非HDL-C与动脉粥样硬化性心血管病

动脉粥样硬化性心血管病(ASCVD)是一种脂质代谢紊乱与炎症性血管疾病,他汀治疗LDL-C达标后仍存在心血管风险。越来越多的证据表明,非HDL-C对于ASCVD的风险预测作用强于LDL-C。大部分ASCVD患者需要最大可耐受剂量的他汀治疗,部分患者需要在他汀基础上联用非他汀药物治疗,以实现非HDL-C的达标,贝特类药物是与他汀联合治疗的合适选择。

大鼠急性心肌梗死后心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及辛伐他汀干预研究

目的探讨辛伐他汀对急性心肌梗死(AMI)后大鼠心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达和蛋白质产生的影响。方法Wistar大鼠36只分3组:(1)假手术(Sham)组;(2)心肌梗死对照(MI-C)组;(3)辛伐他汀(MI-S)组。动物笼养4周取出心脏,沿乳头肌等分为二,一半用逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达,另一半用Western blot测定细胞因子蛋白质生成量。结果Sham组上述细胞因子均无明显表达,MI-C组TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10 mRNA和蛋白产生均显著高于Sham组;同MI-C组比较,MI-S组的TNF-α,IL-1β,IL-6 mRNA和蛋白生成均显著下降,而IL-10的mRNA和蛋白明显升高。结论辛伐他汀明显降低AMI后大鼠心脏的致炎症细胞因子,而升高炎症保护因子IL-10。

急性心肌梗死大鼠趋化因子表达与心功能的关系

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌局部趋化因子的表达与淋巴细胞浸润及心功能的关系。方法:结扎冠状动脉左前降支建立AMI大鼠模型,实验动物分为3组:心衰组(MI-HF)、未心衰组(MI-NF)和假手术组(sham),假手术组只过线不结扎。于术后3 d、1周、2周检测血流动力学,将左室舒张末期压力(LVEDP)≥15 mmHg者归为心衰组。用半定量RT-PCR方法测定心肌梗死区(包括梗死周边区)趋化因子的mRNA表达,包括γ干扰素诱导的单核因子(MIG)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、正常T细胞表达和分泌、活化时表达下降的因子(RANTES)。HE染色切片进行梗死区淋巴细胞计数分析。结果:AMI大鼠心肌局部趋化因子的mRNA表达于术后3d开始升高,1周达峰值,且MI-HF组较MI-NF组表达更高(RANTES,0.83±0.05vs0.51±0.19,P<0.05;MIP-1,α1.94±0.30vs1.48±0.33,P<0.05;MIG,1.40±0.27vs0.93±0.28,P<0.05)。RANTES和MIP-1α的表达与淋巴细胞浸润显著相关(RANTES,r=0.35,P<0.05;MIP-1α,r=0.40,P<0.05)。结论:AMI后心肌局部趋化因子RANTES、MIP-1α、MIG表达增高,且趋化因子水平与心功能有相关性,趋化因子可能参与了AMI后心衰的病理生理学发展过程。

冠心病合并结直肠癌对血脂水平的影响及他汀类药物调脂的意义

目的通过对32例结直肠癌合并冠心病患者血脂水平及他汀治疗效果的研究,探讨此类患者血脂水平变化的意义和他汀类药物调脂治疗的安全有效性。方法临床和病理确诊为结直肠癌的32例冠心病患者在基线水平、患癌后手术前和手术后阿托伐他汀治疗6月测定其血总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C),脂蛋白(a)[Lp(a)]水平。对照组为30例血脂检查TC均≥5.70mmol/L的冠心病患者。结果30例对照组患者在阿托伐他汀20mg治疗6个月后,TC、TG、LDL-C均显著下降,并一直持续至12个月(P<0.01),而HDL-C和Lp(a)没有显著变化。32例结直肠癌合并冠心病患者基线水平的TC、TG、LDL-C和HDL-C在其癌症确诊后均明显降低(P<0.01),而Lp(a)却增高(P<0.05),术后继续阿托伐他汀治疗的患者TC、TG和LDL-C水平进一步降低(P<0.05),HDL-C升高(P<0.05),Lp(a)水平未发生明显变化。对照组TC和LDL-C显著高于癌症组(P<0.05),后者Lp(a)显著增高(P<0.05)。阿托伐他汀治疗6个月后,癌症组LDL-C和HDL-C水平进一步降低(P<0.05),TC和Lp(a)水平两者没有显著差异。结论结直肠癌患者Lp(a)水平的升高可能与其抗肿瘤效应有关,合并冠心病的直结肠癌患者血脂谱的变化为在此类患者中进行调脂治疗的安全性提出了新的课题。

