心血管外科杂交技术的应用与发展现状

心血管外科杂交技术是微创手术和心导管介入技术相结合的产物。它将以往属于心血管内科范畴的介入技术、器械和影像学方法等引入心脏外科手术中,其目的在于减少治疗的侵入性,提高治疗效果。现对杂交技术在心血管外科中的应用现状及进展,包括冠心病、先天性心脏病、胸主动脉瘤的杂交治疗,以及开展杂交治疗的条件等问题进行了综述。

新型冠状病毒肺炎合并心血管外科急重症相关指南分析及经验总结

新型冠状病毒造成的严重急性呼吸道感染(COVID-19)是目前中国乃至全球的临床关注焦点.世界卫生组织及国家卫生健康委员会(卫健委)均发布了关于COVID-19诊疗的临时指南和管理策略建议.这些综合性指导意见为一线临床工作制定了基本规范.然而心血管外科疾病有其特殊病理生理特点,针对急危重症心血管疾病的外科治疗策略需要专门性指南.自2020年1月16日至2月12日,武汉协和医院心血管外科共完成心血管外科急诊手术13例,围术期成功率100%,基于临床实践体会,我们总结相关经验,并与世卫组织和国家卫健委指南进行对比,希望能与之互为补充,为抗击疫情一线的心血管外科医师治疗急重症患者提供参考.

精细化护理对提高心血管外科护理质量的作用

探讨精细化护理措施在心血管外科围手术期护理中的临床效果及其对患者心理状态的影响。方法:根据护理方式的差异,将我院2019年1月至2019年12月的160例心血管外科检查患者进行回顾性分析,分为常规组和精细护理干预组。比较两组患者的抑郁状态,焦虑状态,护理满意度,手术时间,住院时间,下腰痛,尿潴留和皮下血肿的发生率。结果:护理前两组抑郁,焦虑评分无显着性差异,P>0.05。护理干预后,精细化护理干预组的抑郁和焦虑得分低于常规组。无统计学意义,P<0.05。精细护理干预组的护理满意度(96.91±2.21)分高于常规护理干预组(83.91±0.45)min,P<0.05。精致护理干预组的手术时间和住院时间分别为(5±1.5)h和(5.41±1.45)天。常规组的手术时间和住院时间分别为(4±1.5)h和(7.72±1.21)天。精致护理干预组的背痛,尿潴留和皮下血肿的总发生率低于常规组,差异无统计学意义,P<0.05。结论:对心血管外科检查患者采用精细化护理措施,可以更好地提高护理质量,改善患者的心理状态,值得推广。

探讨心血管外科病区风险以及护理对策

分析和研究风险管理在心血管临床护理中的作用。方法:从2018年8月至2019年4月,将116名患者随机划分为我们中心的心血管外科,分为58人对照组和观察组。观察组接受日常护理,对照组则接受风险护理。在这两种方法中,患者对医务人员的满意度和不良事件的发生率。结果:在监测风险管理小组实施病人后,医务人员的满意度高于对照组,不良事件发生率远远低于不良事件。差异具有统计意义(P<0.05)。结论:风险管理对心血管外科患者产生重大影响。它不仅提高了患者对护理的满意度,减少了有害事件,而且提高了患者的生活质量。值得促进临床宣传和对医务人员的临床使用。

风险管理在心血管外科护理管理中的多中心应用研究

通过分析心血管外科护理部多中心风险管理应用研究,提高护理质量,系统性研究涵盖了2019年2月至2019年10月间住院的80名患者,并对其随机亚群实施了ss20程序,在群体之间的一般信息差异很大(P>0.05)。分析心血管外科护理中的不安全因素,针对研究小组中的患者采取预防预防措施,并对照两组护理错误病例、不良事件发生率和护理满意度的两组相比,在对照组中提供例行的病人护理。结果:研究小组中0%的患者出现护理错误和护理不良,比参考组中17.50%和15.0%低得多(<0.05);研究组的满意度分别为95.0%,对照组的满意度分别为77.50%,各组之间的满意度相差很大(<0.05)。结论:在心血管手术方面,对工作不安全因素的分析,进而采取有针对性的预防措施,可以减少出错率和护理不良,提高对护理的满意度。

