裸鼠人肝癌模型模拟临床化疗实验研究

目的探讨人肝癌组织裸鼠原位种植模型体内筛选供瘤病人敏感的化疗药物可行性。方法荷瘤鼠随机分为对照组和表阿霉素(E-ADM)、5氟脲嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)四组。腹腔化疗每周1次,共4次。B超观测移植瘤大小,化疗结束1wk后处死荷瘤鼠,分别用免疫组化(SP)、RT-PCR、Westernblot方法检测移植瘤MDR1和LRP蛋白及其mRNA表达情况。选择敏感和低致多药耐药的化疗药物用于供瘤病人。结果3个化疗组肿瘤体积均逐渐缩小,与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。各检测方法均示E-ADM组MDR1和LRP蛋白及其mRNA表达升高,差异有显著性(P<0.05)。5-Fu组LRP表达升高,差异有显著性(P<0.05)。MMC和5-Fu对供瘤病人化疗一个疗程,病人骨痛症状消失或明显减轻,SPECT示个别骨转移灶消失,多个骨转移灶缩小。结论E-ADM化疗可以诱导肿瘤组织MDR1和LRP表达升高;5-Fu化疗则可诱导LRP表达升高。裸鼠原位种植瘤敏感的化疗药物同样供瘤病人也敏感。

Survivin在NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡中的作用

目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位观察,凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染前后NF-κB活性变化;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白Survivin的改变。结果NF-κB圈套寡核苷酸转染后定位于细胞核内,EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降。与未处理组、转染错义组相比,转染NF-κB圈套寡核苷酸组的HepG2细胞凋亡率增加,Survivin蛋白表达下调[(39.8±1.9)、(42.7±2.5)vs(20.1±3.1)]。结论NF-κB圈套寡核苷酸具有促进肝癌细胞HepG2凋亡的作用,其机制可能与下调Survivin的表达有关。

Twist在人肝癌细胞系与正常肝细胞系中的表达差异

目的研究Twist在人肝癌细胞系HepG2和人正常肝细胞系L02中的表达及其作用。方法利用荧光定量PCR技术及免疫印迹法分别检测TwistmRNA及Twist蛋白在人肝癌细胞系HepG2及人正常肝细胞系L02中表达的差异。结果HepG2细胞的TwistmRNA表达水平为L02的2.36倍(P<0.05),蛋白水平为(3.13±0.21)倍(P<0.05)。结论Twist在肝癌细胞系中的过高表达可能与肝癌的发生、发展有关。

射频消融治疗肝癌216例

目的 探讨肝癌射频消融治疗的有效性和安全性。方法 对216例肝癌共行252次射 频消融治疗,观察射频消融治疗后病人的不良反应、肝功能、甲胎蛋白(AFP)水平、肿瘤血供变化、CT 影像学变化及1年生存率。结果 射频消融治疗后病人的不良反应发生率为82%,56%的病人有轻 度的转氨酶升高,射频消融治疗前AFP升高者有85%的病人有程度不同的下降。76%的病人射频消 融治疗后彩色多普勒超声观察肿瘤血供明显减少或消失。射频消融治疗后1～6个月肝脏增强CT 扫描全部病人均有程度不同的肿瘤液化坏死,不强化者占56%,病人1年生存率为84%。结论 射 频消融是治疗肝癌的一种安全有效的方法。

贯穿胰腺纵向“U”形缝合法行空肠内翻套入式胰肠吻合术

胰十二指肠切除术术后胰瘘的发生率一直居高不下[1-4]。据文献报道,目前这种手术术后胰瘘的发生率为5%~60%,平均为30%,依然较高。而一旦发生胰瘘,病死率在16%左右。因此,胰肠吻合成败与否,直接关系到胰十二指肠切除手术的后果。近30年来,尽管外科学者们为了简化手术操作、减少术后并发症特别是术后胰瘘的发生率做出了许多努力,但临床应用效果并没有明显改善。

