miR-455-5p对肾细胞癌增殖凋亡及侵袭的影响及机制研究

目的研究微RNA 455-5p(miR-455-5p)对肾细胞癌增殖、凋亡及侵袭的影响及机制。方法收集2018年1月至2020年12月该院泌尿外科收治并接受肾细胞切除术的60例肾细胞癌(RCC)及癌旁组织标本和细胞系作为研究对象,采用定量反转录聚合酶链反应测定miR-455-5p在RCC、癌旁组织及细胞系中的表达。对Caki-2细胞系采用Lipofectamine^(TM) 3000试剂盒分别转染miR-455-5p mimics及Scramble序列,并分别命名miR-455-5p mimics组和Scramble组。细胞增殖能力测定采用MTT实验[结果以_(490 nm)处吸光度(A)值表示],细胞凋亡能力测定采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术,细胞侵袭能力测定采用Transwell实验。采用Western blot检测RAB18蛋白表达,Target scan软件及双荧光素酶实验用于预测及验证miR-455-5p与RAB18的靶向关系。结果miR-455-5p在肾癌细胞系的表达水平均明显低于正常肾上皮细胞系HREpiC,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-455-5p在RCC癌组织表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。miR-455-5p mimics组miR-455-5p相对表达水平明显高于Scramble组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-455-5p mimics组转染24 h后A_(490 nm)值与Scramble组比较,差异无统计学意义。miR-455-5p mimics组转染48、72、96 h后A_(490 nm)值均明显小于Scramble组(P<0.05)。miR-455-5p mimics组细胞凋亡率明显高于Scramble组,侵袭细胞数明显少于Scramble组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-455-5p与RAB183'-UTR区序列可靶向结合。RAB18是miR-455-5p的靶基因。结论miR-455-5p在肾细胞癌中下调表达,上调miR-455-5p可抑制肾细胞癌增殖和侵袭,并促进凋亡,机制可能与靶向下调RAB18蛋白表达有关。