IL-35在机体对HBV感染免疫应答中的调节作用

HBV感染机体后可诱导免疫细胞产生包括白介素-35（IL-35）在内的多种免疫分子.IL-35作为一个新发现的IL-12家族的成员,可以影响多种免疫细胞和免疫分子的产生.目前研究证明,IL-35在乙肝病毒（HBV）感染中具有抑制机体免疫应答的作用,可以诱导机体对HBV的免疫耐受,亦可发挥减轻HBV感染所致肝细胞免疫损伤的作用.文章综述了IL-35的特性及其免疫调控的机制.

白细胞介素32γ通过活化核转录因子κB通路诱导LX-2细胞表达基质金属蛋白酶9

目的：研究白细胞介素-32（Interleukin-32， IL-32）可否诱导肝星状细胞LX-2表达基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9， MMP-9）。方法用不同浓度的IL-32γ与LX-2细胞共培养，收集细胞培养上清，用TRizol试剂提取细胞总RNA，用定量 PCR检测MMP-9 RNA表达水平， MMP-9蛋白质表达水平用酶联免疫吸附试验（ enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）试剂盒检测。接下来将Nuclear factor kappa B （ NF-κB）亚基p50、 p65真核表达载体pCMV-p50、 pCMV-p65单独或联合转染LX-2细胞，48 h后收集细胞培养上清，酶联免疫吸附测定（ enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）检测MMP-9蛋白质表达水平。将不同浓度的NF-κB抑制剂SN50加入IL-32γ与LX-2细胞共培养的培养液中，48 h后收集细胞培养上清，用ELISA检测MMP-9蛋白质表达水平。结果 IL-32γ可以诱导人LX-2细胞表达MMP-9，且其表达水平随IL-32γ浓度增加而增强； NF-κB亚基p50、 p65可以诱导LX-2细胞MMP-9表达增高； NF-κB抑制剂SN50阻断NF-κB通路可降低IL-32γ诱导的MMP-9表达。结论 IL-32γ通过活化NF-κB通路诱导LX-2细胞表达MMP-9， IL-32可能通过诱导肝星状细胞表达MMP-9参与肝纤维化形成。

闽南地区罕见α地中海贫血基因型分析

目的：了解闽南地区罕见α地中海贫血基因突变类型，减少漏诊、误诊。方法对1879例血液学筛查为小细胞低色素的疑似地贫患者DNA样本，采用多聚酶链反应（ PCR）、反向斑点杂交（ RDB）和测序技术进行基因分析。结果检出α地贫802例（42．68％），罕见地贫6例（0．32％），包括2例（0．11％）香港型（HKαα），2例（0．11％）泰国缺失型，1例（0．05％）-α-27．6缺失型和1例（0．05％）融合基因。结论初步阐明闽南地区独特的罕见α地贫基因型，为减少临床地贫的漏诊、误诊提供指导。

闽南地区α和β地中海贫血的遗传异质性研究

目的了解闽南地区α和β地中海贫血（地贫）的基因突变类型和频率，为地贫的基因诊断和遗传咨询提供参考。方法用聚合酶链反应（PCR）、反向斑点杂交（RDB）及测序技术对1065例疑诊为地贫患者进行地贫基因分析。结果地贫患者检出率为56．06％（597／1065）。α地贫340例，其中216例为东南亚缺失型杂合子（αα／-SEA）、42例α3.7缺失型杂合子（αα／-α3.7）、5例α3.7缺失型杂合子（αα／-α4.2）、αα／αCSα、αα／αQSα、αα／αwSα突变杂合子各2例、血红蛋白H病71例（-α／-SEA59例，-α4.2／--SEA2例，αCSα／-SEA10例）；β地贫255例（IVS-Ⅱ-654杂合子108例，CD41-42杂合子101例，纯合子1例，CD17杂合子30例，-28M杂合子10例，CD71-72（＋A）杂合子2例，IntM3例）；α与β复合地贫2例．包括1例αα／-α3.7联合CD41-42M突变杂合子和1例αα／αWSα联合IVS-Ⅱ-654突变杂合子。结论初步阐明闽南地区α与β地贫的基因突变类型和频率，有必要在闽南地区开展地贫基因检测和产前诊断。

Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响。方法体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果。采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响。同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶3(caspase3)的表达变化。结果p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期。随着survivin基因被沉默,caspase3表达升高(P<0.01)。结论靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡。

新型四价抗体的优势与基因工程制备方法

近年来基因工程抗体技术发展迅速,将单价小分子抗体改建为双价或多价,成为抗体工程中活跃的领域之一.四价抗体相比于单价或双价抗体在增加抗体亲和力、降低解离率、延长半寿期等药代动力学,受体交联效应等方面具有优势.因此,具有较好的研究和临床应用前景.制备四价抗体的方法主要有化学偶联法和基因工程法,后者主要包括：①通过改变单链抗体VH和VL之间的连接肽的长短对单链抗体之间的聚合作用产生影响;②利用连接肽将scFv进行连接而形成多价抗体分子;③通过寡聚化的结构域,如亮氨酸拉链结构、链亲和素、人p53四聚化功能域、子宫球蛋白等介导多价抗体的形成.

小鼠pEGFP-Hoxa11真核表达载体的构建及表达

目的 构建和鉴定Hoxa11和EGFP双基因共表达真核载体.方法 采用DNA重组技术,将目的 基因Hoxa11克隆至含有报告基因EGFP的pEGFP-N1真核表达载体中,构建的真核表达载体pEGFP-Hoxa11经PCR,双酶切及基因测序鉴定;转染至CHO细胞,荧光显微镜下观察重组质粒的表达,提取细胞蛋白Western印迹检测蛋白表达.结果 pEGFP-Hoxa11重组质粒构建成功.构建的真核表达载体pEGFP-Hoxa11能在CHO细胞中有效表达.结论 成功构建了共表达Hoxa11和EGFP的真核表达载体,并能在CHO细胞中有效表达.为进一步研究Hoxa11的功能提供实验基础.

趋化因子在HBV感染发病中的作用

乙型肝炎是一种以局部炎性为主的感染性疾病，乙型肝炎病毒（HBV）感染宿主细胞后可诱导宿主细胞中趋化因子分泌及其受体表达，趋化因子／受体的相互作用进一步介导中性粒细胞、淋巴细胞等向炎症部位聚集，参与组织损伤；同时诱导T、B细胞分化成熟，对乙型肝炎的发展与转归、肝组织的损伤与修复有重要影响。HBV引发的慢性乙型肝炎（CHB）以Th1细胞性炎性反应为主，研究表明乙型肝炎中某些趋化因子在肝脏高表达，其受体CXCR3和CCR5在Th1细胞高表达。趋化因子尤其是CXC和CC亚家族趋化因子在趋化Th1细胞中发挥重要的作用：