多排螺旋CT三维重建在肝脏外科中的应用

目的 探讨多排螺旋CT三维重建在肝脏外科中的应用价值。方法 2 0 0 2年 4月至 2 0 0 3年 10月对2 0例肝脏肿瘤病人术前行 16层螺旋CT增强扫描 ,并在CT工作站上应用多排螺旋CT表面容积重建及多平面容积重建软件行肝动脉、门静脉和肝静脉的三维影像重建 ,测量全肝体积、肝肿瘤体积及拟切部分肝脏体积 (包括肿瘤体积 ) ,观察病人术后血清谷丙转氨酶、总胆红素、血氨水平及腹水情况 ,计算病人残肝体积与标准肝体积之比。结果 2 0例病人经肝血管三维重建后均能从各个角度显示肝动脉、门静脉和肝静脉结构 (肝动脉可显示 2～3级分支 ,门静脉 3～ 4级分支 )、肝动脉变异情况、肿瘤与周围血管的关系。经三维重建后测得预切除肝脏体积平均为 4 78 75cm3 ,肿瘤体积平均为 374 6 5cm3 ,与手术切除标本所测体积基本符合 (P >0 0 5 )。残肝体积与标准肝体积之比小于 5 0 %时 ,病人术后肝功能重度损害的可能性增加。结论 多排螺旋CT三维重建技术能帮助术者在术前更直观地了解肝血管解剖关系、肿瘤与周围血管关系 ,对制定更完善的手术方案具有实用价值。多排螺旋CT三维重建可较准确测量肝体积 ,残肝体积与标准肝体积比值可帮助预测术后肝功能恢复情况。

肿瘤坏死因子α对人肝癌多药耐药逆转作用的实验研究

目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养的人肝癌耐阿霉素细胞系(HepG2/ADM)多药耐药现象的逆转作用。方法不同浓度(100、500及2500 U/ml)TNF-α作用于 HepG2/ADM 细胞72 h 后进行以下试验:用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测各组多药耐药相关基因(MDR1)及脂质过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)基因的 mRNA 表达情况;用罗丹明外排法检测各组 P-糖蛋白活性;用 Annexin V 检测0.5 mg/L 阿霉素诱导的各组细胞凋亡情况;利用 MTT 法检测各组耐药性的改变。结果 TNF-α能诱导 HepG2/ADM 细胞的 MDR1基因表达下调,PPAR-α基因表达上调,且能增加阿霉素诱导的凋亡细胞的比例及细胞毒作用。结论 TNF-α可能分别通过抑制 MDR1表达及促进 PPAR-α表达而逆转 HepG2/ADM 细胞的耐药性。

肝内胆管结石合并肝胆管癌32例诊治分析

目的探讨肝内胆管结石合并肝胆管癌的临床特点和诊治经验。方法对1993-2007年间华中科技大学同济医学院附属同济医院肝胆胰外科研究所收治的32例肝内胆管结石并发肝胆管癌病例的临床资料进行回顾性分析。结果32例肝胆管癌占同期肝内胆管结石病人的1.9%,术前确诊率为59.4%(19/32)。其中周围型胆管癌占43.8%(14/32),肝门部胆管癌占50%(16/32)。肿瘤根治性切除率为31.3%(10/32),姑息性手术46.9%(15/32)。有随访资料的28例中,根治组平均存活时间22个月,姑息手术组平均存活9个月。结论肝内胆管结石造成的胆管系统内慢性炎症环境可能是诱发胆管癌的重要原因。对于有长期肝内胆管结石病史以及胆道手术史的病人,必须警惕并发肝胆管癌的可能。该病的早期诊断和根治性切除率低,预后差。

裸鼠原位种植人肝癌模型化疗指导临床用药研究

以手术为主的个体化综合治疗原发性肝癌（PLC）的策略已成为当今的共识，但化疗前患者对化疗药是否敏感报道尚少。我们在自己建立的人肝癌组织裸鼠原位种植模型上，进行了临床常用化疗药物的体内筛选。

让医学归于大众 用科普护佑民生

我非常有幸师从我国医学大师裘法袓院士。在与恩师的相处过程中,他刻苦钻研、追求卓越、勇于创新、勇攀高峰的科学家精神影响了我一生的事业追求。2020年,武汉遭受了突如其来的新冠肺炎疫情,让我们医务工作者一下子有些措手不及。因为大家对这种新冠病毒导致的肺炎认知不足.

