PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002对卯巢癌化疗增敏作用的研究

目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002对卵巢癌化疗效果的影响,方法:将LY294002单独或与顺铂、紫杉醇联合作用于卵巢癌A2780、SKOV3细胞,MTT法检测DDP、顺铂单独或联合LY294002处理后对A2780、SKOV3细胞的抑制率;采用流式细胞技术检测药物单独或联合作用对A2780和SKOV3细胞凋亡的影响;应用Western blot检测A2780和SKOV3细胞中AKT及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达的变化。结果:联合应用LY294002能够显著提高DDP、paelitaxel对A2780和SKOV3细胞抑制率;LY294002与DDP、paclitaxel的协同治疗指数小于1,二者起协同治疗作用;联合LY294002能够增加A2780和SKOV3细胞的凋亡水平。LY294002干预组与对照组相比p-AKT蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)结论:LY294002能够有效提高卵巢癌A2780和SKOV3细胞对化疗药物DDP和paclitaxel的敏感性,抑制PI3K/AKT介导的信号传导通路,可明显提高卵巢癌细胞的化疗效果。

hTERT对HeLa细胞放疗后细胞周期的影响

目的:研究端粒酶逆转录酶(hTERT)对HeLa细胞放疗后细胞周期的影响。方法:将野生型端粒酶逆转录酶(WT-hTERT)、端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN-hTERT)和对照质粒(pBABE)电转染于HeLa细胞中,RT-PCR法检测hTERT表达,TRAP-ELISA检测HeLa细胞端粒酶活性改变,Southern-B lot检测端粒长度改变,各转染组细胞分别经5Gy和10Gy60Co照射,流式细胞仪检测其在照射后0、24、48和72h细胞周期分布和凋亡的情况。结果:转染DN-hTERT后,HeLa细胞端粒酶活性下降,端粒长度显著缩短,而转染WT-hTERT后,HeLa细胞端粒酶活性增强,端粒长度较对照组长;各转染组细胞周期分布相似,经60Co照射24h后,各组细胞G2M峰均升高,并随照射剂量增加得更明显,其中WT-hTERT组G2M峰最高,而DN-hTERT组G2M峰最低,60Co照射48h后各组细胞亚G1峰均升高,其中WT-hTERT组最低,而DN-hTERT组最高,对照组和DN-hTERT组G2M阻滞进一步增加,G1峰下降,而WT-hTERT组G2M下降,G1峰升高。结论:DN-hTERT能抑制HeLa细胞端粒酶活性,进而缩短其端粒长度,增强其对放射线的敏感性,而WT-hTERT通过增强G2M阻滞率促进损伤细胞修复。

母血中胎儿有核红细胞数量与胎儿异常的关系

目的 :探讨母血中胎儿有核红细胞数量与胎儿异常的关系 ,为将它用于无创性产前诊断提供实验依据。方法 :对孕 6～ 40周的 86例妇女 (包括胎儿正常组 68例、胎儿异常组 1 8例 )的外周血进行单密度梯度离心、瑞氏染色和细胞计数 ,分析母血中胎儿有核红细胞数量与孕周、胎儿异常及胎儿性别的关系。结果 :胎儿正常组 ,母血中胎儿有核红细胞平均数量为 1 4.2 3±1 2 .0 1 /ml,与妊娠周数呈直线相关 (R >R0 .0 5)。胎儿异常组中 ,母血中胎儿有核红细胞平均数量较正常胎儿组显著增加 ,约为 3 8.73± 2 4.97/ml,且与妊娠周数无明显直线相关性。母体外周血中胎儿有核红细胞数量与胎儿性别无统计学相关性。结论 :胎儿发生异常时母血中胎儿有核红细胞数量较正常妊娠时增加。母血中胎儿有核红细胞数量在胎儿正常时随孕周而增加 ,且不受胎儿性别的影响。母血中胎儿有核红细胞计数可以辅助用于产前筛查胎儿异常的发生。

利用cDNA微阵列进行宫颈鳞癌的分子筛查(英文)

目的使用cDNA微阵列筛选浸润性宫颈鳞癌的淋巴结转移相关基因。方法应用包含18 432个基因的cDNA微阵列测定IB期宫颈鳞癌的全基因序列,包括已知功能的人类转录子和表达序列标签ESTs,分为正常组、淋巴转移组、无淋巴转移三组宫颈组织。为了证实不同的基因表达,选择3个基因进行了冰冻组织的RT-PCR检测和石蜡组织的免疫组化检测。结果经统计学分析,与无淋巴转移浸润性宫颈鳞癌组织比较,有淋巴转移的癌组织有677个基因大于2倍差异,其中上调494个(72.97%),下调183个(27.03%),表达序列标签EST为61个(9.01%),这些基因涉及代谢、发育、信号传导、分化、DNA结合转录和离子通道等。6倍差异基因14个,其中只有nel(chicken)like-2下调,其余为上调基因。RT-PCR和免疫组化的结果与cDNA微阵列结果一致。结论利用cDNA微阵列检测基因的表达状态可以预测宫颈鳞癌淋巴结转移和宫颈癌的预后情况。Cx43的低表达、ETV5和整合素alpha 2的高表达可能会成为评估浸润性宫颈鳞癌恶性程度的重要指标。这些分子有利于预测浸润性宫颈鳞癌的预后及其相应的分子治疗。

