尿1-羟基芘作为焦炉工人多环芳烃暴露生物标志物的研究(英文)

目的探讨尿1-羟基芘(1-OHP)作为焦炉工人多环芳烃(PAHs)暴露生物标志物的可行性。方法选取某焦化厂70名焦炉工人为多环芳烃暴露组,该厂医院31名医护管理人员为对照组。采用调查表采集研究对象年龄、工龄、吸烟、饮酒和职业史等个人信息,个体采样方法采集作业环境空气样本,高压液相色谱仪测定空气样本中17种PAHs浓度和研究对象尿1-OHP浓度。曲线拟合法分析尿1-OHP与PAHs等的相关关系。结果PAHs总量、致癌性PAHs总量、芘、苯并[]芘(B[]P)和尿1-OHP浓度均呈现炉顶工>炉侧工>炉底工>辅助工>对照的趋势(P<0.05)。以尿1-OHP浓度2.3μmol/mol Cr为界值进行Logistic回归分析,结果与对照组比较,辅助工、炉底工、炉侧工、炉顶工尿1-OHP浓度升高的危险度OR分别为1.48,5.42,3.33和21.66(P值分别为0.579,0.028,0.133和0.008);尿1-OHP多元线性回归分析显示,工种为尿1-OHP水平变化的主要影响因素,辅助工、炉底工、炉侧工、炉顶工偏回归系数分别为0.08,0.32,0.38,0.57(P值分别为0.563,0.016,0.012和0.000)。吸烟仅影响对照组人群尿1-OHP水平,在对照组中,吸烟者的尿1-OHP浓度(2.38±1.43)显著高于非吸烟人群(0.68±0.24),P<0.05。曲线拟合结果显示,研究对象尿1-OHP浓度与暴露PAHs总量、致癌性PAHs、芘、B[]P浓度呈正相关,R2分别为0.86,0.82,0.80和0.84,P<0.05。结论尿1-OHP可作为焦炉工人PAHs暴露的生物标志物。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与冠心病的关联性研究

目的研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因型和等位基因频率分布,探讨MTHFR基因多态性与湖北地区汉族人冠心病发病的关系。方法采用病例-对照研究方法,选取冠心病病例和与之年龄、性别匹配的对照各942例,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time PCR)技术检测基因型,同时检测研究对象的空腹血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、血压、身高、体重及腰围(WC)等临床参数,并计算体重指数(BMI)。结果冠心病组MTHFR(C677T)基因CC基因型频率为36.0%、CT基因型频率为45.0%、TT基因型频率为19.0%;正常对照组的3种基因型频率分别为36.7%、43.3%和20.0%。冠心病组MTHFR(C677T)基因各基因型分布频率与正常对照组相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。Logistic回归分析结果提示,在吸烟者、活动少、有高血压史、糖尿病史和冠心病家族史的人群中患冠心病的危险性增加,反之则危险性降低。结论MTHFR(C677T)基因多态性与中国湖北地区汉族人患冠心病的危险性无关,可能不是冠心病遗传危险因素之一。

DNA损伤结合蛋白(DDB2)基因单核苷酸多态性与肺癌易感性研究

目的探讨DNA修复基因(DDB2)单核苷酸多态位点rs830083C>G变异与肺癌易感性的关系。方法采用病例对照研究,选取湖北省各地区医院经病理诊断确诊的原发性肺癌406例,社区对照人群478例为研究对象,以Taqman探针进行基因分型,采用多因素非条件logistic回归调整年龄、性别、吸烟、一级亲属家族肿瘤史,比较不同基因型与肺癌危险的关系,并探讨吸烟与基因的交互作用。结果与携带野生型纯合子CC基因型者相比,携带CG杂合子者肺癌风险增加0.49倍,而携带GG变异纯合子者肺癌发生风险增加0.72倍,呈剂量-效应关系。有一个C>G变异的个体,累计吸烟量与肺癌发生危险度呈剂量-效应关系。交互作用分析显示,吸烟暴露与DDB2基因rs830083多态存在交互作用,同时存在高暴露累计吸烟量和杂合子CG基因型或变异纯合子GG基因型的个体肺癌发病危险度分别为5.99和2.89;吸烟与rs830083位点变异两因素同时存在时对肺癌发生的危险远大于两因素单独存在时对肺癌发生危险的影响。结论DDB2基因SNP位点rs830083C>G变异可能与肺癌遗传易感性有关,并可显著增加吸烟对肺癌的危险性。

HSP70过表达对紫外线C致DNA损伤的影响

[目的]研究HSP70过表达对紫外线致DNA损伤的影响。[方法]设A549、A549／pcDNA、A549/HSP703个组,分别用不同紫外线照射剂量(0、10、20、40、80J／m2)照射HSP70表达正常和过表达的A549细胞株,用Western-blot检测HSP70的水平,用碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤情况。[结果]DNA损伤的彗星率随紫外线照射的剂量增加而逐渐加重。当在相同剂量40J/m2时,A549/HSP70组的彗星率为24％、尾矩为14．31±1．60,A549相应为40％、18．83±0．41, A549／pcDNA为40％、18．67±0．81。在40J／m2照射所致的Olive尾矩明显减少,与对照组比较差异有显著性(P<0．01)。[结论]HSP70能保护细胞免受一定剂量范围内的紫外线引起的DNA损伤。

