冬凌草甲素通过NF-kapppaB信号通路对LPS刺激树突状细胞的影响

目的探讨冬凌草甲素(ORI)通过核因子NF-kappaB(NF-κB)炎症信号通路对脂多糖(LPS)刺激树突状细胞(DC)的影响。方法CCK8法检测ORI对DC活性的影响,并根据CCK8检测法结果,筛选出12.50、25.00μM ORI为干预浓度,实验分为空白组、LPS组、12.50μM ORI+LPS组、25.00μM ORI+LPS组。采用ELISA法检测通路相关炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-12(IL-12)浓度,RT-PCR法检测细胞因子白介素-6(IL-6)mRNA的表达,免疫荧光法检测磷酸化(p)-NF-κB p65蛋白(p-NF-κB p65)的表达水平。结果40.00、50.00μM ORI干预DC 24 h后,DC活性降低(P<0.05或P<0.01),50.00μM ORI干预DC 48 h后,DC活性降低(P<0.01);ORI及LPS干预DC 24 h后,与LPS组对比,12.50μM ORI+LPS组、25.00μM ORI+LPS组的TNF-α质量浓度减少(均P<0.01),IL-12的质量浓度差异无统计学意义(P>0.05),IL-6 mRNA的表达下降(P<0.01),显微镜下观察发现12.50μM ORI+LPS组、25.00μM ORI+LPS组细胞内荧光标记p-NF-κB p65的表达减少。结论ORI可能通过抑制NF-κB p65炎症通路的活化从而对LPS刺激DC炎症反应起到抑制作用。

伊维菌素对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨伊维菌素对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法0.1、1、3μmol/L伊维菌素处理Hela细胞,MTT、Edu法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹检测p-JNK、JNK、NF-κB p65、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9表达。结果伊维菌素呈浓度依赖性抑制Hela细胞增殖、诱导凋亡(P<0.01),上调p-JNK、Caspase-3、Caspase-9表达,下调NF-κB p65、Bcl-2表达。结论伊维菌素可能通过上调JNK信号通路诱导Hela细胞凋亡,下调NF-κB信号通路抑制Hela细胞增殖。

Livin和Caspase-3在结直肠腺瘤-癌序列中的表达及相关性研究

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin与凋亡蛋白Caspase-3在结直肠腺瘤-癌序列中的表达变化及其相关性。方法 2006年7月～2009年12月,采用免疫组织化学染色链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法streptavidin-peroxidese,SP)法检测18例正常黏膜、84例结直肠腺瘤、72例结直肠癌中Livin及Caspase-3的表达情况。结果结直肠腺瘤组织中Livin蛋白的阳性表达率明显高于正常黏膜组织(P<0.05),而低于腺癌组(P<0.05);腺瘤组内绒毛状腺瘤与管状腺瘤相比较,Livin蛋白表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结直肠腺瘤组织中Caspase-3的阳性表达率明显高于正常黏膜组织(P<0.05);而腺瘤组织与癌组织之间Caspase-3阳性表达率差异(P<0.05);腺瘤组内绒毛状腺瘤与管状腺瘤相比较,Caspase-3蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。Livin表达与Caspase-3表达呈负相关(P<0.05)。结论凋亡抑制蛋白Livin参与了大肠肿瘤的发生,且在大肠腺瘤-腺癌阶段起到了重要作用;凋亡抑制蛋白Livin与Caspase-3表达呈负相关,抑制Caspase-3蛋白的活性可能是Livin促进结肠癌发生的途径之一。