结肠癌细胞凋亡与增殖的平衡及其与预后的关系

背景与目的:人体正常组织器官中,特定组织中凋亡与增殖细胞维持着动态平衡,一旦凋亡与增殖的平衡被打破,将导致细胞的恶性转化和肿瘤的发生。我们通过研究结肠癌细胞和淋巴细胞演进过程中凋亡与增殖平衡机制的变化,及其与患者生存的关系,探讨结肠癌的发生、发展规律。方法:采用低分子量DNA抽提后荧光染料染色法(Sub G1法)和Ki-67/DNA双参数法,分别定量分析凋亡群体和增殖群体。应用激光共聚焦显微镜对组织细胞的增殖进行形态学观察,Kaplan-M eier法分析生存率。结果:对照组细胞、腺瘤细胞、肿瘤组Dukes蒺A期、B期、C+D期细胞中,凋亡指数/增殖指数(apoptosis index/proliferating index,AI/PI)分别为0.45±0.19、0.30±0.07、0.29±0.11、0.28±0.10和0.26±0.07。对照组的AI/PI大于其余4组(P<0.01)。在结肠癌细胞的大小、类型、分化程度、Dukes蒺分期和淋巴结转移等临床病理特征中,AI/PI总体呈下调的趋势。正常人和肿瘤患者外周血淋巴细胞AI/PI分别为0.49±0.12和0.64±0.11。肿瘤患者淋巴细胞的AI/PI大于对照组(P<0.01)。用激光共聚焦显微镜可观察到结肠对照组、腺瘤和肿瘤组织中Ki-67的表达。根据AI/PI的中位数值0.285,将结肠癌患者分为≥0.285组和<0.285组。经log-rank检验两组患者生存时间无显著性?

全反式维甲酸对HL-60细胞分化和凋亡的影响

背景与目的:用全反式维甲酸(alltransretinoidacid,ATRA)治疗早幼粒细胞性白血病(premyeloidleukemia,M3)在肿瘤治疗史上是一个重要里程碑。已有研究表明,ATRA治疗白血病的机理是诱导白血病细胞向成熟细胞方向分化,然而人们对分化的肿瘤细胞最终去向还不完全清楚。本实验进一步探讨ATRA诱导HL-60细胞分化和凋亡的关系。方法:以分化诱导剂ATRA(终浓度为10μmol/L)作用不同时间的HL-60细胞为检测对象,应用流式细胞仪分析细胞表面的分化标志物及细胞周期;经碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色后,激光共聚焦显微镜下对已分化细胞进行形态学确认;应用流式细胞仪检测药物诱导后不同时间点的细胞凋亡。结果:(1)随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞体积逐渐增大,在72h后,被诱导细胞开始表达分化标志物CD11b并出现细胞核型的变化;(2)在药物诱导96h后,细胞开始出现了凋亡峰,而在药物诱导72h后脱药培养8h,则可以出现高于96h的凋亡峰。结论:ATRA并不能诱导HL-60细胞完成终端分化,但是该药可以诱导白血病细胞向成熟方向分化,而且已分化的肿瘤细胞于发生凋亡。

不同组织来源临床肿瘤主要细胞周期素表达类型的研究

目的观察人类主要细胞周期素(Cyclin D1、E、A、B1)在临床肿瘤细胞中表达特征并进行分类,探讨其对临床肿瘤分类的可行性及潜在意义。方法用流式细胞术(FCM)双参数法半定量检测161例恶性肿瘤手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达,根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征,将肿瘤细胞主要Cyclin表达分为不同类型。结果细胞周期外Cyclin(D1)及周期内Cyclins(E、A、B1)在临床肿瘤细胞中表达无组织差异性(P>0.05)。其异常表达大致可归为5种类型:Ⅰ型Cyclin(D1、E、A、B1)均高表达;Ⅱ型Cyclin D1低表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式高表达;Ⅲ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式高表达;Ⅳ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式低表达;Ⅴ型Cydin(D1、E、A、B1)均不表达;再根据各型中不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型。a亚型:Cyclin(E、B1)表达为主;b亚型:Cyclin E表达为主;C亚型:Cyclin B1表达为主;d亚型:Cyclin(E、A、B1)表达为主。肿瘤细胞主要Cyclin表达类型及相应亚型分布无组织来源的差异性(P>0.05)。结论主要Cyclins表达类型可以作为不同组织来源肿瘤分类的依据,可能是体现不同肿瘤细胞周期破坏共同特征较为客观分类方法。