改良式腹腔镜输卵管吻合术

本文在以往的腹腔镜下输卵管吻合术的基础上进行以下改良:①减少一个穿刺点,由一人操作完成;②用静脉留置针经下腹壁直接注射输卵管系膜形成水垫;③仅游离输卵管浆膜暴露输卵管盲端;④5-0血管缝合线端-端吻合管壁,缝合时以滑结为主,使缝合时输卵管的端-端维持在分离状态,降低手术难度。此法有利于推广。

胰岛素抵抗在PCOS中的意义及治疗

多囊卵巢综合征(PCOS)是妇女一种常见的高度异质性疾病,其病因还不十分清楚。近年发现胰岛素抵抗是PCOS的发病环节之一,这也为胰岛素增敏剂的应用提供了理论依据,开辟了PCOS治疗的新领域。

血管紧张素受体AT1R和AT2R在不同孕期人类胎儿肾脏组织中的分布

目的研究血管紧张素受体AT1R和AT2R在不同孕期人类胎儿肾脏组织中的分布以及表达含量的变化。方法选取54例不同孕周自然流产、米非司酮或利凡诺引产的胎儿肾脏标本，采用免疫组化染色及半定量分析的方法，检测AT1R和AT2R在不同孕周胎儿肾脏组织上的分布及其表达量的变化，同时观察不同引产方法对AT1R和AT2R表达的影响。结果①AT1R和AT2R从孕12周就开始在胎儿肾脏组织中大量表达，并表现出时间性和空间性的特点。时间性表现在：孕12—16周AT1R表达的量较少（17958±1004）μm^2，孕16—28周逐渐增加，至孕28周后其表达上升近3倍（52975±4817）μm^2；而AT2R则相反，孕12～16周较高（72738±2134）μm^2，孕16—28周减少，至孕28周后下降近3倍（24796±1945）μm^2；空间性表现在，在同一肾脏中，集合管中表达的量最高，肾小管次之，肾小球中最低。②利凡诺引产会造成AT1R和AT2R在胎儿肾脏中表达减少。结论AT1R和AT2R在胚胎发育早期就已经在肾脏中表达，它们的分布具有特殊性。

p16基因蛋白在外阴鳞状细胞癌中的表达

为探讨p16基因表达与外阴鳞状细胞癌(V SCC s)发生、发展的关系,应用免疫组化法检测53例外阴上皮非瘤样病变(NNED)、7例外阴上皮内瘤变(V IN)及21例角化型V SCC s中p16蛋白的表达。结果显示,在NNED、V IN和V SCC s中p16高表达率(阳性细胞数≥5%)分别为86.7%、42.8%和28.6%,呈下降趋势(P<0.05)。V SCC s和V IN组中p16高表达率显著低于NNED组,差异有显著性(P<0.05),而在V IN组与V SCC s组之间相比较差异无显著性(P>0.05)。提示p16低表达或缺失可能是角化型V SCC s发生中的重要分子事件。

血管生成因子、血管生成与宫颈癌的关系

血管生成是影响肿瘤生物学行为的重要因素之一。综述肿瘤血管生成的过程及其调控机制,总结国外已报道的促血管生成因子和抑制血管生成因子类型,针对宫颈癌血管生成及血管生成因子的研究进展进行较为详细的阐述。

腹腔镜手术与开腹手术治疗对异位妊娠患者再次宫内受孕时限的影响分析

目的研究对异位妊娠实施腹腔镜手术与开腹手术治疗后患者再次宫内受孕时限的影响。方法抽取特定时段内本院接收的异位妊娠患者68例展开研究,根据治疗措施差异将其分为两组,对照组传统开腹手术,观察组腹腔镜手术,对比术中术后指标情况、疼痛情况、治疗后输卵管畅通和再次宫内受孕情况。结果观察组术中术后指标均较对照组好,疼痛VAS评分明显较对照组低。治疗后输卵管畅通率97.0%,对照组82.3%,受孕率91.1%,对照组70.5%,且观察组受孕时间较对照组短,术中术后指标情、疼痛情况、治疗后输卵管畅通和再次宫内受孕情况对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论对异位妊娠患者实施腹腔镜手术治疗疗效显著,值得推广。

第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制

目的探讨第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因（PTEN）对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制。方法将携带外源性人PTEN基因的野生型质粒（WT—PTEN）和磷酸酶域突变型质粒（C124A—PTEN）转入人卵巢癌细胞株A2780中，利用Transwell小室法和划痕愈合实验检测转染前后细胞侵袭和迁移能力的变化，应用Western blot检测各组细胞PTEN及其下游相关蛋白表达的变化。以空载体质粒和未转染细胞作为对照。结果细胞侵袭实验显示，WT-PTEN／A2780、C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞穿透Matrigel胶的细胞数，分别为（24．3±2．5）个、（43．7±3．8）个、（44．7±2．1）个和（45．0±3．0）个，WT-PTEN／A2780细胞的穿膜数明显少于其他各组（P〈0．05）。划痕愈合实验显示，WT—PTEN／A2780、C124A-PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞的迁移距离分别为（54．1±3．7）μm、（78．7±3．4）μm、（78．1±3．1）μm和（76．8±3．5）μm，WT-PTEN／A2780细胞的迁移速度明显慢于C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。WT-PTEN／A2780细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达明显低于C124A．PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。结论野生型PTEN可有效抑制A2780细胞的侵袭和迁移，该抑制作用与A2780细胞中MMP-9表达下调有关。