吡格列酮预处理对大鼠心脏缺血再灌注／缺氧再复氧线粒体结构及膜电势的影响

目的:观察吡格列酮预处理对大鼠缺血再灌注心肌线粒体超微结构及缺氧再复氧心肌细胞线粒体膜电势的影响,并探讨可能机制。方法:建立大鼠缺血再灌注模型,分别设假手术对照(SO)组、单纯缺血再灌注(IR)组、吡格列酮预处理(Pio-P)组和5-HD+Pio组;缺血30min再灌注4h后取心室肌观察线粒体超微结构并行Flameng线粒体半定量分析。TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI);培养大鼠心肌细胞,分别分成对照组、缺氧再复氧(HR)组和不同浓度Pio-P组,缺氧1h再复氧2h后,利用JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(ΔΨm)变化。结果:IR组线粒体超微结构损害严重,Pio-P组明显减轻,5-HD+Pio组与IR组差异不大,IR组和Pio-P组线粒体Flameng评分为2.75±1.09和1.62±0.60,2组间差异显著(P(0.01)。IR组和Pio-P组AI为(55.44±6.63)%和(28.19±4.93)%,2组间差异显著(P(0.05),5-HD+Pio组与IR组差异无显著(P>0.05);HR组ΔΨm降低的细胞百分率为(56.52±2.87)%,较对照组(6.52±0.59)%差异显著(P(0.01);不同浓度(5μmol/L、10μmol/L及15μmol/L)Pio-P组ΔΨm降低的细胞百分率分别为(45.89±3.63)%、(17.13±1.37)%和(18.43±2.44)%,与HR组(56.52±2.87)%相比明显降低(P(0.05),但10μmol/L组及15μmol/L组差异无显著(P>0.05)。结论:吡格列酮预处理可以通过保护线粒体结构,抑制线粒体膜电势降低而起到抗缺血再灌注/缺氧再复氧损伤作用,该保护作用可被线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂所拮抗。

心房颤动患者心房Ⅰ型胶原重构与左心房扩大

目的:探讨心房颤动患者心房Ⅰ型胶原重构与左心房扩大在房颤发病机制中可能的作用以及它们之间的关系。方法:取24例心脏病患者的右心耳组织(房颤12例,为房颤组;窦性心律12例,为窦律组)。(1)HE染色,观察房颤组与窦律组心肌纤维以及细胞核、细胞外基质的差异。(2)免疫组化染色,在普通显微镜下观察窦律组与房颤组心房Ⅰ型胶原并使用图像分析系统分析2组的胶原含量分数(collagen volume fraction,CVF),统计2组间Ⅰ型胶原含量分数(CVF-Ⅰ)的差异。(3)对CVF-I与左房直径进行Pearson相关分析。结果:(1)房颤组CVF-Ⅰ高于窦律组(CVF-I:9.29±0.85 vs 6.90±1.47,P<0.01);(2)房颤组心房大于窦律组(6.16±1.01 vs 4.47±0.99,P<0.01);(3)心房大小与Ⅰ型胶原含量不存在相关性(r=0.33,P>0.05)。结论:房颤患者的心房纤维化程度增加、左心房扩大,纤维化与左房扩大可能通过一定的途径,直接或间接参与了房颤的发病过程。

中国扩张型心肌病诊断和治疗指南：创新与转化

扩张型心肌病(DCM)是一类异质性心肌病,是心力衰竭和猝死的常见疾病之一。以往对DCM局限于心力衰竭和心律失常的治疗,2018年发表的中国扩张型心肌病诊断和治疗指南(简称指南)提出病因诊断及其检测方法,针对免疫学病因早期治疗,将基础研究转化到临床研究,对DCM诊断与治疗展现出新的理念与方法[1]。