结直肠肿瘤形成过程中主要细胞周期素D1、E、A、B1的表达

目的观察人类主要细胞周期素[（Cyclins）D1、E、A、B1]在不同结直肠组织中的表达，探讨其在结直肠肿瘤形成、发展过程中的表达规律。方法采用流式细胞术（FCM）双参数法半定量检测30例正常结肠黏膜组织，28例结直肠腺瘤及121例结直肠癌组织中Cyclin（D1、E、A、B1）及细胞核增殖抗原（Ki一67）表达。根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及表达特征，将其表达分为不同类型，结合临床病理学资料进行统计学分析。结果结肠黏膜底部、中间层、表层组织细胞，Cyclin（E、B1）表达阳性率及水平由高到低直至无表达，差异有统计学意义（P〈0．01）；Cyclin（E、B1）表达与细胞增殖活性（以Ki-67为指标）正相关（P〈0．05）；Cyclin（Dl、A）仅表达于底层增殖细胞，表层完全分化细胞不表达Cyclins。结直肠腺瘤组织细胞Cyclins的表达主要分3型：I型Cyclin（E、B1）低表达，Cyclin（D1、A）无表达。Ⅱ型Cyclin（E、B1）高表达，Cyclin（Dl，A）低／无表达；HI型Cyclin（D1，E，A，B1）高表达；Cyclins表达形式与结直肠腺瘤大小、病理类型及腺瘤增殖活性明显相关（P〈0．05）。结直癌细胞Cyclins异常表达大致可归为5型：I型Cyclin（D1、E、A、B1）均高表达；Ⅱ型CyclinD1低表达，Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达；III型CyclinDI不表达，Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达；1V型CyclinD1不表达，Cyclin（E、A、B1）低表达；V型Cyclin（D1、E、A、B1）均不表达。I到V型结、直肠癌淋巴结转移率、转移程度、肿瘤浸润程度及TNM分期Ⅳ期呈上升趋势，Cyclins表达类型与结、直肠癌以上临床病理因素相关（P〈0．05）。结论正常结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins（以CyclinE、B1为主）呈衰减规律性变化，可能与细胞有限增殖和定向分化的调控有关。Cyclins表达水平逐步增高可能与结直肠腺瘤的形成、增生扩大有关，并促进腺瘤上皮内瘤变级别的增加直至癌变。在结直肠癌瘤形成后主要Cyclins的表达水平随结直肠癌的进展呈下降趋势，其在结直肠癌细胞中异常表达类型与结直肠癌不同临床病理特征有关。

结直肠癌细胞主要Cyclins（D1、E、A、B1）表达类型与其生物学行为的关系

目的 观察人类主要细胞周期素（Cyclin D1、E、A、B1）在结直肠癌中非时相表达特征,探讨主要细胞周期素表达分型与结直肠癌生物学行为的关系.方法 用流式细胞术（FCM）双参数法半定量检测83例结直肠癌手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达.根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征,将其表达分为不同类型及亚型结合临床病理学资料进行分析.结果 结直肠癌细胞Cyclin（D1、E、A、B1）异常表达大致可归为5种类型：Ⅰ型Cyclin（D1、E、A、B1）均高表达;Ⅱ型Cyclin D1低表达,Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达;Ⅲ型Cyclin D1不表达,Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达;Ⅳ型Cyclin D1不表达,Cyclin（E、A、B1）不同形式低表达;Ⅴ型Cyclin（D1、E、A、B1）均不表达;Ⅱ型→Ⅳ型根据不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型.a亚型：Cyclin（E、B1）表达为主;b亚型：Cyclin E表达为主;c亚型：Cyclin B1表达为主;d亚型：Cyclin（E、A、B1）表达为主.主要Cyclins表达类型与结直肠癌淋巴结转移率、转移程度、浸润程度明显相关（P＜0.01）.主要Cyclins表达类型Ⅰ→Ⅴ型结直肠癌淋巴结转移率、转移程度、浸润程度呈上升趋势.结直肠癌的生长方式和细胞分化程度与主要Cyclins表达类型的亚型明显相关（P＜0.01）.结论 主要Cyclins（D1、E、A、B1）表达类型与结直肠癌生物学行为有关,可以作为一种体现结直肠癌生物学行为较为客观的分类方法.