缺氧诱导因子1α依赖性缺氧诱导人肝癌细胞多药耐药相关基因的表达及意义

目的探讨缺氧环境下人肝癌细胞中多药耐药相关基因和缺氧诱导因子1α(HIF1α)的表达和意义,从而部分阐明肝细胞癌发生多药耐药的机制,为逆转肝癌耐药提供新的分子靶点。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分别行不同时间低氧培养和转染HIF1α/PCDNA3质粒;应用荧光定量聚合酶链反应技术和蛋白免疫印迹技术分别检测每组HepG2细胞中多药耐药相关基因(mdr1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药相关蛋白(LRP)在mRNA和蛋白水平的表达。结果在缺氧组,随着缺氧时间的延长HepG2细胞中多药耐药相关基因mdr1、MRP1和LRP的表达均逐渐增高,且以MRP1变化更为显著;而且这些多药耐药相关基因的表达升高与缺氧诱导因子1α的表达呈同步化改变。在HIF1α/PCDNA3质粒转染细胞中这些多药耐药相关基因的表达亦明显升高。结论缺氧可通过核转录因子HIF1α上调肝癌细胞内mdr1,LRP、MRP1等多药耐药相关基因的表达,从而使肝细胞癌获得多药耐药性。生长局部微环境的缺氧是诱导肝癌产生多药耐药性的重要原因之一。核转录因子HIF1α和这些多药耐药相关基因将可能成为逆转肝癌耐药的新的分子靶点。

双“U”形贯穿缝合法行胰腺-空肠端端套入式吻合

胰十二指肠切除术应用于临床已有半个多世纪，由于其切除器官多、创伤大，术后并发症发生率和病死率高，严重影响其推广应用。近20年来，尽管外科学者们为了简化手术操作、减少术后并发症特别是术后胰瘘的发生率做出了许多努力，但术后胰瘘的发生率依然高达5％～25％。而一旦发生胰瘘，手术死亡率高达20％～50％。显然，建立一种安全、简便的胰肠吻合方法非常重要。

肝切除术中大出血的原因及防治

目的 分析肝切除术中大出血的原因并探讨其防治策略。 方法 以术中出血量达到或超过 10 0 0ml为大出血标准 ,回顾性分析 195 5～ 2 0 0 0年 436 8例肝切除术大出血的原因及处理。结果 436 8例肝切除术中 ,2 86例 ( 6 5 %)发生术中大出血。主要原因是大血管损伤、肝硬化门静脉高压症、肝功能不良及肿瘤与周围脏器的广泛粘连等。处理方法 :修补、缝扎损伤的血管 ;缝扎或离断出血的曲张静脉 ;彻底结扎肝断面血管并褥式缝合肝断面 ;阻断肝门 ,快速切除破裂的肿瘤等。术中输注纤维蛋白原、创面热盐水湿敷和 (或 )涂抹生物胶以及氩气刀热凝、纱布填塞压迫等。 结论 轻柔操作、避免强力牵拉肝脏可减少损伤大血管或肿瘤破裂所致的大出血 ;常温下第一肝门阻断可有效减少切肝时的出血量 ;癌肿与周围器官或组织广泛粘连者宜采用原位肝切除术 ;凝血机制异常而致的创面广泛渗血 ,大纱布填塞压迫仍是一种有效的止血方法。

ERK/MAPK通路参与肝癌产生多药耐药的胞内信号传导

目的探讨微环境诱导肝癌产生多药耐药的胞内信号传导途径。方法分别使HepG2细胞在缺氧、低糖环境下生长或稳定整合 HBX 基因,运用 Western 蛋白印迹法检测这些细胞内 ERK/MAPK 的活性。用 ERK/MAPK 特异性阻断剂 U0126处理这些细胞后,用 Western 蛋白印迹法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和多药耐药相关蛋白的表达变化,逆转录聚合酶链反应和免疫细胞化学技术分别检测 HIF-1α在 mRNA 水平表达量和部位的改变。结果不同环境下生长的 HepG2细胞中,磷酸化/非磷酸化 ERK/MAPK 比例均有不同程度的增高。用 U0126处理12h 后,这些细胞中 HIF-1α和多药耐药相关蛋白的表达下降,且 HIF-1α表达由胞核向胞质转位,其 mRNA 水平无显著变化。结论 ERK/MAPK 信号通路是微环境诱导肝癌产生多药耐药的重要胞内信号传导途径。