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糖原合酶激酶3β和腺瘤性结肠息肉病蛋白在气道上皮细胞机械损伤修复过程的时空分布
被引量:
8
1
作者
朱敏
李建莎
+3 位作者
田丹
马燕
李娜萍
吴人亮
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期197-203,共7页
为了探讨糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)和腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli, APC)蛋白在气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)损伤和修复中的作用,我们采用机械划线损伤的方法建立体外气道...
为了探讨糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)和腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli, APC)蛋白在气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)损伤和修复中的作用,我们采用机械划线损伤的方法建立体外气道上皮损伤修复模型,采用Western blot、免疫荧光双标共聚焦成像和免疫沉淀的方法观察损伤修复过程中APC蛋白和GSK3β在AECs中表达及分布的动态变化。结果显示:(1)用Western blot方法观察到划线损伤0.5 h后即有GSK3β磷酸化增强(P< 0.05),6 h达到高峰(P<0.05),持续到12 h(P<0.05),24 h开始下降,而GSK3β总量大致保持一致。(2)在免疫荧光双标共聚焦成像实验中,划线损伤0 h组APC蛋白主要表达于胞浆,而划线损伤6 h后APC蛋白主要聚集于损伤前沿区的迁移活跃细胞。(3)免疫共沉淀的实验结果显示,划线损伤0 h时GSK3B和APC蛋白能共同沉淀,但在划线损伤6 h之后,两者发生了分离。以上结果表明:划线损伤后AECs立即启动修复过程,此时GSK3B的活性被抑制,促使APC蛋白游离出来;游离出来的APC蛋白则与微管正极结合,增加了微管的稳定性,从而调节细胞骨架运动,促进气道上皮的损伤修复。
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关键词
糖原合酶激酶3Β
腺瘤性结肠息肉病蛋白
气道上皮细胞
损伤修复
下载PDF
职称材料
糖原合酶激酶3β以细胞周期蛋白D1依赖性方式引发人肺腺癌细胞A549细胞周期阻滞
被引量:
2
2
作者
李建莎
朱敏
+4 位作者
田丹
王满香
王芳
李娜萍
吴人亮
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期204-209,共6页
对糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,6SK3β)在细胞增殖中的作用研究,在不同细胞系和不同刺激因素作用下得出了不同结论,本文旨在探讨GSK3β在人肺腺癌细胞系A549细胞生长中的直接作用。A549细胞瞬时转染持续激活型S9A-GSK...
对糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,6SK3β)在细胞增殖中的作用研究,在不同细胞系和不同刺激因素作用下得出了不同结论,本文旨在探讨GSK3β在人肺腺癌细胞系A549细胞生长中的直接作用。A549细胞瞬时转染持续激活型S9A-GSK3β以及显性负突变型KM-GSK3β两种GSK3β突变型质粒,改变GSK3β活性。24 h后,分别进行细胞计数,流式细胞术及Western blot检测。结果显示,增强GSK3β活性可导致细胞数量下降,G.期细胞百分比升高。细胞周期蛋白D1表达水平被GSK3β下调。结果提示,GSK3β可能以细胞周期蛋白D1依赖性方式引发A549细胞的G,期阻滞,从而发挥生长抑制效应。
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关键词
糖原合酶激酶3Β
细胞增殖
细胞周期
细胞周期蛋白D1
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职称材料
题名
糖原合酶激酶3β和腺瘤性结肠息肉病蛋白在气道上皮细胞机械损伤修复过程的时空分布
被引量:
8
1
作者
朱敏
李建莎
田丹
马燕
李娜萍
吴人亮
机构
华中科技大学同济医学院病理学系卫生部呼吸系统疾病重点实验室
出处
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期197-203,共7页
基金
This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30470757).
文摘
为了探讨糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)和腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli, APC)蛋白在气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)损伤和修复中的作用,我们采用机械划线损伤的方法建立体外气道上皮损伤修复模型,采用Western blot、免疫荧光双标共聚焦成像和免疫沉淀的方法观察损伤修复过程中APC蛋白和GSK3β在AECs中表达及分布的动态变化。结果显示:(1)用Western blot方法观察到划线损伤0.5 h后即有GSK3β磷酸化增强(P< 0.05),6 h达到高峰(P<0.05),持续到12 h(P<0.05),24 h开始下降,而GSK3β总量大致保持一致。(2)在免疫荧光双标共聚焦成像实验中,划线损伤0 h组APC蛋白主要表达于胞浆,而划线损伤6 h后APC蛋白主要聚集于损伤前沿区的迁移活跃细胞。(3)免疫共沉淀的实验结果显示,划线损伤0 h时GSK3B和APC蛋白能共同沉淀,但在划线损伤6 h之后,两者发生了分离。以上结果表明:划线损伤后AECs立即启动修复过程,此时GSK3B的活性被抑制,促使APC蛋白游离出来;游离出来的APC蛋白则与微管正极结合,增加了微管的稳定性,从而调节细胞骨架运动,促进气道上皮的损伤修复。
关键词
糖原合酶激酶3Β
腺瘤性结肠息肉病蛋白
气道上皮细胞
损伤修复
Keywords
glycogen synthase kinase 3β
adenomatous polyposis coli protein
airway epithelial cells
injury and repair
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
糖原合酶激酶3β以细胞周期蛋白D1依赖性方式引发人肺腺癌细胞A549细胞周期阻滞
被引量:
2
2
作者
李建莎
朱敏
田丹
王满香
王芳
李娜萍
吴人亮
机构
华中科技大学同济医学院病理学系卫生部呼吸系统疾病重点实验室
出处
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期204-209,共6页
基金
This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30470757).
文摘
对糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,6SK3β)在细胞增殖中的作用研究,在不同细胞系和不同刺激因素作用下得出了不同结论,本文旨在探讨GSK3β在人肺腺癌细胞系A549细胞生长中的直接作用。A549细胞瞬时转染持续激活型S9A-GSK3β以及显性负突变型KM-GSK3β两种GSK3β突变型质粒,改变GSK3β活性。24 h后,分别进行细胞计数,流式细胞术及Western blot检测。结果显示,增强GSK3β活性可导致细胞数量下降,G.期细胞百分比升高。细胞周期蛋白D1表达水平被GSK3β下调。结果提示,GSK3β可能以细胞周期蛋白D1依赖性方式引发A549细胞的G,期阻滞,从而发挥生长抑制效应。
关键词
糖原合酶激酶3Β
细胞增殖
细胞周期
细胞周期蛋白D1
Keywords
glycogen synthase kinase 3β
cell proliferation
cell cycle
cyclin D 1
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
糖原合酶激酶3β和腺瘤性结肠息肉病蛋白在气道上皮细胞机械损伤修复过程的时空分布
朱敏
李建莎
田丹
马燕
李娜萍
吴人亮
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
8
下载PDF
职称材料
2
糖原合酶激酶3β以细胞周期蛋白D1依赖性方式引发人肺腺癌细胞A549细胞周期阻滞
李建莎
朱敏
田丹
王满香
王芳
李娜萍
吴人亮
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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职称材料
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