生物活性肽--白蛋白多肽

白蛋白多肽是鸡蛋蛋清中主要的蛋白质经不同的酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶)酶解后得到的产物,其分子量小于3000Da,白蛋白多肽由不同氨基酸序列的肽类组成,显示出广泛的生理调节功能,包括调节人体免疫功能、血管紧张素转换酶(Angiotensin-Ⅰ-converting enzyme,ACE)抑制功能、保护肾脏功能、捕获自由基、抗氧化应激抗衰老、调节胃肠道功能等功效,在祛病、防病、抗衰老、增强体质、增加营养等方面,具有广阔的应用前景。

pCH510转染膀胱癌细胞系BIU-87对卡介苗抑瘤作用的影响

目的研究膀胱癌细胞系BIU-87体外转染pCH510后,CH50多肽的表达及其对卡介苗(bacilluscalmette-guerin,BCG)抑瘤作用的影响。方法在LipofectimineTM2000的介导下,将质粒pCH510体外转染给BIU-87细胞,采用免疫组织化学S-P法和WesternBlot法鉴定CH50多肽的表达;通过四唑盐比色法(MTT法)观察pCH510转染BIU-87对BCG细胞毒作用的影响。结果BIU-87细胞转染pCH510后阳性表达CH50多肽,对照组则不表达;CH50多肽阳性表达增强了BCG对BIU-87的细胞毒性作用(P<0.05)。结论转染pCH510后,BIU-87细胞表达CH50多肽,并因此促进了BCG对膀胱癌细胞的抑制作用。

DiI标记脂蛋白改良法的建立

为了改进脂蛋白的荧光标记方法 ,本实验采用经超速离心后的离心管底层血清取代商品化的去脂血清作为脂蛋白标记时的介质 ,与荧光染料DiI混合孵育。经超速离心分离后获得DiI标记的极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白及β 极低密度脂蛋白。本方法在标记过程中不用去脂血清 ,降低了标记成本并缩短了超速离心时间。配体与受体结合实验结果发现 ,用本方法标记的脂蛋白能以可饱和方式结合体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞和中国仓鼠卵母细胞。表明本方法标记的脂蛋白保持了正常脂蛋白的配体功能 。

神经元GABA合成、分解和分泌与癫痫发病的研究

目的 研究神经元的γ-氨基丁酸 (GABA)合成、分解和分泌与癫痫发病的关系。方法 用致痫剂马桑内酯 (CL )和抗痫剂苯妥英钠 (PHT)处理培养大鼠神经元 ,用高效液相色谱仪 ,紫外分光光度计分别检测培养神经元内外的 GABA浓度和神经元内γ-氨基丁酸转氨酶 (GABA - T)活性。结果 与对照组比较 ,CL使神经元内GABA- T活性显著增强 (P<0 .0 5 ) ,对神经元内外 GABA浓度没有影响。与 CL处理组以 (10 0μmol/ L CL培养神经元 2 4h)比较 ,PHT使 CL致痫神经元内 GABA- T活性显著减弱 (P<0 .0 5 ) ,基本恢复到对照组水平。但神经元内外 GABA浓度仍相对稳定。结论 癫痫发病中 ,痫性神经元合成、分解 GABA增强 ,分泌

鸡贫血病毒VP3基因的克隆及在H22细胞中的凋亡诱导状况

目的 :观察CAV、VP3基因在H2 2细胞中的凋亡诱导情况。方法 :用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的VP3基因 ,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上 ,构建含VP3基因的重组体 ;在体外 ,利用LipofectAMINETM 介导的基因转染法 ,将pcDNA VP3、pcDNA3分别转入小鼠腹水型肝癌细胞系H2 2中 ,RT PCR法检测VP3基因在细胞中的表达状况。同时利用流式细胞检测术验证VP3基因诱导死亡的方式。结果 :酶切鉴定及测序分析表明 ,插入片段和预期相符 ,阳性重组体被命名为pcDNA VP3;RT PCR结果表明 ,转染后 ,VP3基因在细胞中得到了表达 ;同时DNA直方图也证实鸡贫血病毒的VP3基因确以凋亡的方式诱导细胞死亡。

不同重复序列缺失的极低密度脂蛋白受体基因转染的中国仓鼠卵巢细胞与β-极低密度脂蛋白的结合效应

为了探索极低密度脂蛋白受体配体结合域中 8个重复序列在结合脂蛋白中的作用 ,利用基因缺失诱变的方法 ,构建了不同重复序列缺失的极低密度脂蛋白受体缺失突变真核表达载体 ,并将各重组体转移至体外培养的中国仓鼠卵巢细胞。通过逆转录—聚合酶链反应检测到外源基因的表达。转染细胞与DiI标记的 β 极低密度脂蛋白结合实验发现 :重复序列 1,2缺失的极低密度脂蛋白受体结合 β 极低密度脂蛋白的能力明显降低。为进一步研究极低密度脂蛋白受体结构与功能的关系奠定了基础。

Alzheimer病早期生化诊断指标的进展

Alzheimer病 (AD)的早期诊断是其治疗和预后的限制性因素。目前从AD患者脑脊液中发现一些具有诊断意义的生化指标有tau蛋白 ,β 淀粉样蛋白 (Aβ) ,载脂蛋白E(ApoE) ,Aβ的前体蛋白 (APP) ,早老素 (PS 1 ,PS 2 )和天冬氨酸转氨酶 (AST)等。其中以脑脊液中的tau蛋白 ,尤其是过度磷酸化tau蛋白 (p tau)有可能成为AD的早期诊断的生化指标。

乙酰胆碱对人房颤心房肌电生理特性的影响

目的观察房颤时人心房肌细胞动作电位变化及迷走神经递质乙酰胆碱（ACh）对离体人心房肌动作电位（AP）及有效不应期（ERP）的影响。方法选择20例心脏瓣膜病患者分为两组，其中11例合并房颤者为房颤组（AF），9例窦性心律者为对照组（SR），术中取右心耳组织，采用玻璃微电极技术，检测两组患者静息膜电位（RMP），动作电位复极达90％的时程（APD90），动作电位复极达50％的时程（APD50）及不同起搏频率下APD90的变化，同时观察给予Ach前后上述指标的变化。结果Ach灌注前，AF组与SR组间RMP（63．70±3．00）mV比（54．70±2．19）mV、APD90（312．60±11．92）ms比（406．30±14．61）ms、APD50（177．30±14．05）ms比（218．50±15．10）ms差异有统计学意义（P〈0．05）。Ach灌注后，AF与sR两组间RMP（67．8±2．0）mv比（61．4±1．8）mV、APD90（263．60±13．38）ms比（316．20±15．40）ms、APD50（173．60±16．82）ms比（217．60±15．16）ms差异有统计学意义（P〈0．05）。与灌注前自身比较，两组RMP显著增高、APD90显著缩短（P〈0．05）。APD50差异无统计学意义（P〉0．05）。但在AF组患者，其APD90缩短程度（AAPD90，％）较SR组1h（P〈0．05）。结论房颤时存在心房组织APD缩短，频率适应性降低等电重构，它促进了房颤的维持。Aeh可加重重构作用，但在慢性房颤中这种作用减弱。这种改变可能是机体对抗房颤的一种调节机制。