DNA损伤结合蛋白2基因单核苷酸多态性相关的肺癌发病风险模型

[目的]研究DNA损伤结合蛋白2基因(DDB2基因)单核苷酸多态性位点rs3781620等位基因(nt23314 C>G)多态与肺癌易感性的关系,并建立环境-遗传因素的肺癌发病风险模型。[方法]运用病例-对照研究,选择湖北省各地区医院经病理诊断确诊的原发性肺癌患者216例为病例组.社区人群448人为对照组,以Taqman探针基因分型的方法进行基因分型,采用多因素非条件Logistic回归后退法筛选肺癌相关危险因素并计算人群归因危险度百分比,绘制受试者工作特征曲线(ROC)。[结果]社区对照人群中DDB2基因的C和G两种等位基因分布频率分别为66.6%和33.4%。多因素分析结果表明与携带DDB2基因单核苷酸多态性位点rs3781620等位基因的野生型纯合子CC基因型者相比.携带CG或GG基因型的研究对象患肺癌危险度为OR=1.634(95%CI:1.104～2.420);年长者(>60岁)发生肺癌的危险度为OR=1.641(95%Cl:1.110～2.426);一级亲属家族有肿瘤史的危险度为OR=2.972(95%Cl:1.452～6.084);轻度和重度吸烟者分别为OR=1.649(95%CI:0.962～2.826)、OR=6.351(95%CI:3.978～10.139);饮酒为OR=1.559(95%CI:1.034～2.349);体育锻炼为OR=0.568(95%CI:0.383～0.844)。以上各因素的人群归因危险度百分比分别为11.27%、13.34%、7.16%、9.67%、44.90%、8.71%和-11.67%。Logistic回归模型ROC曲线下面积为0.786(95%CI:0.748～0.823)。[结论]遗传和环境因素在肺癌发病中起作用:一级亲属肿瘤家族史、DDB2基因单核苷酸多态性位点rs3781620 CG或GG基因型与肺癌易感性有关;不良的生活方式(吸烟、饮酒和缺乏锻炼)可增加肺癌的危险性。该模型对肺癌发病风险的评估能力中等。

紫外线C对A549细胞HSPs表达的影响

[目的]研究紫外线C(UVC)对热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)27、70及90的影响。[方法]用紫外线不同照射剂量(0、10、20、40、80J/m2)来照射A549细胞株,用Western-blot检测HSP27、HSP70、HSP90的表达水平。[结果]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27表达在20J/m2时达到高峰,HSP70表达在40J/m2时达到高峰,HSP90各剂量的UVC照射下,未见显著性变化。与对照组(0J/m2)相比,在10J/m2时,HSP27和HSP70表达增加(P<0.05);在20J/m2时,HSP27表达显著增加(P<0.01),HSP70表达也继续增加(P<0.05);在40J/m2时,HSP27表达开始下降,但与对照组相比差异没有显著性(P>0.05),HSP70表达仍显著增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。在80J/m2时,HSP27表达与对照组和40J/m2组相比,差异无显著性(P>0.05),HSP70表达下降,但仍高于对照组(P<0.05)。在10、20、40和80J/m2的UVC照射下,HSP90表达变化均未见显著性差异(P>0.05)。[结论]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27,HSP70能被一定剂量范围的UVC照射所诱导,高剂量UVC照射时HSP27、HSP70的表达被抑制,但HSP90表达未发现能被诱导。

高温、苯并芘-7,8-二醇-9,10-环氧化物单独作用对人肺腺癌细胞Hsp27、Hsp70表达的影响

目的研究不同温度和不同浓度B(a)P7,8二醇9,10环氧化物(BPDE)作用A549细胞后,热休克蛋白27(HSP2)、热休克蛋白70(Hsp70)的表达规律。方法体外培养的A549细胞分为高温应激组和BPDE组。37℃培养的细胞作对照,高温应激组细胞置于高温(39℃、42℃、43℃)应激2小时。BPDE组用不同浓度的BPDE(0、2、4、8μmolL)染毒2h。利用Westernblot技术分析A549细胞株中Hsp27、Hsp70的表达水平。结果高温应激组细胞Hsp27的表达较37℃对照明显升高,差异均有显著性(P<0.05)。在39℃,Hsp27的表达水平达到峰值。高温处理后,Hsp70的表达也增加,在42℃达到最高,且与对照相比差异有显著性(P<0.05)。BPDE组Hsp27、Hsp70的表达均较对照明显升高,其中Hsp27的表达水平在实验用最高浓度8μmolL达到最高,且与对照比较差异有显著性(P<0.05),但仍处于上升阶段。Hsp70在4μmolL达到最高,在4μmolL和8μmolL时,Hsp70的表达水平与对照比较差异有显著性(P<0.05)。结论高温和BPDE均能诱导A549细胞Hsp27、Hsp70的表达。高温应激时,Hsp27和Hsp70的表达水平分别在39℃和42℃达到峰值。BPDE处理时,Hsp27在8μmolL时表达最高,但仍处于上升趋势,而Hsp70在4μmolL时表达最高。