急性心房颤动缝隙连接蛋白40和43重构及蝙蝠葛碱的干预作用

采用快速心房起搏致家兔急性心房颤动 (简称房颤 )模型 ,观察心房肌缝隙连接蛋白 4 0和 4 3(Cx4 0、Cx4 3)含量和分布的改变以及钙通道阻滞剂蝙蝠葛碱干预的防治效果。 36只家兔随机等分为 3组 :对照组、房颤组和蝙蝠葛碱组。经颈内静脉将电极置入右房 ,对照组不予快速心房起搏 ,另两组以 6 0 0次 /分行快速起搏以诱发房颤。蝙蝠葛碱组于快速起搏前 30min按 5mg /kg静脉注射进行干预 ,另两组给予等容量的生理盐水。连续刺激并且房颤 8h后 ,开胸取右心耳组织 ,用Westernblot检测Cx4 0和Cx4 3的含量 ,用免疫荧光抗体标记激光共聚焦显微镜检测Cx4 0和Cx4 3的分布。结果 :房颤组心房肌组织Cx4 0和Cx4 3含量较对照组降低 (P均 <0 .0 1) ,端端分布减少 ,侧侧分布相对增加 ,以细胞间端端连接减少为主 ,二者均呈现不均一分布。蝙蝠葛碱组Cx4 0和Cx4 3的含量较对照组降低但差异无显著性 (P均 >0 .0 5 ) ,较房颤组升高且差异有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ,二者分布不均一程度较房颤组减轻。结论 :快速心房起搏致急性房颤可引起缝隙连接蛋白 4 0和 4 3重构 ,快速起搏前用蝙蝠葛碱干预能有效减轻急性房颤时的缝隙连接蛋白重构。

急性心肌梗死后大鼠炎症细胞因子表达和心室重塑的关系

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)后大鼠心脏炎症细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10基因表达和心室重塑的关系。方法:大鼠分2组,①假手术组(Sham),不结扎左冠状动脉前降支(LAD);②心肌梗死组(MI):结扎LAD。动物笼养4周,作超声心动图检查心脏结构和功能;然后处死大鼠,取出心脏,沿乳头肌等分为二,一半用RT-PCR法测定心脏细胞因子mRNA表达,另一半用Westernblot测定细胞因子蛋白生成量。结果:超声心动图显示,同Sham组相比,MI组LVEDd显著增加、FS和EF明显降低(P均<0.01)。Sham组上述细胞因子均无明显表达,MI组TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10mRNA表达和蛋白产生均显著高于Sham组(P<0.01)。直线相关分析显示,致炎症细胞因子蛋白表达同LVEDd呈正相关,而抗炎症细胞因子蛋白表达同LVEDd呈负相关。结论:AMI后大鼠心脏内致炎症细胞因子和炎症保护因子IL10都升高,炎症细胞因子参与了AMI后的心室重塑。

卡托普利对家兔快速心房起搏所致电重构的作用及其机制

目的 :观察血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对家兔快速心房起搏所致电重构的作用 ,探讨其防治房颤的机制。方法 :家兔 32只随机分为 3组 :对照组 8只 ,快速起搏组和卡托普利组各 12只。经颈内静脉将电极置入右心房 ,分别测定各组基础状态、给药后 0 .5 h和以 6 0 0次 / m in行快速心房起搏后 0 .5、1、2、4、6、8h的心房有效不应期(AERP2 0 0 、AERP1 50 和 AERP1 30 ) ,用生化方法检测心肌组织内 Ca2 + 含量。结果 :快速心房起搏后快速起搏组的AERP缩短 ,AERP的频率适应不良 ,同起搏前比较差异显著 (P<0 .0 1) ,心肌组织内 Ca2 +含量升高 (P<0 .0 1) ,而卡托普利组 AERP缩短较快速起搏组减轻 ,AERP频率适应性得以维持 ,心肌组织 Ca2 +含量低于快速起搏组 (P<0 .0 5 )。结论 :心房肌组织内钙含量的升高在快速起搏导致的心房电重构中起一定作用 ,卡托普利能减轻钙超载而抑制快速心房起搏所致电重构。