组织因子在心血管疾病中的分子机制及其意义

组织因子是外源性凝血途径关键启动因子,内皮细胞、血管平滑肌细胞、单核细胞等在受到不同刺激后通过各自信号转导途径诱导其表达。组织因子在心血管疾病中有着重要意义,利用组织因子反义 RNA、抗组织因子抗体、FⅦai、rTFPI、rNAPc2等抑制其表达已取得一定进展,而组织因子小干扰 RNA 可能成为最有效的手段之一。

PLGA/CS-tPAcDNA静电纺丝血管外支架预防移植静脉再狭窄

目的通过PLGA/CS-tPAcDNA静电纺丝血管外支架进行t-PA基因局部定位转移,探讨其对移植静脉血栓形成和内膜增生的影响。方法60只兔构建颈外静脉-颈总动脉移植模型,制备PLGA/CS-tPAcDNA纳米粒超细纤维复合膜支架,并随机分为基因治疗组(含t-PA基因PLGA/CS静电纺丝血管外支架,n=30)、对照组(PLGA/CS静电纺丝血管外支架,n=30),分别在术后不同的时间点取样,通过免疫印迹、逆转录聚合酶链反应和底物发色法分别检测移植静脉t-PA活性和基因表达,病理形态学观察移植血管新生内膜增生情况。结果在术后2、5、14、28、60 d,基因治疗组移植静脉可检测到外源性t-PA mRNA的表达,其活性变化分别为(390.42±63.71)、(368.47±54.21)、(275.23±58.32)、(170.75±60.52)和(63.52±23.21)U/g。对照组中对应时间点则t-PA无活性。术后5、14、28、60 d,基因治疗组移植静脉镜下显示新生内膜面积、内膜中膜面积比均明显小于对照组。结论PLGA/CS-tPAcDNA静电纺丝血管外支架可介导t-PA基因局部治疗,可影响移植静脉管腔内血栓形成,抑制移植静脉内膜增殖,继而有效降低移植静脉再狭窄的发生。

Stanford A型主动脉夹层的外科治疗

目的 分析报道StanfordA型主动脉夹层这一凶险复杂疾病的外科治疗方法。方法 2006年6月至2007年9月采用手术治疗StanfordA型主动脉夹层患者24例，经增强血管CT（CTA）、磁共振扫描（MRI）、心脏彩色多普勒（UCG）确诊。无名动脉或右腋动脉＋腔房管插管建立体外循环，涉及弓部置换的15例均采用深低温（鼻咽温度16～18℃）停循环选择性脑灌注。依据内膜破口位置、夹层累及的部位、有无主动脉瓣关闭不全采用不同的手术方式，其中Wheat术2例、David术1例、Bentall术6例、Bentall术＋半弓置换3例、Bentall术＋全弓置换＋支架象鼻5例（其中合并CABG3例）、升主动脉＋全弓置换＋支架象鼻7例。结果 平均体外循环时间（197．3±28．3）min，平均心肌阻断时间（86．1±10．8）min，深低温停循环选择性脑灌注时间（41．2±8．7）min。死亡2例（8．3％），1例患者出现一过性脑功能紊乱，1例出现声音嘶哑。结论 外科手术治疗StanfordA型主动脉夹层明显降低死亡率。消除假腔、置换病变血管、重建分支血管血供是手术原则和治疗思考顺序。手术治疗加血管内支架植入这一杂交技术成为StanfordA型主动脉夹层的经典术式。

先天性冠状动脉瘘的外科治疗

目的总结先天性冠状动脉瘘的外科治疗及相关经验。方法回顾分析武汉协和医院心血管外科2000年1月至2011年5月54例先天性冠状动脉瘘患者,其中男性35例,女性19例。平均年龄(23.0±21.4)岁。51例患者瘘口为单个,3例为多发瘘口。共计57个瘘口。其中11个汇入右心室(19.3%),16个汇入右心房(28.1%),23个汇入肺动脉(40.3%),2个汇入左心室(3.5%),5个汇入冠状静脉(8.8%)。有34个瘘口来源于右冠状动脉,23个瘘口来源于左冠状动脉,其中有1例多发瘘口,分别起源于左、右冠状动脉。有3例罕见病例为回旋支汇入右房。合并有其它畸形的患者22例(38.9%)。手术方式:34例在体外循环下行经心腔或肺动脉瘘口缝闭术,其中4例因瘘口较大,用补片予以修补,以避免张力过高;14例行冠状动脉切开瘘口修补;6例患者行单纯结扎。结果患者无死亡。术后随访(3.0±2.3)年,心功能均为Ⅰ～Ⅱ级。无残余漏发生。3例患者随访中发现瘘口残端血栓形成。结论有症状或有明显左向右分流的冠状动脉瘘患者,均应争取手术治疗。根据病变的病理特点、有无心内畸形决定手术方式。冠状动脉瘘手术效果优良。

