小鼠肝缺血再灌注后Toll样受体2在缺血肝组织中的激活及其意义

目的 探索小鼠肝缺血再灌注后缺血肝组织中Toll样受体 2 (TLR2 )的激活及其与肝功能损伤之间的关系。方法 缺血再灌注损伤组 (I/R组 ),假手术对照组 (S组 )均采用实时荧光定量多聚酶链反应检测肝组织中TLR2mRNA及TLR2蛋白的表达,同时检测门静脉血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肿瘤坏死因子α(TNF α)及门静脉血清内毒素 (endotoxin, EN)水平。结果 肝脏部分缺血1h再灌注 4h后,I/R组与S组小鼠缺血肝组织TLR2 mRNA的表达 (ΔCt值 )分别为 1. 0 6±0. 9 1和5. 0 8±1. 3 2, 两组间差异有显著性 (P < 0. 0 1 ),I/R组缺血肝组织TLR2 蛋白的表达 (OD值 )( 4 3 3. 9 1±2 5. 5 3 )水平较S组 ( 1 0 2. 8 6±1 3. 5 8 )显著升高 (P< 0. 0 1 )。I/R组门静脉血清TNF α[ ( 1 1 2. 5 2±1 4. 4 1 )pg/mL]较S组 [ ( 5. 9 6 ±4. 4 3 )pg/mL]显著升高 (P < 0. 0 1 );I/R组ALT[ ( 8 4 8. 3 3±2 7 1. 3 7 )U/L]较S组 [ ( 4 2. 3 9±1 4. 7 5 )U/L]显著升高 (P < 0. 0 1 );而门静脉血清内毒素水平组间差异无显著性 (P> 0. 0 5 )。结论 TLR2mRNA及蛋白在肝脏缺血再灌注过程中缺血肝组织的表达增强, 此变化伴有TNF α的升高及肝功能的损伤。

小鼠肝脏部分缺血再灌注过程中Toll样受体2的激活及意义(英文)

目的探索Toll样受体2(Toll-likereceptor2,TLR2)在小鼠肝脏部分缺血再灌注过程中在缺血肝叶中的激活,分析TLR2的激活与肝功能损伤之间的关系。方法BALB/c小鼠复制肝脏部分缺血再灌注(缺血1h再灌注4h)损伤动物模型(I/R组),假手术对照组(SH组)同样行开腹手术但不夹闭血管。采用实时荧光定量PCR(Real-time-PCR)方法定量检测缺血肝叶中TLR2mRNA的表达变化,同时采用Westernblot检测缺血肝脏组织中TLR2蛋白的表达变化,检测门静脉血浆丙氨酸氨基转移酶(pALT)水平。结果肝脏部分缺血1h再灌注4h后,I/R组与SH组小鼠缺血肝叶TLR2mRNA的表达(ΔCt值)分别为(1.06±0.91)vs(5.08±1.32)(P<0.01),由于ΔCt值越小则基因表达水平越高,说明缺血再灌注过程中缺血肝叶TLR2mRNA的表达水平增高。且I/R组小鼠缺血肝叶TLR2蛋白的表达(OD值)水平较SH组高[(433.91±25.53)vs(102.86±13.58),P<0.01],I/R组中门静脉血清ALT水平升高[(848.33±271.37)μ/Lvs(42.39±14.75)μ/L,P<0.01]。结论TLR2在肝脏缺血再灌注过程中缺血肝叶的表达增强,且这种变化与肝功能的损伤相关。

生长激素相关基因突变与原发闭经的关系

目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发闭经患者出现染色体核型异常,1例出现GHRHR基因点突变,且该突变位点在第7个外显子中。结论GHRHR基因第7个外显子的点突变可能是原发闭经的病因之一。

应用FISH技术分析一例平衡易位t(1;16)伴反复流产

目的: 应用FISH技术分析报道一例伴有t(1;16)的反复流产(RSA)者。方法: 用Biotin-11 -dUTP标记的1号染色体长臂末端探针(1qter)和16号染色体着丝粒特异性α卫星DNA探针(16cen)以及CY3标记的1号染色体着丝粒特异性α卫星DNA探针(1cen)对1例常规G显带核型分析为46,XY,t(1;16)(q21; q13)的反复流产患者进行双色荧光原位杂交研究。 结果: 双色FISH显示该患者t(1;16)易位所致的衍生染色体着丝粒均含有红绿两个信号融合而成。 结论: 双色FISH证实衍生的染色体着丝粒是由1号和16号染色体着丝粒共同组成,该患者最后的核型确诊为46,XY, t(1;16) (p10; q10)。FISH技术是检测染色体结构异常的一种良好的辅助手段。

肝细胞癌中β-链接素基因突变及异常表达

目的检测乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)组织及癌旁组织中β链接素(βcatenin)基因第3外显子突变及其表达异常,探讨其在HBV相关肝细胞癌中的作用。方法采用聚合酶链单链构象多态性(PCRSSCP)、直接测序、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、免疫组织化学技术等方法,检测27例HBV相关肝细胞癌及27例癌旁组织βcatenin基因第3外显子点突变以及βcateninmRNA表达差异性。结果(1)HCC组织中,βcatenin基因第3外显子的点突变率约26%(7/27),分别为密码子37(TCT→TGT),丝氨酸→半胱氨酸;密码子45(TCT→TTT),丝氨酸→苯丙氨酸;密码子35(ATC→ATG),异亮氨酸→蛋氨酸。癌旁组织均未发现突变(P<0.05)。(2)βcateninmRNA在癌组织中的表达量明显高于癌旁组织(0.86±0.07比0.33±0.04,P<0.05)。(3)βcatenin蛋白在癌细胞胞浆及核内聚集。结论βcatenin基因第3外显子突变及βcatenin的过度表达对HBV相关肝细胞癌发生起到重要作用。