蝙蝠葛碱对家兔急性房颤连接蛋白40重构的影响及其机制

目的 观察快速心房起搏所致急性心房颤动 (房颤 )对家兔心房肌组织Ca2 + 含量和连接蛋白 4 0 (Connexin 4 0 ,Cx4 0 )重构的影响以及钙通道阻滞剂蝙蝠葛碱 (DAU)的干预作用 ,并对其作用机制进行探讨。方法 32只家兔随机分为 3组 :对照组 (n =8)、房颤组 (n =12 )、DAU组 (n =12 )。经颈内静脉将电极置入右心房 ,对照组不予心房起搏 ,另外两组以 6 0 0beat·min-1行快速心房起搏以诱发房颤 ,并且DAU组于快速起搏前 30min按 5mg·kg-1静脉给予DAU ,其余两组则给予等量的生理盐水。用生化方法检测右心耳组织Ca2 + 含量 ,并分别用Westernblot和免疫荧光标记激光共聚焦显微镜检测Cx4 0的含量和分布。结果 房颤组心房组织Ca2 + 含量高于对照组 ,Cx4 0含量低于对照组 (P均 <0 0 1) ,房颤组Cx4 0分布不均一 ;蝙蝠葛碱组Ca2 + 、Cx4 0含量分别低于和高于房颤组 (P均 <0 0 5 ) ,Cx4 0分布不均一的程度较房颤组减轻。结论 快速心房起搏诱发急性房颤可引起家兔心房肌Ca2 + 含量升高、Cx4 0含量降低和分布不均一 ,蝙蝠葛碱能有效抑制Ca2 + 含量升高、减轻Cx4 0重构 ,钙超载可能参与房颤Cx4 0重构。

犬骨骼肌成肌细胞体外分离、纯化及培养方法改良探索

目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性。方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进行原代和传代培养,免疫细胞化学染色鉴定。结果:改良后的培养方法适于获取犬骨骼肌成肌细胞,SKGM培养基适于犬骨骼肌成肌细胞的体外培养。SkMs在细胞密集或低血清分化培养基作用下可融合成肌管。结蛋白(desmin)单克隆抗体(mAb)细胞化学染色鉴定SkMs呈阳性,纯度在90%以上。结论:通过改良后的双酶一步消化法获得的SkMs在合适的培养条件下能够增殖、分化并保持其生物学特性,为其在基因治疗和组织工程中的应用奠定了基础。

从心肌病病因学研究走向临床诊断与治疗实践

心肌病是一组异质性疾病，可分为原发性和继发性二类，是引起心力衰竭和心原性猝死的常见疾病。继发性心肌病是系统性疾病累及的心肌病变，常常有明确的病因，可以针对其原发病进行防治。原发性心肌病是由遗传、非遗传和获得性病因单独或混合引起的心肌病变，常见的心肌病致病原因趋于明确。如何早期诊断心肌病？怎样从心肌病病因学研究走向临床诊断与治疗实践？这是心肌病基础研究与临床实践亟待解决的问题。

急性冠脉综合征诱导单核-巨噬细胞中Notch信号受体1及炎性细胞因子的表达

目的:探讨在急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者外周血单核-巨噬细胞中Notch1分子及炎性细胞因子的表达。方法:以密度梯度离心法分离36例ACS患者、14例稳定型心绞痛患者及30例健康对照者外周血单核细胞,并以氟波酯(PMA)使之转化为巨噬细胞。分别采用实时(RT)-PCR和Western blot测定巨噬细胞中Notch1 mRNA和其蛋白的表达;采用RT-PCR和ELISA测定炎性细胞因子血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA和其蛋白及单核趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA和其蛋白的表达。结果:与对照组比较,ACS患者巨噬细胞中NotchlmRNA和其蛋白的表达明显升高(P<0.05),ACS诱导的VCAM-1和MCP-1 mRNA和二者的蛋白浓度明显增高(P<0.05)。结论:Notch1信号通路及其介导的巨噬细胞天然免疫应答在动脉粥样硬化易损斑块的发生发展中发挥着重要的调节作用。