主动脉缩窄合并心内畸形的外科治疗策略

目的总结主动脉缩窄合并心内畸形的外科治疗经验。方法武汉协和医院心血管外科2003年1月至2008年1月用3种术式共行主动脉缩窄合并心内畸形矫治18例。分期手术4例,一期主动脉缩窄修复,Ⅱ期室间隔缺损闭合(组Ⅰ);双切口一期手术8例,在循环阻断或局部灌注心肺转流下行主动脉缩窄修复和室间隔缺损闭合(组Ⅱ);正中切口一期手术6例,正中开胸非心肺转流下缩窄修复,同期闭合室间隔缺损(组Ⅲ)。结果组Ⅰ中死亡3例,1例出血心跳骤停,2例术后低心排综合征。组Ⅱ2例死于术后多器官功能衰竭。组Ⅲ1例死于术后低心排综合征。12例术后随访6个月～4年,残余轻度主动脉缩窄,组Ⅱ2例、组Ⅲ1例,均无症状且无需再次手术。各组均未发现体循环高血压、动脉瘤形成和主动脉瓣返流等并发症。结论主动脉缩窄合并心内畸形的外科手术策略主要根据心内畸形和缩窄病变特点决定,能一期手术矫治者最好一期手术,其效果优于分期手术。

骨桥蛋白特异性短发夹RNA抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的应用特异性短发夹RNA(shRNA)抑制血管平滑肌细胞骨桥蛋白基因表达,观察其对体外培养的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法根据大鼠骨桥蛋白基因设计靶序列,采用体外转录方法获取shRNA,以此转染血管平滑肌细胞,采用逆转录-聚合酶链反应、Western blot等方法检测骨桥蛋白mRNA和蛋白的表达;用MTT法检测shRNA对血管平滑肌细胞增殖的影响。结果与未转染特异性shRNA细胞相比,转染shRNA的细胞中骨桥蛋白mRNA、蛋白表达量均明显降低,抑制率分别为(76.3±3.4)%和(68.7±4.6)%。血管平滑肌细胞的增殖也受到明显的抑制。结论设计的靶序列能有效沉默血管平滑肌细胞骨桥蛋白基因的表达,为进一步构建载体和体内研究奠定了基础。

大鼠SOCS3基因重组腺病毒载体的构建及转染血管平滑肌细胞后的表达

目的构建携带大鼠SOCS3基因的重组腺病毒载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,评价其转染效果,为血管增殖性疾病转基因治疗的实验研究奠定基础。方法用BamHⅠ和EcoRⅠ将目的基因pUC57-Simple-rSOCS3及腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-4(带GFP标记)行双酶切。回收酶切质粒的目的片段进行连接,产物转化至DH5α感受态。提取质粒酶切鉴定正确后测序。通过LR体外同源重组将rSOCS3表达框构建至pAd/PL-DEST腺病毒表达载体上。将腺病毒线性化后转染HEK293细胞包装腺病毒,PCR鉴定此腺病毒中是否含有rSOCS3基因。放大培养并收集病毒,TCD法测定病毒滴度。将此病毒感染大鼠血管平滑肌细胞,荧光显微镜观察感染效率,real-time PCR及免疫印迹检测SOCS3mRNA及蛋白表达。结果 rSOCS3腺病毒穿梭质粒酶切鉴定正确,测序与rSOCS3基因库中的序列完全相符。PCR鉴定pAd/PL-DEST腺病毒表达载体成功携带目的基因rSOCS3。TCD法测定的最终滴度为2×1010pfu/mL。荧光显微镜观察此病毒感染血管平滑肌细胞的效率在80%以上,real-time PCR及免疫印迹检测结果显示血管平滑肌细胞中SOCS3mRNA及蛋白表达明显上调。结论成功构建携带大鼠SOCS3基因的腺病毒载体,并在血管平滑肌细胞中高表达,为血管增殖性疾病转基因治疗的实验研究奠定了基础,具有一定的应用价值。