热应激作用下人肺腺癌A549细胞中HSP70B'的动态表达

[目的]探讨热休克蛋白70B’(HSP70B’)的产生条件,分析HSP70B’在人肺腺癌A549细胞中的表达特征。[方法]采用Western-blot方法检测正常培养细胞(37℃)和不同温度(38、39、40、41、42、43、44、45℃)下热应激1h;选择HSP70B’表达最高的温度42℃,应激1h后恢复培养(37℃,5%CO2)不同时间(0、3、6、9、12、15、18、24h);在42℃应激不同时间(0、20、40、60、80、100、120、140、180min)恢复培养6h的肺腺癌A549细胞中HSP70B’蛋白的表达水平。[结果]HSP70B’在正常状态的A549细胞中不表达;在不同应激温度作用下,HSP70B’在39℃开始表达,在42℃时表达量达到最高水平;细胞维持42℃应激后恢复培养不同时间作用下,HSP70B’表达在恢复培养6h后达最高,恢复培养24h后降到最低水平;在42℃应激不同时间后均恢复培养6h作用下,热应激60min时HSP70B’表达最高。[结论]肺腺癌细胞株A549细胞中HSP70B’产生的最优条件是42℃应激60min后37℃恢复培养6h。HSP70B’在热应激后的A549细胞中迅速表达,其在细胞热应激中的作用及意义有待进一步研究。

HSP70在苯并(a)芘致细胞DNA损伤中的保护作用

[目的]研究热休克蛋白70(HSP70)对苯并(a)芘[B(a)P]所致肺腺癌细胞A549的DNA损伤的保护作用。[方法]用含HSPTO基因cDNA的pcDNA3．0／HSP70重组质粒转染A549细胞,提高A549细胞HSP70表达水平,以空载体质粒pcDNA3．0转染作载体对照。对肺腺癌A549细胞(A549)、空载体质粒pcDNA3．0转染A549细胞(A549／pcDNA)和HSP70过表达A549细胞(A549／HSP70),用不同浓度的B(a)P(1、5、10、50、100μmol／L)染毒24h,MTT法测定细胞存活率、单细胞琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA损伤。用溶剂二甲基亚砜处理细胞组作为未染毒细胞组。[结果]B(a)P染毒作用时,A549/HSP70细胞在50、100μmol／L浓度组存活率明显高于A549细胞。A549、A549／pcDNA和A549/HSP70细胞的DNA损伤程度都伴随B(a)P染毒浓度增加而增加。与各自未染毒细胞相比,染毒A549和A549／pcDNA细胞的Olive尾矩值均有明显增加(P<0．05),A549／HSP70细胞在5、10、50、100μmol／L浓度时,Olive尾矩值明显升高(P<0．05)。与A549细胞组相比,在各染毒浓度下,A549/HSP70细胞Olive尾矩值均有降低(P<0．05)。A549／pcDNA细胞Olive尾矩值均无明显改变。[结论]HSP70对苯并(a)芘所致肺腺癌细胞A549的DNA损伤具有保护作用。

热休克蛋白70的表达在二氢二醇环氧苯并(a)芘致DNA损伤中的作用

目的研究热休克蛋白70(HSP70)的表达在二氢二醇环氧苯并(a)芘(BPDE)致DNA损伤中的作用。方法培养人肺腺癌A549细胞,作如下处理BPDE染毒组以不同剂量BPDE(0、2、4、8μmol/L)染毒2h;预热+BPDE染毒组细胞预热(42℃2h,37℃恢复1h)后,再按BPDE染毒组同样处理,各组均设溶剂对照。采用单细胞凝胶电泳技术和Western blot法分别检测DNA的损伤情况与HSP70的表达。结果(1)DNA损伤情况BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒剂量增加而加强,明显高于溶剂对照,差异有统计学意义(P<0.01),组间相互比较,差异亦有统计学意义(P<0.01),且DNA损伤程度与BPDE染毒剂量呈正相关(r=0.96,P<0.05);预热+BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒浓度递增,与预热溶剂对照相比,差异有统计学意义(P<0.01),但在4、8μmol/L的BPDE组间,DNA损伤程度的差异无统计学意义(P>0.05),与BPDE染毒组比较,各剂量下DNA损伤程度均明显增加。(2)HSP70表达情况BPDE染毒组在2、4μmol/L的BPDE作用时HSP70表达逐渐升高,与溶剂对照相比,差异有统计学意义(P<0.05),但在8μmol/L剂量时,表达下调,与溶剂对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);预热+BPDE染毒组HSP70的表达均比预热溶剂对照明增加,在4μmol/L的BPDE作用时HSP70表达水平最高,与2、8μmol/L剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。与BPDE染毒组相比,各剂量下HSP70的表达水平均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论HSP70对BPDE所致A549细胞DNA损伤的保护作用并不明显。