细胞DNA定量检测在宫颈癌筛查中的应用

目的探讨Feulgen染色在宫颈细胞DNA定量分析中的应用意义。方法随机选择3162例妇女,每例妇女制备2张宫颈细胞液基薄层片,1张进行巴氏染色及TBS诊断,另1张进行Feulgen染色,以细胞DNA倍体分析仪进行DNA定量检测。结果 3162例患者TBS诊断低级别鳞状上皮内病变(LSIL)32例、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)22例;DNA定量检测检出3个五倍体及其以上多倍体细胞者64例。32例进行宫颈组织活检,15例诊断为宫颈上皮内瘤变(CIN2)、CIN3/原位癌、浸润癌,其中10例为LSIL、HSIL,DNA定量检测检出3个或3个以上五倍体及其以上多倍体细胞者13例。缩短Feulgen染色步骤中的酸化或染色时间可影响细胞形态、细胞检出数量及平均光密度。结论 Feulgen染色在DNA倍体分析中具有重要作用,DNA倍体分析可用于宫颈细胞学检测。

Ki67免疫组织化学定量分析在宫颈鳞状上皮内瘤变病理分级中的应用

目的用Ki67免疫组织化学定量测定评估宫颈鳞状上皮内瘤变(CIN)病理分级。方法 190例经2位病理医师按WHO(2003)宫颈癌前病变标准诊断为不同级别CIN的宫颈切片,经Ki67免疫组织化学染色后,用医学图像分析系统定量测定宫颈上皮Ki67分层指数(stratification index,SI)、鳞状上皮各层的标记指数(label index,LI)及每100μm基底膜阳性细胞核数等3个参数。结果在190例宫颈活检病例中,病理学诊断96例CIN1,72例CIN2,22例CIN3。上述3个参数在不同级别CIN之间差异均有统计学意义(均P<0.05)。单纯用Ki67 SI评估CIN级别,与病理分级一致率为54.3%;而将各组Ki67 SI与中层LI结合评估,与病理分级一致率可达76.8%。结论宫颈鳞状上皮Ki67 SI和中层LI结合评估有助于提高CIN分级的准确性。

细胞核内特征值的改变可引起DNA倍体的变化

目的通过测定不同DNA倍体细胞,研究细胞核内特征值的改变。方法用宫颈刷刷出宫颈细胞,经固定后,用涂片离心机制成二张玻片,一张行巴氏染色作TBS诊断,另一张行Feulgen染色做DNA定量测定。通过对宫颈细胞核图像内像素的统计,计算出细胞核内多种特征值,比较不同DNA倍体细胞内特征值的不同。结果 161873例妇女行宫颈细胞学检查,常规细胞学检查发现2454例低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)和523例高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL);而DNA倍体分析发现3412例有3个以上>5c细胞。84%以上的LSIL和HSIL病例均可见倍体异常细胞。与2c细胞相比,4c、5c、7c及9c细胞核面积及核半径明显增大;7c、9c细胞核内平均光学密度和紧实度均值也有明显改变,而光密度方差和灰度熵无变化。结论宫颈细胞DNA倍体改变往往伴有细胞形态和DNA核内分布等特征值的改变。

口腔中重度异常增生及癌症病变中异倍体细胞的研究

目的:比较口腔红斑和白斑处组织病理学诊断和上皮细胞内DNA倍体分析结果,研究口腔中、重度异常增生及癌变组织中异常体细胞及细胞核内DNA分布区的变化。方法:用小刷刷取口腔红斑或白斑处的上皮细胞,经固定后,涂片离心机制成1～2张玻片,行Feulgen染色做DNA倍体测定。同时在可疑处做活检行组织病理检查。比较病理和DNA倍体测定结果,同时测定口腔上皮细胞核内DNA分布区的变化。结果:46例病例中,病理证实为27例无异常增生、6例轻度异常增生、7例中度异常增生、5例重度异常增生和1例浸润癌。DNA倍体分析在无异常增生和轻度异常增生病例中未见DNA倍体异常;除1例外,另12例中、重度异常增生和浸润癌均可见DNA倍体异常。对12例口腔异倍体细胞定量测定发现5c(7±2.6)%、7c(11±4.3)%和9c(16±5)%细胞核内高DNA分布区明显较2c细胞(2±1.2)%增多(P﹤0.05)。结论:口腔中、重度异常增生和浸润癌的病例多可出现DNA倍体异常;DNA倍体异常细胞伴有核内高DNA分布区增大。

运用DNA倍体系统对口腔鳞癌及癌前病变进行诊断及预测

口腔鳞癌的早期诊断、早期治疗能有效地提高治愈率,运用DNA倍体系统对可疑病变作DNA定量细胞学检查,具有取材广泛、无创、诊断标准化、敏感度高、快捷方便等优点,弥补了细胞病理形态学诊断的不足,已广泛运用于癌及癌前病变的诊断与筛查,本文对DNA倍体系统在口腔鳞癌及癌前病变诊断及预测作综述。

用DNA倍体分析评估口腔黏膜疾病严重程度

目的:用DNA倍体分析法判断口腔黏膜病病变的严重程度。方法:用小刷刷取口腔黏膜病变处的上皮细胞,直接涂片制成1-2张玻片,经Feulgen染色,用全自动DNA图像分析仪测定细胞核内DNA含量。部分患者在可疑处活检做组织病理检查,将活检病例分成DNA倍体分析组和阴性组,比较两组病例病变的严重程度。结果:303例口腔黏膜病例中有口腔溃疡237例、口腔扁平苔藓17例、红斑34例、白斑25例。经DNA倍体分析其中267例为阴性,36例为阳性。将经活检组织病理检查97例患者分成DNA倍体分析阳性组和阴性组。在36例DNA倍体分析阳性病例中有11例组织像正常或炎性病变、6例轻度异常增生、9例中度异常增生、6例重度异常增生和4例浸润癌,中度异常增生以上改变19例,其阳性率为52.78%;61例DNA倍体分析阴性病例中发现有52例组织像正常或炎性病变、6例轻度异常增生、3例中度异常增生和1例浸润癌,中度异常增生以上改变3例,其阳性率为4.91%。经方差分析,两组之间有显著性差别(x2=30.98,P<0.005)。结论:测定口腔黏膜病变处细胞DNA含量是一种无创伤且能判别出病变严重程度的方法。

口腔溃疡病变组织DNA分布区变化的研究

目的：通过测定口腔溃疡黏膜上皮细胞，研究细胞核内DNA分布区的改变。方法：在丁卡因表麻下用小毛刷刷取1：3腔溃疡处上皮细胞，经固定后，制成1-2张玻片，行Feulgen染色做DNA倍体测定，将出现DNA分布区变化病例的溃疡组织活检行病理组织检查。结果：46例病例中有12例在口腔异倍体细胞定量测定后发现5c（7％±2．6％）、7c（11％±4．3％）和9c（16％±5％）细胞核内高DNA分布区明显较2c细胞（2％±1．2％）增多（￡一配对比较，P〈0．05）。12例病例病理证实7例中度异常增生、4例异常增生、1例浸润癌。结论：口腔溃疡病变组织中、重度不典型增生和浸润癌的病例可出现DNA倍体异常并伴有核内高DNA分布区增大。