丹皮酚对人胶质母细胞瘤细胞中血管内皮生长因子表达的影响

目的研究丹皮酚(paeonol,Pae)对人胶质母细胞瘤细胞U251中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法以实时定量PCR法检测VEGF转录水平,以Western blot检测VEGF表达水平。结果 1Pae可呈剂量依赖性下调U251细胞中VEGF的转录水平,当Pae作用浓度分别为47、94、188、376、752和1 504μmol/L时,对U251细胞VEGF mRNA的抑制率分别为29.6%、43.94%、73.78%、79.49%、83.11%和88.06%;2Pae对U251细胞VEGF转录的抑制作用随着时间的延长而逐渐增强,在188μmol/L浓度下,当Pae作用时间分别为4、12和24h时,对U251细胞VEGF mRNA的抑制率分别为67.13%、71.33%和82.04%;3Pae可显著降低U251细胞VEGF蛋白的表达,以47、188、376、1 504μmol/L浓度的Pae分别作用U251细胞24h后,VEGF蛋白的表达水平量明显降低,并呈剂量依赖性减弱,以上浓度Pae对U251细胞VEGF蛋白表达的抑制率分别为33.09%、73.93%、81.23%和87.85%。结论 Pae可显著降低人胶质母细胞瘤细胞中VEGF的转录及表达,有可能通过下调VEGF表达而干预人胶质母细胞瘤细胞的血管新生及化疗敏感性。

化学合成小干扰核糖核酸抑制大鼠血管平滑肌细胞组织因子表达

目的:探讨血管壁组织因子小干扰核糖核酸(siRNA)对大鼠血管平滑肌细胞组织因子基因沉默作用的可行性和有效性。方法:设计并合成针对大鼠组织因子的25 bp双链siRNA分子。使用组织因子siRNA、对照siRNA转染大鼠血管平滑肌细胞,同时设立空白对照,实验共分6组(各组n=5)。荧光显微镜观察转染效率。血小板源性生长因子-BB刺激血管平滑肌细胞后逆转录多聚酶链反应检测组织因子信使核糖核酸表达,免疫印迹和免疫组化检测组织因子蛋白表达。结果:siRNA成功转染到血管平滑肌细胞,转染效率约(90.0±2.3)%。3对候选siRNA筛选出基因抑制效率最高一对,与阴性对照组相比,转染24 h组织因子信使核糖核酸表达减少(86.0±0.6)%,转染48 h蛋白质印迹分析组织因子蛋白表达减少(92.0±1.0)%,同时免疫组化检测组织因子表达明显减弱。结论:RNA干扰能明显下调大鼠血管平滑肌细胞组织因子表达。

RNA干扰抑制血管平滑肌细胞MT1-MMP基因表达的实验研究

目的探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)shRNA真核表达载体(pGenesil-1-MT1-MMP)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)MT1-MMP基因mRNA表达及蛋白表达的影响。方法构建质粒表达载体pGenesil-1-MT1-MMP和pGenesil-1-HK;实验分为3组:空白对照组,阴性对照组(加入pGenesil-1-HK),RNA干扰(RNAi)组(加入pGenesil-1-MT1-MMP)。用脂质体瞬时转染VSMC,48 h后通过荧光显微镜观察转染效果,流式细胞仪检测转染效率。于转染后72 h采用RT-PCR方法检测MT1-MMP mRNA表达水平,用Western blot方法检测MT1-MMP蛋白质表达水平。结果瞬时转染VSMC 48 h后通过流式细胞仪检测转染效率高达85.5%,转染pGenesil-1-MT1-MMP质粒72 h后,RNAi组MT1-MMP mRNA及蛋白质水平明显下调(P<0.05)。结论靶向MT1-MMP的短发夹RNA质粒能够高效地转染入VSMC,并能有效下调MT1-MMP基因mRNA和蛋白的表达。