KTP激光心肌打孔联合血管内皮生长因子转染对犬心功能的影响

目的探讨在KTP激光心肌打孔(TMLR)基础上联合血管内皮生长因子(VEGF)基因转染治疗对急性心肌梗死犬心功能的影响。方法家犬18只,随机均分为单纯心肌梗死组(SMI组)、TMLR组和TMLR+转VEGF基因组(TMLR+VEGF组)。结扎左前降支中段造成急性心肌梗死,TMLR组在梗死区以KTP激光行TMLR,TMLR+VEGF组在TMLR后于孔道边缘心肌内注射PAdTrack/VEGF165裸质粒2mg。术后8周,应用M型、二维及多普勒组织成像(DTl)技术检测左室局部和整体功能。结果①反映左心室整体收缩功能的指标,在SMI组、TMLR组和TMLR+VEGF组依次增大(P<0·05),并且TMLR+VEGF组分别与SMI组、TMLR组比较,差异均有显著性(P<0·05);②反映左室局部功能的主要指标,在以上三组依次增大(P<0·05);③反映心脏舒张功能的指标,在以上三组依次增大,但三组之间无统计学差异意义(P>0·05)。结论KTP激光心肌打孔联合VEGF165基因治疗,能增强KTP激光心肌打孔血运重建的疗效,进一步改善梗死心肌局部功能和整体收缩功能,但对整体舒张功能无明显影响。

白细胞介素-6和白细胞介素-10在急性小鼠巨细胞病毒性心肌炎中的表达

目的研究IL-6和IL-10在小鼠巨细胞病毒性（MCMV）心肌炎中的表达和在心肌保护中的作用。方法60只4周龄BALB／C小鼠随机分为2组：实验组E36只小鼠，腹腔注射巨细胞病毒（MCMV）]和对照组（24只小鼠，注射3T3细胞裂解液）。应用免疫组化方法检测IL-6和IL-10在心肌组织中的表达，用病理切片观察心肌的病变。结果心肌病理结果显示，心肌组织出现灶性或弥散性炎性细胞浸润、心肌细胞的变性和坏死。心肌病理积分显示MCMV心肌炎属轻度炎症。免疫组化技术结果显示，在实验组，IL-6和IL-10蛋白主要表达在炎性浸润细胞、变性或坏死的心肌细胞，而在对照组，仅有IL-6和IL-10蛋白微量表达。结论IL-6和IL-10蛋白在MCMV心肌炎心肌组织中表达，并可能在病毒性心肌炎中起保护心肌作用。

中国扩张型心肌病诊断和治疗指南:创新与转化

《中国扩张型心肌病诊断和治疗指南》依据创新与转化的研究成果,提出扩张型心肌病(DCM)的病因诊断,临床研究证实抗心肌抗体可以预测DCM猝死和死亡。该指南提出针对DCM病因的免疫学治疗,临床试验证实通过药物阻止抗体、免疫吸附抗体和免疫调节治疗可以改善DCM患者心功能和降低病死率。

辛伐他汀对心肌梗死大鼠心室重构的影响

目的采用超声心动图检测评价辛伐他汀对改善大鼠心肌梗死(MI)后心室重构的作用。方法34只大鼠分3组:(1)MI组:仅结扎左冠状动脉前降支(LAD);(2)治疗组:结扎LAD,并用辛伐他汀40 mg.kg-1.d-1进行灌胃;(3)假手术组:开胸,但不结扎LAD。超声心动图检查心脏结构和功能,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定梗死区和非梗死区肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA表达,免疫印迹法和免疫组织化学染色法测定TNF-α蛋白的产生。结果超声心动图显示,MI组与假手术组比较,左心室舒张末期内径(LVEDd)显著增大,分别为(7.5±0.4)mm和(4.5±0.3)mm,短轴缩短率〔FS,分别为(20.5±2.5)%和(51.6±3.1)%〕和射血分数〔EF,分别为(41.4±4.3)%和(85.2±3.7)%〕明显降低(均为P<0.05)。与MI组比较,辛伐他汀显著减轻左心室扩张,改善左心室功能(P<0.05)。MI组TNF-αmRNA表达和蛋白质的产生较假手术组增加(均为P<0.01),而治疗组TNF-αmRNA表达和蛋白质的产生比MI组明显下降(P<0.05)。TNF-αmRNA表达和蛋白质生成与心功能下降呈正相关,辛伐他汀减轻TNF-α基因表达,改善心功能。结论辛伐他汀改善大鼠MI后心室的不良重塑,其机制可能与降低非梗死区和梗死区心肌内TNF-α基因表达和蛋白质合成有关。