全内反射荧光显微镜技术(TIRFM)来研究ESYT-2对致密核心囊泡的具体调控。结果:①ESYT-2功能缺失影响线虫神经细胞致密核心囊泡分泌。②ESYT-2影响致密核心囊泡分泌的栓系过程。结论:ESYT-2调控了致密核心囊泡的分泌过程。