共价结合血管内皮生长因子促进内皮祖细胞在去细胞瓣上的粘附和增殖

目的对去细胞主动脉瓣进行聚乙二醇(PEG)交联和血管内皮生长因子(VEGF)共价结合,以改善去细胞主动脉瓣生物学性能。方法枝化状聚乙二醇末端的丙烯酰基与引入到去细胞主动脉瓣上的巯基,通过迈克尔加成反应完成对去细胞主动脉瓣的PEG交联;通过PEG交联去细胞主动脉瓣上的未饱和丙烯酰基与VEGF中半胱氨酸残基上的巯基发生另一个迈克尔加成反应,对去细胞主动脉瓣进行VEGF共价结合,酶联免疫吸附试验和免疫荧光测定VEGF修饰效果;在去细胞主动脉瓣、PEG交联去细胞主动脉瓣和VEGF共价结合的PEG交联去细胞主动脉瓣上种植内皮祖细胞,培养10 d后行瓣膜上DNA含量测定、苏木素-伊红染色和扫描电镜。结果免疫荧光和ELISA检测显示:每片PEG交联去细胞主动脉瓣最大结合(908.94±0.27)pg VEGF;与去细胞主动脉瓣和PEG交联去细胞主动脉瓣相比,VEGF共价结合的PEG交联去细胞主动脉瓣明显促进内皮祖细胞的黏附和增殖,并且可在瓣膜表面形成一层连续的单细胞层。结论借助PEG,VEGF能有效地共价结合去细胞主动脉瓣,促进细胞的粘附和增殖,有利于组织工程心脏瓣膜的构建。

千例室间隔缺损的外科治疗

目的:总结单纯性室间隔缺损外科治疗的经验教训,提高对本病的治疗水平。方法:回顾性分析1006例室间隔缺损的临床资料。男636例,女370例;年龄3月-47岁(8.56±7.35)岁;漏斗部188例(18.69％),膜周部812例(80.71％),其他6例(0.6％)。均在体外循环下行室缺修补术。结果:术后因残余分流再次手术4例;术后死亡5例(0.50％),其中4例小于3岁,均合并中到重度肺动脉高压,原因有:低心排,呼吸衰竭,MOSF等。结论:准确诊断、适应证的把握、手术技术的改进对减少术后并发症的发生率很重要。

转导血管内皮生长因子预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)预防血管成形术后再狭窄。方法建立动脉粥样硬化兔模型,利用球囊在该模型腹主动脉导入pcDNA3.0/hVEGF165(n=10),对照组导入空载体(n=10)。采用RT-PCR法检测外源VEGF基因的表达。术后2、4周观察转导外源基因对血管内皮修复的影响。术后1、2、4周行MRI检查,观察左肾动脉开口处上段被扩张腹主动脉的管腔面积变化。结果利用球囊导管能成功转导pcDNA3.0/hVEGF165,治疗组和对照组完成内皮修复的时间分别为2周和4周,术后2周治疗组和对照组的管腔面积分别为(7.95±1.42)mm2和(6.74±1.01)mm2,术后4周分别为(7.40±2.29)mm2和(2.21±1.44)mm2。结论在动脉粥样硬化兔模型局部血管利用球囊导管能成功地转导VEGF基因,有效促进局部血管内皮细胞的生长,取得抑制局部血管管腔狭窄的作用,这对于防止血管介入术后再狭窄发生具有十分重要的意义。

血清血管内皮细胞生长因子和大鼠心脏移植急性排斥反应的关系

目的观察血管内皮细胞生长因子在大鼠心脏移植急性排斥期中的血清表达及与排斥反应的关系。方法实验分为对照组和CSA组(n=14)。采用颈部心脏移植术式建立模型,手术后分别经胃管给予生理盐水及CSA干预。常规监测排斥反应发生情况。每组7只用于观察移植物存活时间,7只用于动态抽取血液标本,样本采用双抗体夹心法检测血清VEGF表达水平。结果CSA组移植心存活时间(21.1±2.9)d长于对照组(12.4±2.3)d(P<0.01)。对照组血清VEGF表达强度强于CSA组(P<0.05)。结论VEGF的表达和移植心的炎性浸润以及急性排斥有密切关系。